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1、補(bǔ)骨脂中有效成分提取工藝研究 摘要:本文對(duì)補(bǔ)骨脂中有效成分的提取工藝進(jìn)行了研究。采用超聲回流提取、浸漬提取和單因素實(shí)驗(yàn),得出超聲回流提取是提取其有效成分的最佳方法。該方法條件為:補(bǔ)骨脂的顆粒為100~120目,超聲波的頻率為40kHz,超聲提取時(shí)間為30min,乙醇濃度為70%,固液比為1:8(g:mL),溶劑溫度為40℃。在此最佳工藝條件下,補(bǔ)骨脂素的提取率可達(dá)3.1464%,提取率遠(yuǎn)高于普通溶劑提取率?! £P(guān)鍵詞:補(bǔ)骨脂;超聲提?。唤n提取 補(bǔ)骨脂(PsoraleacorylifoliaL.)又名破幫紙、蘭莧、胡韭
2、子或黑故子,為豆科植物補(bǔ)骨脂的干燥成熟果實(shí).補(bǔ)骨脂種子外形為腎形狀,表面為黑色、黑褐色或灰褐色,且有微網(wǎng)狀皺紋;有芳香氣味,并有辛味且略帶苦味[1].補(bǔ)骨脂有很好的藥用價(jià)值,具有溫腎助陽、納氣、止瀉功效,歷代中醫(yī)常用于治腎虛、滑精、小便頻數(shù)、陽痿、腰膝冷痛、虛寒喘嗽等,外治用于皮膚病、白癲風(fēng)、禿發(fā)等,其主要的生物活性成分為補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素[2]。近年來,針對(duì)補(bǔ)骨脂發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ),國(guó)內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了廣泛研究[3]。本實(shí)驗(yàn)采用超聲提取法和浸漬提取法對(duì)其有效成分提取工藝進(jìn)行研究,通過單因素實(shí)驗(yàn),比較了不同提取方法對(duì)香豆素類
3、化合物提取率的影響,以期為補(bǔ)骨脂中有效活性成分的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。 一、試驗(yàn)材料與方法6 (一)實(shí)驗(yàn)材料、儀器與試劑 材料:補(bǔ)骨脂購于湖北金貴中藥飲片有限公司?! 。ǘ?shí)驗(yàn)方法 1、超聲提取法 補(bǔ)骨脂藥材75g,用80%乙醇600mL分3次常溫下進(jìn)行超聲振蕩提取,每次30min,過濾,合并濾液,回收乙醇至無醇味,放置過夜,倒去上清液得棕黑色黏稠物,將棕黑色黏稠物加20倍量甲醇分3次回流每次15min,趁熱抽濾,合并濾液,濃縮至小體積,放置析晶,濾取結(jié)晶,80℃干燥,即得補(bǔ)骨脂素粗品,稱重并計(jì)算提取率?! ?/p>
4、單因素實(shí)驗(yàn):①乙醇濃度對(duì)總提取率的影響:準(zhǔn)確稱取25g補(bǔ)骨脂粉末5份,分別用50%、60%、70%、80%、90%的乙醇水溶液作溶劑,考察不同乙醇濃度對(duì)補(bǔ)骨脂有效成分提取率的影響。②超聲時(shí)間對(duì)總提取率的影響:在最佳乙醇濃度的基礎(chǔ)上,準(zhǔn)確稱取25g補(bǔ)骨脂粉末5份,超聲時(shí)間分別為20、30、40、50、60min,考察超聲時(shí)間對(duì)補(bǔ)骨脂有效成分提取率的影響。③溶劑提取溫度對(duì)總提取率的影響:在最佳乙醇濃度和時(shí)間的基礎(chǔ)上,準(zhǔn)確稱取25g補(bǔ)骨脂粉末5份,實(shí)驗(yàn)時(shí)溶劑的溫度分別為20、30、40、50、60℃,考察溶劑溫度對(duì)提取率的影響。
5、 2、浸漬提取法 稱取補(bǔ)骨脂75g,用80%乙醇600mL分3次浸泡,每次24h合并3次濾液,回收乙醇至無醇味,放置過夜,倒去上清液得棕色黏稠物,將棕色黏稠物加20倍量甲醇分3次回流每次15min,趁熱抽濾,合并濾液,濃縮至小體積,放置析晶,濾取結(jié)晶,80℃6干燥即得補(bǔ)骨脂素粗品,稱重,計(jì)算提取率?! 我蛩貙?shí)驗(yàn):①乙醇濃度對(duì)總提取率的影響:準(zhǔn)確稱取25g補(bǔ)骨脂粉末5份,分別用體積分?jǐn)?shù)為50%、60%、70%、80%、90%的乙醇水溶液作溶劑,考察乙醇濃度對(duì)補(bǔ)骨脂有效成分提取率的影響。②浸漬時(shí)間對(duì)總提取率的影響:在最佳
6、乙醇濃度的基礎(chǔ)上,準(zhǔn)確稱取25g補(bǔ)骨脂粉末5份,浸提時(shí)間分別為20、30、40、50、60min,考察浸提時(shí)間對(duì)補(bǔ)骨脂有效成分提取率的影響。③溶劑提取溫度對(duì)總提取率的影響:在最佳乙醇濃度和時(shí)間的基礎(chǔ)上,準(zhǔn)確稱取25g補(bǔ)骨脂粉末5份,實(shí)驗(yàn)時(shí)溶劑的溫度分別為20、30、40、50、60℃,考察溶劑溫度對(duì)提取率的影響。 二、結(jié)果與分析 ?。ㄒ唬┏曁崛》ā ?、單因素實(shí)驗(yàn) (1)乙醇濃度對(duì)補(bǔ)骨脂總提取率的影響 由圖1可知,乙醇濃度在50%~90%范圍內(nèi),隨著乙醇濃度的升高,提取率先增大后下降。當(dāng)乙醇濃度為70%時(shí),總提取率
7、達(dá)到最大,故選擇最佳乙醇濃度為70%作為溶劑?! D1乙醇濃度對(duì)補(bǔ)骨脂提取的影響 (2)超聲提取時(shí)間對(duì)補(bǔ)骨脂總提取率的影響 由圖2可知,在最佳乙醇濃度的基礎(chǔ)上,隨著時(shí)間的增加,補(bǔ)骨脂素的提取率先增大后下降。當(dāng)時(shí)間為30min時(shí),總提取率最大,故選擇最佳超聲提取時(shí)間為30min?! D2超聲時(shí)間對(duì)補(bǔ)骨脂提取的影響6 (3)超聲溫度對(duì)補(bǔ)骨脂總提取率的影響 由圖3可知,在最佳乙醇濃度和超聲提取時(shí)間的基礎(chǔ)上,提取率隨著溫度的增加,提取率先增加后減少。當(dāng)溫度為40℃時(shí),總提取率達(dá)到最大,故選擇最佳提取溫度為40℃?! D3超
8、聲溫度對(duì)提取率的影響 ?。ǘ┙n提取法 1、單因素實(shí)驗(yàn) ?。?)乙醇濃度對(duì)補(bǔ)骨脂總提取率的影響 由圖4可知,隨著乙醇濃度的增加,提取率先增加后減少,當(dāng)乙醇濃度為60%時(shí),總提取率達(dá)到最大,故選擇最佳乙醇濃度為60%?! D4乙醇濃度對(duì)提取率的影響 (2)浸漬提取時(shí)間對(duì)補(bǔ)骨脂總提取率的影響 由圖