復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊水提液絮凝澄清工藝研究

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1、復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊水提液絮凝澄清工藝研究【摘要】目的優(yōu)選復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊水提液最佳絮凝澄清工藝。方法采用正交實驗法,以丹酚酸B、總多糖、總酚酸含量及總固體得率為指標,考察殼聚糖用量、藥液濃度及pH值對絮凝澄清工藝的影響。結(jié)果殼聚糖用量對丹酚酸B、總多糖、總酚酸的含量及總固體得率有顯著性影響(F0.05),藥液濃度、pH無顯著性影響。結(jié)論生藥∶藥液=1∶3,,pH=4.0,殼聚糖加入量為0.24ml/g生藥為最佳絮凝澄清工藝?!娟P(guān)鍵詞】復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊;殼聚糖;澄清工藝 復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊為多年臨床經(jīng)驗方,用于高脂血癥及脂代謝紊亂相關(guān)疾病的治療,療效顯著,已獲國家

2、發(fā)明專利。該方由丹參、白術(shù)、佛手等中藥組成,具有健脾益腎、舒肝化痰、理氣涼血、祛瘀解毒之功效。前期研究結(jié)果顯示,丹參、白術(shù)、佛手中水溶性組分具有調(diào)節(jié)血脂,抗脂質(zhì)過氧化,抗動脈粥樣硬化等作用[1~3]。因此,丹參、白術(shù)、佛手等藥材以水為提取溶劑進行提取,但在有效成分被提取出的同時,大量水溶性雜質(zhì)也被提出。為去除雜質(zhì),富集有效成分,提高制劑的穩(wěn)定性,在前期實驗研究確定采用殼聚糖絮凝法精制的基礎(chǔ)上,本實驗進一步采用正交實驗法,以丹酚酸B、總酚酸、總多糖含量及總固體得率為指標,優(yōu)選最佳的絮凝澄清精制工藝條件?! ?儀器與試藥  DIONEXultimate3000(

3、德國);UV-1101型分光光度計(上海天美);RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海嘉鵬科技有限公司);BS423S型電子分析天平(北京賽多利斯);KQ-250型醫(yī)用超聲波清洗機(昆山超聲儀器有限公司,功率250)濾過,濃縮,定容至3000ml,作為樣品溶液?! ?.2殼聚糖絮凝劑的制備稱取殼聚糖1g,加入2%的醋酸溶液100ml,攪拌,靜置24h,攪拌均勻,配制成1%的溶液。  2.3精制工藝實驗根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果,選出殼聚糖用量、藥液濃度、pH值3個試驗因素,每因素3水平(見表1)。按L9(34)正交實驗表進行實驗安排,在一定溫度(50℃)下,加入殼聚糖絮凝劑,攪

4、勻(50r·min-1),靜置,離心,取上清液,定容,作為樣品溶液。分別測定各樣品溶液中總多糖、總酚酸、丹酚酸B的含量及總固體得率。表1因素水平  2.4總多糖含量測定  2.4.1葡萄糖標準曲線的繪制精密稱取干燥至恒重的無水葡萄糖0.0556g,加水溶解并定容50ml量瓶中,制成每毫升含1.112mg的溶液,作為對照品溶液。分別精密吸取對照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml至50ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,精密吸取上述各濃度溶液2ml,分別加入2%苯酚溶液1ml,搖勻,迅速加入濃硫酸5ml,搖勻,靜置5min,至沸水浴中加熱15mi

5、n,取出,快速用冷水冷卻至室溫。以水為空白,同樣顯色操作制備空白對照,于紫外可見分光光度計490nm波長處測其吸光度。以葡萄糖毫克數(shù)為橫坐標,以吸光度為縱坐標,得回歸方程Y=2.8122X+0.1406,r=0.9993。葡萄糖在0.02224~0.13344mg范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系?! ?.4.2供試品溶液制備分別精密量取各正交實驗所得濃縮液各100ml,加乙醇使含醇量達85%,靜置,濾過,濾渣分別用無水乙醇、丙酮洗滌,干燥,加水溶解并定容至25ml,作為供試品溶液?! ?.4.3穩(wěn)定性考察精密量取供試品溶液100μl,置25ml刻度試管中,按“2

6、.4.1”項下方法操作,測定吸光度,然后每隔30min測定1次(n=6),150min內(nèi)吸光度基本不變,表明供試品在150min內(nèi)基本穩(wěn)定。  2.4.4含量測定精密量取各供試品溶液100μl,置25ml試管中,按“2.4.1”項下方法操作,測定吸光度,計算總多糖的含量。結(jié)果見表2。  2.5總酚酸測定  2.5.1原兒茶醛標準曲線的繪制精密稱取原兒茶醛對照品0.01422g于25ml量瓶中,加水溶解定容至刻度,搖勻,即得。分別吸取原兒茶醛對照品溶液0.5,1,1.2,1.5,2ml于20ml量瓶中,分別加入0.5%亞硝酸鈉溶液5ml,搖勻,放置12min后

7、,加入10%硝酸鋁溶液0.5ml,搖勻,放置12min后,加入1mol·L-1氫氧化鈉溶液5.0ml,加水稀釋至刻度,搖勻,10min后,用紫外可見分光光度計于490nm波長處測定吸光度[4],以原兒茶醛毫克數(shù)對吸光度繪制標準曲線,結(jié)果原兒茶醛在0.2844~1.1376mg范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系,回歸方程為:Y=0.9314X-0.0666,r=0.9988?! ?.5.2穩(wěn)定性實驗精密量取供試品溶液于20ml量瓶中,按“2.5.1”項下方法操作,每間隔10min測定1次,測定結(jié)果表明,顯色后60min內(nèi)供試品基本穩(wěn)定?! ?.5.3含量測定精密量取

8、各供試品溶液100μl,置25ml刻度試管中,按“2

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