實驗二十、植株生長量測定

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1、實驗二十、植株生長量的測定指示植物在藥劑處理過的土壤中或混藥的水溶液中培養(yǎng)一定時間后，測定植株的生長量，如禾本科植物可測量葉子長度，闊葉植物可測量葉面積；或將地上部分切下稱其鮮重。抑制光合作用的除草劑常用這類方法。1、去胚乳小麥幼苗法去胚乳小麥幼苗法也是上海植物生理研究所1964年建立的生測方法。這是一個測定抑制光合作用除草劑的專一方法，與測定這類除草劑的其它生測方法（如番茄法、燕麥法）相比，它具有操作簡便、測定周期短等優(yōu)點。選擇飽滿度一致的小麥，浸種2h后，排列在鋪有濕濾紙或紗布的搪瓷盤內，在20℃左右進行發(fā)芽。培養(yǎng)3-4天后苗高

2、2-3cm，精選高度一致的幼苗，輕輕取出以免損傷根部，然后摘除胚乳，在水中漂洗后作為指示生物。以直徑4.5cm，高5.0cm的小玻璃杯作為測定容器，每杯放入不同濃度的藥液3ml和稀釋10倍的培養(yǎng)液6ml，每杯插入上述去胚乳小麥幼苗10株。在溫度21～26℃左右，光照下培養(yǎng)6～7天，測定小麥苗的株高，以株高抑制率來表示除草劑活性。培養(yǎng)液配方如下：硫酸銨3.2g磷酸二氫銨2.25g硫酸鈣0.8g氯化鉀1.2g硫酸鎂1.2g微量元素0.01g其中微量元素組成為：硫酸亞鐵10g、硫酸銅3g、硫酸錳9g、硼酸7g硫酸鋅3g將上述配方加入1L水

3、中，使用時再稀釋10倍。2、番茄法取20×120mm的試管，編號。將供試藥劑用培養(yǎng)液稀釋成一系列梯度濃度溶液，每只試管加入10mm。嚴格挑選生長健壯，大小高度一致的具2片真葉的番茄幼苗，將主根及子葉剪掉，稱鮮重后插入試管，每管2～4株，在漫射光照射下，25℃左右培養(yǎng)2周，然后再取出稱重。培養(yǎng)期間應每天補加蒸發(fā)的水分。以生長抑制率來評價活性，求出EC50，比較活性。生長抑制率（％）=番茄法適合于脲類及均三氮苯類光合作用抑制劑的生物測定，方法靈敏，但培養(yǎng)周期較長，其間要每天補足水分，比較麻煩。3、燕麥法將土樣烘干。過lmm篩后。加入除草

4、劑，使土壤水分達到最大田間持水量的60％。取200g土裝人底部帶孔的玻璃皿中，播種已催芽露白的燕麥種子10－12粒，出苗后，定8株苗，每天從底部灌水，保持原來的重量，于光照下培育14d后，測定植株地上部鮮重與干重，或幼齡葉片數(shù)及第2、3葉片的重量，計算IC50。本法適于測定均三氮苯類除草劑如阿特拉津、西瑪津以及取代脲類除草劑的活性，淋溶及持效期等。前者靈敏度0.05-0.1ppm，后者為0.1-0.3ppm。此外，也可測定幼苗的含水量、水提取物的導電性及中性水溶性物質重量及其占干重的百分數(shù)。由于抑制光合作用除草劑引起植物蒸騰作用下降

5、（氣孔關閉引起的），而根系吸水不受影響，因此，在鮮重與干重明顯下降之前，植物體內含水量反倒明顯增加。因此，可用幼苗含水量作為生測指標一此類除草劑也使植株體內中性水溶性物質（碳水化合物）的含量在干鮮重下降前明顯下降，因而可以測定中性水溶性物質（糖）的含量為生測指標，比測定干鮮重更為靈敏。4、葉鞘滴注法Tarlor和Loader（1984）為了篩選有效的防治野燕麥的除草劑混劑，設計了一種快速，簡便的除草劑生測方法——葉鞘滴注法。當正常生長的燕麥長至1葉1心時，在第一葉張開的葉鞘里滴加10ul供試的一定濃度的除草劑。24-48h后，切下2

6、㎝長的一段，插入清水洋菜培養(yǎng)基。再經(jīng)24h（此時對照葉片伸長約11～13㎜）取出測量每一劑量處理的葉片延伸長度，并評判除草劑活性。5、蘿卜子葉法將蘿卜籽插入整濾紙的培養(yǎng)血中，加適量水，加蓋后在27℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)30h，從幼苗上切下子葉備用。在盛有用磷酸鹽緩沖液配制的不同濃度的除草劑（5－10ml）溶液中放入10片大小均勻的子葉，加蓋后在25－27℃溫室或生長箱中。光照強度為2000—3000LX的光照下連續(xù)培養(yǎng)3d后。稱鮮重并測定葉綠素含量，計算IC50。本法適于測定觸殺性及影響氮代謝的除草劑。6、再生苗側重法。將生長均勻一致的

7、10株香附子塊莖移植到盆缽中。二周后生長正常時，分別用不同濃度的草甘磷處理香附子葉，一周后剪除香附子莖葉（距上表1cm），再過一個月左右測定再生苗的鮮重，這樣可反映傳導性除草劑對地下部分再生能力的抑制程度。也可用玉米做試材，將玉米將播種在統(tǒng)一型號盆缽中，當幼苗3葉期時噴施草甘磷，24小時后剪去葉片，一周后測定再生苗的鮮重，比較不同處理間的再生力。7、莖葉浸漬法：該法適用于莖葉處理劑的篩選和測定。方法是取一個底部帶孔的啤酒杯，裝滿潮濕細土（肥沃土壤較好）后壓實，再用塑料薄膜包住整個杯上并用橡皮筋扎緊，以防止倒置浸藥時杯中土壤散落。其后

8、在薄膜上沿杯邊緣戳若干孔穴。每穴播入2-3粒供試植物種子并用土覆蓋好，然后從底部滲入水保持土壤濕潤。供試植物長至2-3葉期時進行間苗，每穴保苗1株苗。待植物長至需要大小時，進行浸藥處理。浸藥時間各處理之間力求一致。藥劑處理數(shù)天后可揭去