正文畢業(yè)論文

《正文畢業(yè)論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。

1、實用標準文案轉基因小鼠在生命科學中的研究進展近三十年以來，隨著分子生物學、細胞工程、遺傳工程技術及繁育新技術等技術手段的發(fā)展，轉基因小鼠應運而生，轉基因小鼠也稱遺傳工程小鼠(Geneti-callyEngineeredMouse，GEM)，是生物學家利用分子生物學、細胞工程、遺傳工程技術及繁育等各項新技術，對實驗小鼠基因組進行定向地改造或修飾，使改造后的小鼠有特定的生物表型或特性，從而便于生物學家利用其作為人類或其它重要動物的疾病模型，研究疾病的發(fā)病機理或篩選預防治療用藥物，或者作為載體研究基因的功能、調控機理及相互作用等基因的作用機制。1980年，美國科學家Gordon(1980年)

2、及其同事等[1]利用顯微注射將純化的外源基因注于小鼠受精卵前核，實現(xiàn)了外源基因在小鼠的表達，首次獲得轉基因小鼠。目前轉基因小鼠已廣泛用于生物研究領域，其中主要包括疾病模型研究、基因表達、新藥毒理實驗以及醫(yī)藥開發(fā)應用等。1轉基因小鼠技術概述自其誕生以來的30多年里，轉基因動物技術經過世界各國生物學家們的不懈努力，已經成為一項非常成熟的技術手段，極大的促進了相關生命科學領域研究進展，至今已經取得了輝煌的成就并且在不斷得到改進和發(fā)展[2]。轉基因技術運用于動物育種的研究始于70年代，經過近30多年的研究和不斷發(fā)展，取得了突破性進展。1974年Jaenish和MintzIZI[3]通過微注射法

3、向移植前的小鼠注射SV40病毒DNA，后在實驗小鼠部份細胞中檢測到該病毒的DNA，首次成功獲得轉基因小鼠，雖然該轉基因小鼠傳代的幾率小。隨著科學技術的不斷進步，在1976年，Jaenish又通過反轉錄病毒感染小鼠的胚胎，將目標基因組整合到實驗鼠中得到了能傳代的轉基因小鼠；1980年,Gordon等[1]首先用受精卵原核注射法,將皰疹病毒基因SV40DNA段和PBR32DNA段分別注射到小鼠原核期的胚胎中,獲得了相應的轉基因小鼠。1982年美國科學家Palmiter將大鼠生長激素基因導人小鼠受精卵后，獲得了首批被稱為“碩鼠”的轉基因動物[4]。1985年，Hanahan等將SV40T抗原

4、基因與大鼠胰島素啟動子(RIP)體外整合后導入小鼠早期胚胎細中，構建了SV40T抗原基因轉基因小鼠，在小鼠體內檢測到特異性T抗原，T抗原表達時間的早晚影響轉基因小鼠對T抗原的免疫應答：胚胎早期表達T抗原的小鼠精彩文檔實用標準文案對SV40T抗原發(fā)生免疫耐受，胰腺組織正常；胚胎晚期表達T抗原的小鼠體內產生抗自身胰島B細胞的抗體，出現(xiàn)自身免疫性糖尿病[5]。近年來，隨著現(xiàn)代分子生物學和轉基因動物技術的日臻完善，轉基因小鼠及其他轉基因動物逐漸成為現(xiàn)代醫(yī)學及其他學科研究中的一個十分重要的工具。縱觀此間發(fā)展歷程，轉基因動物帶來的不僅僅是一種全新的藥物生產模式，極大地降低生物藥品的成本和投資風險，

5、為人類社會帶來了新的經濟增長點，如今的動物乳腺反應器生產的藥物占所有基因工程藥物的95％，帶來了巨大經濟效益，潛藏巨大的市場價值，相信隨著應用的不斷革新，其必將逐漸形成具有高額利潤的新興產業(yè)。另一方面，轉基因動物技術在構建診斷和治療人類疾病的動物模型等方面發(fā)揮了巨大作用。作為新生的前沿科技，在轉基因動物的發(fā)展過程中也存在著一定的問題，需要科學工作者的不斷探討，但無可否認，轉基因動物正以它特有的、潛在的優(yōu)勢蓬勃發(fā)展，相信隨著理論和技術的不斷完善，轉基因動物及其相關的產品必將進入真正的產業(yè)化和市場化階段，為人類的生產和發(fā)展起著推動性的作用。作為全新的疾病研究平臺，轉基因動物也將為人類疾病研

6、究提供便捷的研究條件，不斷推進疾病研究，為人類健康作出前所未有的貢獻。2轉基因小鼠構建技術2.1轉基因小鼠構建主要過程轉基因小鼠構建主要過程分為三步:第一步，明確實驗動物在特定專業(yè)研究中的利害，根據研究需要建立相應的穩(wěn)定繁育系統(tǒng)，按實驗的動物質量標準進行遺傳學、微生物學、飼養(yǎng)管理等方面的標準化。第二步，利用分子生物學技術制備目的基因，構建基因載體，再用轉基因技術將該外源目的基因轉入受精卵。第三步，分析評估含外源基因鼠的優(yōu)缺點、生理生化特性及預測或解釋外源基因在鼠體系統(tǒng)中的表型，用實驗動物繁育技術(包括回交、側交、雜交等)建立生物學性狀限定的基因工程動物[6]?；蚬こ绦∈髮嶒瀯游飿藴驶?/p>

7、的過程主要包括：首先，質量控制是標準化的基礎，其中遺傳、微生物和標準品系的保種育種是質量控制的核心。遺傳質量標準按動物用途，選擇各種近交系，利用雜交、回交等技術建立具有穩(wěn)定遺傳背景的小鼠品系，用PCR等技術測定外源基因的整合狀況。微生物質量標準控制按微生物種類限定要求，用剖腹產技術和屏障飼喂技術分別產生無菌(GF)鼠、悉生鼠及SPF鼠。保種育種是轉基因小鼠能保存及推廣應用的精彩文檔實用標準文案關鍵，目前多采用胚胎冷凍保存鼠種或精子冷凍保種技術。