不同年齡階段大鼠正中隆起nestin和sox2陽性細(xì)胞的觀察-(7429)

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1、萬方數(shù)據(jù)研究論文不同年齡階段大鼠正中隆起Nestin和Sox2陽性細(xì)胞的觀察前言神經(jīng)干細(xì)胞(neuralstemcell，NSC)，是指來源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多能干細(xì)胞，終身具有自我更新能力，并能分化成神經(jīng)系統(tǒng)的各類細(xì)胞；在特定條件誘因下，能夠向特定類型神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分化的特殊的未分化或低分化細(xì)胞的總稱。其主要功能是作為一種細(xì)胞儲(chǔ)備，參與神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)或細(xì)胞正常死亡的更新。神經(jīng)干細(xì)胞在腦室管膜下區(qū)及海馬終生存在，并隨著年齡其增殖、分化和遷移呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢(shì)。正中隆起(medianeminence，ME)是室周器官之一，位于第三腦室底部，介于視交

2、叉和垂體柄之問，向腹側(cè)膨隆。通過鼠腦冠狀切片觀察，ME組織結(jié)構(gòu)分為3層，由背側(cè)向腹側(cè)依次為室管膜帶、內(nèi)帶和外帶【t]。其位置特殊，功能復(fù)雜，包括參與腦脊液和血液間物質(zhì)交換、分泌激素等，在神經(jīng)內(nèi)分泌、神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)方面及血壓調(diào)節(jié)所起的作用日益受到人們的關(guān)注。SD大鼠是1925年SpragueDawley用Wistar大鼠培育而成。其性情較Wistar大鼠兇猛，比Wistar大鼠的適應(yīng)性和抗病能力更強(qiáng)，已作為重要的實(shí)驗(yàn)大鼠品種，』一泛應(yīng)用于藥理、毒理、藥效及GLP實(shí)驗(yàn)。Nestin：神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白(Neuroepithelialstemprotein)，又

3、稱巢蛋白，屬于第Ⅵ類神經(jīng)元中間絲蛋白，分布在細(xì)胞質(zhì)。在哺乳動(dòng)物體內(nèi)Nestin參與構(gòu)成細(xì)胞骨架，起始于神經(jīng)板的形成，隨著神經(jīng)細(xì)胞的遷移、分化，Nestin的表達(dá)量逐漸下降，當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞分化完成后其表達(dá)轉(zhuǎn)為陰性。神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)免疫化學(xué)染色的Nestin陽性細(xì)胞可以分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元，提示Nestin可以作為干細(xì)胞的標(biāo)記物[2】。目前作為神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)記物被廣泛應(yīng)用于神經(jīng)干細(xì)胞的檢測(cè)鑒定。Sox2：胚胎干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子(ThesexdeterminingregionofYchromosome—relatedhighmobilityg

4、roupbox2)，作為Sox家族成員之一，它是一種含有Sry．relatedboxgenes(SRYbox)功能域(motif)的轉(zhuǎn)錄因子，在維持干細(xì)胞特性和多向分化潛能中起到關(guān)鍵性作用，能促進(jìn)細(xì)胞的增殖和抑制細(xì)胞的分化，在細(xì)胞代謝活躍而分化能力較低的組織中萬方數(shù)據(jù)研究論文表達(dá)陽性【3，4]。Sox2分布在細(xì)胞核，從胚胎期到成年后在中樞神經(jīng)系統(tǒng)持續(xù)表達(dá)，抑制神經(jīng)干細(xì)胞的分化【51。成年大鼠體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Sox2標(biāo)記陽性的細(xì)胞，經(jīng)過處理后可以增殖分化為神經(jīng)球或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，提示Sox2可以作為干細(xì)胞的標(biāo)記物【6]。本實(shí)驗(yàn)以正常青年、成年雄性SD大鼠ME

5、作為觀察對(duì)象，使用Nestin和Sox2免疫組化法染色，觀察比較青年組和成年組大鼠ME處Nestin和Sox2Bfl性細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布的變化，探討ME處是否存在NSCs，并比較二者的差別，為研究正中隆起處神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化以及功能意義提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。1材料1．1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雄性健康SD大鼠，驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1．2試劑蔗糖(分析純)中性樹膠材料與方法8周齡12只，24周齡12只，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)多聚甲醛(分析純)二甲苯(分析純)磷酸二氫鈉(分析純)甲酰胺(分析純)水合氯醛檸檬酸鈉(分析純)醫(yī)用石蠟油(分析純)100％乙醇(分析純)硼酸(分析純)磷酸氫二

6、鈉(分析純)蘇木色精氯化鈉注射液上海試劑一廠上海標(biāo)本模型廠天津市化學(xué)試劑研究所天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心天津市永大化學(xué)試劑有限公司天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所天津市紅巖化學(xué)試劑廠天津市泰興試劑廠天津市福宇精細(xì)化工有限公司天津博迪化工股份有限公司中國醫(yī)藥公司石家莊四藥有限公司萬方數(shù)據(jù)研究論文鹽酸(分析純)石家莊市華迪化工工貿(mào)有限公司95％乙醇石家莊新宇三陽實(shí)業(yè)有限公司100％乙醇(分析純)天津市福宇精細(xì)化工有限公司TritonX．100一北京solarbio公司3％過氧化氫北京中杉金橋公司DAB顯色試劑盒北京中杉金橋公司山羊超敏二步法免疫組化檢測(cè)試劑北京中杉金

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