蒜氨酸+蒜酶共同作用對環(huán)磷酰胺處理小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用

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1、蒜氨酸+蒜酶共同作用對環(huán)磷酰胺處理小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用作者:陳鋒,顧丹今,陳堅,許晏【摘要】  目的觀察蒜氨酸+蒜酶對環(huán)磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。方法環(huán)磷酰胺造模法制作免疫抑制小鼠模型,給藥10d,測定小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率、血清溶血素、脾淋巴細胞增殖功能及血清IL-2含量,觀察蒜氨酸+蒜酶對小鼠免疫功能的影響。結(jié)果與模型組比較,蒜氨酸+蒜酶在中、高劑量可明顯提高環(huán)磷酰胺所致免疫低下小鼠的腹腔巨噬細胞吞噬率,也可促進血清溶血素形成和脾淋巴細胞的增殖,高劑量可提高血清IL-2含量。結(jié)論蒜氨酸+蒜酶對環(huán)磷酰胺處理小

2、鼠免疫功能低下有免疫保護作用?!娟P鍵詞】蒜氨酸;蒜酶;環(huán)磷酰胺;免疫功能  Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofalliin+alliinasefromgarliconimmunologicalfunctioninimmunosuppressivemodelmicecausedbycyclophosphamide.MethodsTheISmodelinNIHmiceide:Miceinisteredacrophare,serumhemolysinconcentration,thesplee

3、nlymphcellstransformationandthelevelofIL-2inserumeasured.ResultsTheresultsshoiddleandhighdosecouldcauseasignificantincreaseofthephagocyticrate,theproliferationofspleenocyteesandtheserumhemolysin,alliin+alliinaseathighdosecouldincreasethelevelofIL-2.ConclusionAlliin+a

4、lliinasecanstimulatetheimmunologicfunctionofISmice  Keyide;Immunologicalfunction  大蒜是百合科蔥屬多年生草本植物,作為藥食兩用歷史悠久。現(xiàn)代醫(yī)學證明大蒜主要具有抗感染、抗腫瘤和防治心腦血管疾病等3大功效。目前公認大蒜的生物活性成分主要是蒜酶(alliinase)催化蒜氨酸產(chǎn)生的大蒜辣素(allicin)、阿霍烯(ajoene)等系列含硫有機化合物[1]。大蒜的抗腫瘤作用與其免疫調(diào)節(jié)作用有關。大蒜不同制劑對機體免疫功能的影響已有廣泛報道。本實驗研究了

5、蒜氨酸+蒜酶對環(huán)磷酰胺所致免疫受抑小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用?! ?材料  1.1動物NIH小鼠,(20±2)g,雌雄兼用,購自新疆醫(yī)科大學動物實驗中心?! ?.2藥物蒜氨酸及蒜酶單體由新疆醫(yī)科大學藥學院采用新疆地產(chǎn)大蒜提取并純化。蒜氨酸與蒜酶以2∶1比例經(jīng)雙蒸水混合,35℃水浴反應30min,形成純品大蒜辣素(稱做蒜氨酸+蒜酶),根據(jù)預實驗結(jié)果確定(125+63),(250+125),(500+250)mg·kg-1等低、中、高3個劑量。  1.3試劑環(huán)磷酰胺(CP)購自上海華聯(lián)制藥有限公司;綿羊紅細胞懸液(SRBC):由新疆醫(yī)科

6、大學動物實驗中心提供。Alsever's血球保存液:按常規(guī)配制。都氏試劑:NaHCO31.0g,K0.05g,高鐵氰化鉀0.2g,加水至1L。4℃保存。豚鼠補體:多個豚鼠心臟采血,分離血清,混合。按血清:綿羊紅細胞=20∶1的比例加入壓積SRBC中,4℃放置20min。2000r/min,離心10min,吸取上清液,生理鹽水稀釋8倍?! ?方法  2.1分組隨機將50只NIH小鼠分成蒜氨酸+蒜酶(低,中,高劑量)  劑量組及正常對照組和模型組,共5組,每組10只。正常對照組每日用生理鹽水(20mg·kg-1)灌胃,共10d;模型

7、組每日用生理鹽水(20mg·kg-1)灌胃,共10d,并在第7天開始同時腹腔注射環(huán)磷酰胺(17.5mg·kg-1),共4d;各給藥組分別用不同劑量的蒜氨酸+蒜酶給相應各組小鼠灌胃,持續(xù)10d,并在第7天開始同時腹腔注射環(huán)磷酰胺(17.5mg·kg-1),共計4d。第11天測定各項免疫指標。  2.2小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的測定[2]   小鼠腹腔注射1%雞紅細胞,1ml/只;30min后,再腹腔注射生理鹽水1ml/只,斷頸處死小鼠,吸取腹腔液、涂片,1∶1丙酮甲醇固定5min,Gimesa染色,油鏡觀察。每份標本油鏡下觀察20

8、0個巨噬細胞,計算吞噬雞紅細胞的巨噬細胞百分率。吞噬率(%)=(吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)/200個巨噬細胞)×100%?! ?.3對小鼠淋巴細胞增殖的影響   應用MTT法[3,4]。處死小鼠用75%酒精浸泡5min,無菌操作取脾,置hank's液中于200目網(wǎng)

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