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《甜菊苷微生物酶法轉(zhuǎn)化及大孔樹脂吸附分離的研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、南京師范大學(xué)碩士學(xué)位論文甜菊苷的微生物酶法轉(zhuǎn)化及大孔樹脂吸附分離研究姓名：胡靜申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳育如20080101南京師范大學(xué)碩士論文甜菊苷的微生物酶法轉(zhuǎn)化及大孔樹脂吸附分離摘要甜菊糖中主要含甜菊苷(SS)萊鮑迪苷A(RA)兩種成分。其中含量較低的萊鮑迪苷A(＆吣是甜菊糖中呈味品質(zhì)最好的組分；甜菊苷(SS)含量較高，但因其味質(zhì)中的后苦味影響了甜菊糖作為天然甜味劑的廣泛應(yīng)用。由于SS與RA在化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理性質(zhì)上非常接近，使RA與SS的分離非常困難。環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(CGTaSe)具有將SS轉(zhuǎn)化為RA改良甜菊糖味
2、質(zhì)的功效，本工作在選育了高產(chǎn)環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的芽孢桿菌基礎(chǔ)上，對產(chǎn)酶活力較高的Sx芽孢桿菌進(jìn)行了菌種鑒定，結(jié)合菌體與菌落形態(tài)特征以及16SrRNA序列分析，鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillussubal捃)。在用Sx菌產(chǎn)環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶的發(fā)酵中，使用玉米淀粉1．O％，豆粕粉2％，M＆S04·7H200．02％，K2HP040．1％培養(yǎng)基，于30℃，pH6．5，裝液量50mL，220rpm，60h的條件下，CGT嬲e酶活性可達(dá)5596I，／mI，。對所產(chǎn)生的CGTase酶性質(zhì)研究表明：該酶的最適溫度為40℃，最適pH值為6．5，對溫度
3、及pH的適應(yīng)范圍均較寬，分別為30℃-50℃及pH5．5—9．0．’用CGT鵲e酶對SS的轉(zhuǎn)化研究表明，含SS>50％的甜菊總苷溶液在50℃恒溫條件下轉(zhuǎn)化48h后，甜菊苷溶液中的RA／SS比值從轉(zhuǎn)化前的0．45上升為0．53．，本工作利用大孔樹脂對RA和SS的吸附選擇性，以分離甜菊糖的這兩種主要成分。在研究大孔吸附樹脂對甜菊糖各組分的吸附選擇性等性能的基礎(chǔ)上，篩選了對RA和SS吸附選擇性差異大，分離效果好的D．107及D．108樹脂，得到了富含RA的組分。對D．107及D．108樹脂進(jìn)行吸附及洗脫性能的研究表明：D．108樹脂靜態(tài)分離富集R
4、A的能力強(qiáng)，洗脫效果最好的溶劑是50％甲醇。對大孔樹脂D．108進(jìn)行的動態(tài)吸附及洗脫性能的研究結(jié)果表明：在長徑比10：1，流速2BV&，上樣液濃度8m臥【lL的條件下，所富集RA的含量比原液提高20．39％．”’關(guān)鍵詞：甜菊苷，萊鮑迪苷A，枯草芽孢桿菌，大孔樹脂，分離南京師范大學(xué)碩士論文甜菊苷的微生物酶法轉(zhuǎn)化及大孔樹脂吸附分離AbstractSteviathatcontainsmainlytWOcomponents，stevioside(SS)andrebaudioside(RA)isrestrictedinextensiveapplica
5、tionasnaturaledulcoratorbecauseofthebittertasteofSS．Beacauseofthehilshsimilarityofchemicalstructureandcharacter,RAandSSareverydifficulttobeseparated．Cyclodextringlycosyltransferase(CGTase)couldimprovethetasteofsteviside．StainSxWaschoose、加mthehigestabilityofproducingCGTasea
6、ndwasidentifiedasBacillussubtilisonthebasisofphysicalcharacterizationand16SrRNAsequenceanalysisandneighbour-joiningtree．Withthefermentationconditions1％maizestarch,2％def．a(chǎn)tbeanpowder,0．02％M92S04·7H20，O．1％K2HP04，30℃，50ml，60h220rpm，theCGTaseenzymeactivityofstrainSxcouldreacht
7、o5596咖．TheenzymologiccharacterofCGTaseproducedbySxWasstudied．Theenzymeattaineditsmaximumactivityinthepn6．5at40"C．ThesuitablerangeofpHwas5．5—9．0，andtemperatureWas30"(2—50。C．AftertheSS>50％steviosidetransformed48hat50℃，theratioofRA／SSchangedfrom0．45to0．53．MacroporousresinsD一1
8、07andD一108wereselectedwithhighadsorptioncapacityandadsorptiveselectivitypropertiesofRAthr
