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1、第五章DNA損傷與修復(fù)一、名詞解釋1、錯(cuò)義突變2、無義突變3、同義突變4、移碼突變5、DNA的體外重組6、限制性核酸內(nèi)切酶7、C-值8、基因家族9、轉(zhuǎn)座子二、簡答題1.誘變劑的作用機(jī)制?2、突變類型及其遺傳效應(yīng)?3.典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包括哪些步驟?4.為什么在DNA中通常只發(fā)現(xiàn)A—T和C—G堿基配對(duì)?5.什么是增效與減效突變?6.噬菌體整合到宿主基因組后4-6個(gè)宿主DNA的核苷酸被復(fù)制,這是為什么?這與轉(zhuǎn)座子插入新位點(diǎn)有何相似之處?另外,兩個(gè)核苷酸從5’U3的5’和3’被切除,這意味著遺傳信息從反轉(zhuǎn)錄病毒中被丟失嗎?7.列出病毒和非病毒超家族反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子之間的4種差
2、異.8.描述兩種轉(zhuǎn)座子引起基因組重排的方式。9.IS元件整合到靶位點(diǎn)時(shí)會(huì)發(fā)生什么?10.一個(gè)復(fù)合轉(zhuǎn)座子和一個(gè)IS元件之間的關(guān)系是什么?。11.列出一個(gè)轉(zhuǎn)座子插入到一個(gè)新位點(diǎn)所要求的步驟.12.當(dāng)(1)DNA在兩個(gè)定向重復(fù)之間(2)DNA在兩個(gè)反向重復(fù)之間發(fā)生重組的效應(yīng)各是什么?13.在什么過程中會(huì)形成一個(gè)共整合體?它的結(jié)構(gòu)是什么?14.Tn10元件只有在自己的轉(zhuǎn)座酶基因具有活性時(shí)發(fā)生轉(zhuǎn)座(與利用基因組中Tn10元件表達(dá)的轉(zhuǎn)座酶的情況正好相反),這種偏愛的原因是什么?15.跳躍復(fù)制的結(jié)果是什么?16.重復(fù)序列并不是在選擇壓力下存在,因此能快速積累突變。這些特性表明重復(fù)序列相
3、互間應(yīng)存在很大的不同,但事實(shí)并不是這樣的。請(qǐng)舉例說明。17.線檢體DNA的突變率與細(xì)胞核DNA突變率有什么不同?為什么?18.簡述大腸桿菌的插入序列,并指出它們對(duì)自發(fā)突變的重要性。19.分析比較細(xì)菌轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)。三、分析題1.表面抗原的變異和哺乳動(dòng)物免疫多樣性都是DNA重排的結(jié)果。錐蟲通過DNA重排選擇表達(dá)所攜帶的一千多個(gè)不同的VSG基因中的一個(gè)。而哺乳動(dòng)物細(xì)胞則通過DNA重排產(chǎn)生成百上千個(gè)不同的抗體,包括與VSG蛋白反應(yīng)的抗體,盡管抗體在數(shù)量上的優(yōu)勢(shì),錐蟲仍然能夠成功地逃避宿主的免疫系統(tǒng),為什么?2.分析比較細(xì)菌轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)。答案:一、名詞解釋1、錯(cuò)義突變:
4、DNA分子中堿基對(duì)的取代,使得mRNA的某一密碼子發(fā)生變化,由它所編碼的氨基酸就變成另一種的氨基酸,使得多肽鏈中的氨基酸順序也相應(yīng)的發(fā)生改變的突變。2、無義突變:由于堿基對(duì)的取代,使原來可以翻譯某種氨基酸的密碼子變成了終止密碼子的突變。3、同義突變:堿基對(duì)的取代并不都是引起錯(cuò)義突變和翻譯終止,有時(shí)雖然有堿基被取代,但在蛋白質(zhì)水平上沒有引起變化,氨基酸沒有被取代,這是因?yàn)橥蛔兒蟮拿艽a子和原來的密碼子代表同一個(gè)氨基酸的突變。4、移碼突變:在編碼序列中,單個(gè)堿基、數(shù)個(gè)堿基的缺失或插入以及片段的缺失或插入等均可以使突變位點(diǎn)之后的三聯(lián)體密碼閱讀框發(fā)生改變,不能編碼原來的蛋白質(zhì)的突變
5、。5、DNA的體外重組:DNA的體外重組是指含有特異目的基因的DNA片段與載體DNA在試管內(nèi)連接的過程。常用的方法:1.粘性末端連接法;2.平末端連接法;3.結(jié)尾法;4.人工接頭法(linker)。6、限制性核酸內(nèi)切酶(restrictionendonuclease,內(nèi)切酶):是一類特異性地水解雙鏈(ds)的DNA的磷酸二酯酶。分Ι、II、Ш型。內(nèi)切酶的用途:1.制作DNA物理圖譜;2.DNA限制性片段長度多態(tài)性分析(RFLPS)。3.基因克隆及亞克??;4.DNA雜交與序列分析;5.基因組同源性研究;6.基因突變和化學(xué)修飾的研究。7、C-值:通常是指一種生物單倍體基因組D
6、NA的總量。8、基因家族:真核生物中許多相關(guān)的基因常按功能成套組合,被稱為基因家族。9、轉(zhuǎn)座子:是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。二、簡答題1.誘變劑的作用機(jī)制?答:1、堿基的類似物誘發(fā)突變2、改變DNA的化學(xué)結(jié)構(gòu)3、結(jié)合到DNA分子上誘發(fā)移碼突變4、紫外線及其他射線引起的DNA分子的變化2、突變類型及其遺傳效應(yīng)?答:1、突變類型:A.點(diǎn)突變NA大分子上一個(gè)堿基的變異。分為轉(zhuǎn)換和顛換。B.缺失:一個(gè)堿基或一段核苷酸鏈從DNA大分子上消失。C.插入:一個(gè)原來沒有的堿基或一段原來沒有的核苷酸鏈插入到DNA大分子中間。D.倒位NA鏈內(nèi)重組,使其中一段方向倒置。2
7、、突變的遺傳效應(yīng):A.遺傳密碼的改變:錯(cuò)義突變、無義突變、同義突變、移碼突變B.對(duì)mRNA剪接的影響:一是使原來的剪接位點(diǎn)消失;二是產(chǎn)生新的剪接位點(diǎn)。C.蛋白質(zhì)肽鏈中的片段缺失:3.典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包括哪些步驟?a、提取供體生物的目的基因(或稱外源基因),酶接連接到另一DNA分子上(克隆載體),形成一個(gè)新的重組DNA分子。b、將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存,這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。c、對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。d、對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng),檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。4.為什