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《復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊水提液絮凝澄清工藝研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊水提液絮凝澄清工藝研究【關(guān)鍵詞】復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊;殼聚糖;澄清工藝 復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂膠囊為多年臨床經(jīng)驗(yàn)方,用于高脂血癥及脂代謝紊亂相關(guān)疾病的治療,療效顯著,已獲國家發(fā)明專利。該方由丹參、白術(shù)、佛手等中藥組成,具有健脾益腎、舒肝化痰、理氣涼血、祛瘀解毒之功效。前期研究結(jié)果顯示,丹參、白術(shù)、佛手中水溶性組分具有調(diào)節(jié)血脂,抗脂質(zhì)過氧化,抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用[1~3]。因此,丹參、白術(shù)、佛手等藥材以水為提取溶劑進(jìn)行提取,但在有效成分被提取出的同時(shí),大量水溶性雜質(zhì)也被提出。為去除雜質(zhì),富集有效成分,提高制劑的穩(wěn)定性,
2、在前期實(shí)驗(yàn)研究確定采用殼聚糖絮凝法精制的基礎(chǔ)上,本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步采用正交實(shí)驗(yàn)法,以丹酚酸B、總酚酸、總多糖含量及總固體得率為指標(biāo),優(yōu)選最佳的絮凝澄清精制工藝條件?! ?儀器與試藥 DIONEXultimate3000(德國);UV-1101型分光光度計(jì)(上海天美);RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海嘉鵬科技有限公司);BS423S型電子分析天平(北京賽多利斯);KQ-250型醫(yī)用超聲波清洗機(jī)(昆山超聲儀器有限公司,功率250)濾過,濃縮,定容至3000ml,作為樣品溶液?! ?.2殼聚糖絮凝劑的制備稱取殼聚糖1g,加入2%的
3、醋酸溶液100ml,攪拌,靜置24h,攪拌均勻,配制成1%的溶液?! ?.3精制工藝實(shí)驗(yàn)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選出殼聚糖用量、藥液濃度、pH值3個(gè)試驗(yàn)因素,每因素3水平(見表1)。按L9(34)正交實(shí)驗(yàn)表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)安排,在一定溫度(50℃)下,加入殼聚糖絮凝劑,攪勻(50r·min-1),靜置,離心,取上清液,定容,作為樣品溶液。分別測(cè)定各樣品溶液中總多糖、總酚酸、丹酚酸B的含量及總固體得率。表1因素水平 2.4總多糖含量測(cè)定 2.4.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取干燥至恒重的無水葡萄糖0.0556g,加水溶解并定容50m
4、l量瓶中,制成每毫升含1.112mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml至50ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,精密吸取上述各濃度溶液2ml,分別加入2%苯酚溶液1ml,搖勻,迅速加入濃硫酸5ml,搖勻,靜置5min,至沸水浴中加熱15min,取出,快速用冷水冷卻至室溫。以水為空白,同樣顯色操作制備空白對(duì)照,于紫外可見分光光度計(jì)490nm波長處測(cè)其吸光度。以葡萄糖毫克數(shù)為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),得回歸方程Y=2.8122X+0.1406,r=0.9993。葡萄糖
5、在0.02224~0.13344mg范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系?! ?.4.2供試品溶液制備分別精密量取各正交實(shí)驗(yàn)所得濃縮液各100ml,加乙醇使含醇量達(dá)85%,靜置,濾過,濾渣分別用無水乙醇、丙酮洗滌,干燥,加水溶解并定容至25ml,作為供試品溶液?! ?.4.3穩(wěn)定性考察精密量取供試品溶液100μl,置25ml刻度試管中,按“2.4.1”項(xiàng)下方法操作,測(cè)定吸光度,然后每隔30min測(cè)定1次(n=6),150min內(nèi)吸光度基本不變,表明供試品在150min內(nèi)基本穩(wěn)定?! ?.4.4含量測(cè)定精密量取各供試品溶液100
6、μl,置25ml試管中,按“2.4.1”項(xiàng)下方法操作,測(cè)定吸光度,計(jì)算總多糖的含量。結(jié)果見表2?! ?.5總酚酸測(cè)定 2.5.1原兒茶醛標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取原兒茶醛對(duì)照品0.01422g于25ml量瓶中,加水溶解定容至刻度,搖勻,即得。分別吸取原兒茶醛對(duì)照品溶液0.5,1,1.2,1.5,2ml于20ml量瓶中,分別加入0.5%亞硝酸鈉溶液5ml,搖勻,放置12min后,加入10%硝酸鋁溶液0.5ml,搖勻,放置12min后,加入1mol·L-1氫氧化鈉溶液5.0ml,加水稀釋至刻度,搖勻,10min后,用紫外可見
7、分光光度計(jì)于490nm波長處測(cè)定吸光度[4],以原兒茶醛毫克數(shù)對(duì)吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果原兒茶醛在0.2844~1.1376mg范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系,回歸方程為:Y=0.9314X-0.0666,r=0.9988。 2.5.2穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密量取供試品溶液于20ml量瓶中,按“2.5.1”項(xiàng)下方法操作,每間隔10min測(cè)定1次,測(cè)定結(jié)果表明,顯色后60min內(nèi)供試品基本穩(wěn)定?! ?.5.3含量測(cè)定精密量取各供試品溶液100μl,置25ml刻度試管中,按“2.5.1”項(xiàng)下方法操作,測(cè)定吸光度,計(jì)算總酚酸含量。結(jié)果
8、見表2?! ?.6丹酚酸B含量測(cè)定 2.6.1色譜條件與系統(tǒng)試用性色譜柱KromasilC18(5μm,250mm×4.6mm);流動(dòng)相甲醇-乙腈-0.1%甲酸(24∶10∶66);流速1ml·min-1;檢測(cè)波長286nm;進(jìn)樣10μl。 2.6.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱取丹酚酸B對(duì)照品0.011590g,加75%甲醇制成每毫升