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《nestin陽性細(xì)胞和brdu陽性細(xì)胞在多病程eae大鼠腦內(nèi)分布情況及形態(tài)學(xué)觀察》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、英文縮寫英文縮寫(Abbreviation)英文縮寫英文全稱中文全稱Experimentalallergicenc-實驗性變態(tài)反應(yīng)性EAEephalomyelitis腦脊髓炎MSMultiplesclerosis多發(fā)性硬化PAParaformaldehyde多聚甲醛PBSPhosphatebufferedsaline磷酸緩沖生理鹽水HEHematoxylin.Eosin蘇木精.伊紅神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋NestinNeuroepithelialnstemprotein白(巢蛋白)BrdUbromodeoxyuridine溴脫氧尿苷SVZsubventri
2、cularzoon室下區(qū)MEMedianeminence正中隆起OrganumvasculosumlaminaOVIT終板血管器terminalisSFOSubfomicalorgan穹窿下器DGDentategyrus齒狀回IHimmunohistochemistry免疫組織化學(xué)二氨基聯(lián)苯二胺鹽DAB3’3diaminobenzidine酸鹽鏈霉素抗生物素過S—Pstreptavidin—peroxidase氧化物酶3.氨丙基三乙基氧APES3-Aminopropyltriethoxysilane基硅烷8河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬
3、承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下,由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果,其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué),試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則,承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。八∥研究生簽名:不寺矽導(dǎo)幣簽名卜蕁雩籌:秘彬璐諺幸多叩年I手弓月/p日’/河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研
4、究成果,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨立撰寫,文責(zé)自負(fù)?!砟藚s靳虢烏李甲。9滬年弓月f∥日中文摘要Nestin陽性細(xì)胞和BrdU陽性細(xì)胞在多病程EAE大鼠腦內(nèi)分布情況及形態(tài)學(xué)觀察摘要目的:實驗性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(EAE)是研究多發(fā)性硬化(MS)的發(fā)病機(jī)制及治療的理想動物模型。本實驗以多病程EAE模型為研究基礎(chǔ),檢測神經(jīng)系統(tǒng)損傷后腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)記物nestin和顯示摻入細(xì)胞有絲分裂期的標(biāo)記物:BrdU的表達(dá)和分布,從而觀察不同病程中腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞對損傷的反應(yīng)情況,來探討神經(jīng)干細(xì)胞在腦損傷后修復(fù)過程中的作用和意義。方法:以豚鼠脊髓勻漿加
5、完全福氏佐劑作為抗原,給予Wistar大鼠四足墊加背部皮下注射,建立EAE模型。從臨床表現(xiàn)觀察發(fā)病情況、HE染色和髓鞘特殊染色在光鏡下觀察損傷區(qū)與髓鞘分布區(qū)域的關(guān)系、應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察nestin和BrdU的表達(dá)、利用photoshop9.0圖形軟件分別對nestin和BrdU免疫組化照片偽彩色處理后進(jìn)行圖象合成,觀察相鄰切片的nestin和BrdU陽性細(xì)胞的相互關(guān)系。對免疫組化結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,觀察各病程組與對照組間以及各個病程組相互間的關(guān)系。結(jié)果:成功獲得多病程EAE大鼠模型。在實驗中觀察到模型大鼠在發(fā)病次數(shù),臨床表現(xiàn)和恢復(fù)情況有很大的
6、區(qū)別。共分出了五個病程組分別是急性型組、持續(xù)進(jìn)展型組、緩解一復(fù)發(fā)型組、良性型組、隱匿型組,兩個對照組分別是正常對照組和發(fā)病期組。造模穩(wěn)定成功率高。中文摘要HE染色和髓鞘染色發(fā)現(xiàn):①發(fā)病期、緩解一復(fù)發(fā)型、良性型和隱匿型的室下區(qū)細(xì)胞總數(shù)明顯多于正常對照組,有統(tǒng)計學(xué)意義(PO.05),可見室下區(qū)細(xì)胞總數(shù)增多與疾病的恢復(fù)和預(yù)后有著重要的聯(lián)系;②病灶區(qū)可見大量的“血管袖套”樣結(jié)構(gòu),這是EAE典型的病理改變,在病變周圍可見髓鞘腫脹、崩解、消失。髓鞘的修復(fù)
7、在不同病程組間有著明顯的差異,預(yù)后好的大鼠髓鞘多可完全恢復(fù),預(yù)后差的大鼠可見髓鞘破壞嚴(yán)重修復(fù)不完全。③病灶區(qū)被嚴(yán)格限制在了由兩側(cè)的側(cè)腦室、胼胝體和視交叉共同圍成的近圓形區(qū)域內(nèi)。免疫組化觀察發(fā)現(xiàn):@nestin的表達(dá):nestin主要表達(dá)在室下區(qū)、病灶區(qū)(包括胼胝體、前連合、視交叉)、室周器官(OVLT、SFO、ME)。在不同位置nestin陽性細(xì)胞的形態(tài)也不一致。在室下區(qū)主要是呈圓形、橢圓形或三角形,胞核大胞漿少的幼稚細(xì)胞。病灶區(qū)多是分枝狀細(xì)胞,大小不等,突起長短不一,突起與血管壁聯(lián)系緊密。而室周器官部位為有單個長突起的伸長細(xì)胞,其中OVLT和ME
8、還可見點狀的陽性結(jié)構(gòu)。隨著病情的好轉(zhuǎn),nestin陽性細(xì)胞的數(shù)量和顯色程度都逐漸下降直至消失。本實驗在海馬齒狀回沒有發(fā)現(xiàn)n