大鼠連合下器nestin、sox2及brdu陽性細胞的形態(tài)學觀察

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2、特別加以標注和致謝等內容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生簽名翩獯聊年月日目錄lY0吣2哪3咖9咖7舢吣7咖8刪2Im中文摘要???????????????????????????l英文摘要???????????????????????????4英文縮寫??????????????????????????10研究論文大鼠連合下器Nestin、Sox2及BrdU陽性細胞的形態(tài)學觀察前言????????????????????

3、??????1—1一日U舌??????????????????????????材料與方法???????????????????????11結果??????????????????????????20附圖??????????????????????????24附表??????????????????????????35討論??????????????????????????36結論??????????????????????????37參考文獻????????????????????????37綜

4、述神經(jīng)干細胞研究進展??????????????????41致謝????????????????????????????49個人簡歷??????????????????????????50中文摘要大鼠連合下器Nestin、Sox2及BrdU陽性細胞的形態(tài)學觀察摘要目的：觀察連合下器Nestin、Sox2及BrdU陽性細胞形態(tài)特征及意義。方法：選擇SD大鼠32只，清潔級，雌雄不限，6．8周齡，體重2009+209，將實驗動物隨機分為兩組：①對照組(n=17)：不作任何處理；②用藥組(n=15)：連

5、續(xù)三天腹腔注射BrdU，每天兩次，分別于16：00和18：00各一次，時間間隔為2小時。l標本取材(1)正常動物模型標本取材：將SD大鼠17只，在水合氯醛(0．3ml／1009)麻醉下，經(jīng)由升主動脈灌注4％多聚甲醛磷酸鹽緩沖液(0．1mol／L，PH7．2)進行固定，立刻取腦，后固定。將組織標本隨機分為兩組，選取含連合下器部分，一組進行脫水，透明，包埋，石蠟切片機冠狀面切片，厚度為5prn。另一組進行15％蔗糖溶液脫水，30％蔗糖溶液脫水，恒溫冰凍切片機冠狀面切片，厚度為109rn。(2)Brd

6、U標記動物模型標本取材：SD大鼠15只，按照50mg／Kg對實驗動物進行連續(xù)三天Brdu生理鹽水溶液腹腔注射，每天兩次，間隔時間為2小時。第四日上午水合氯醛(0．3ml／1009)麻醉后，經(jīng)由升主動脈灌注4％多聚甲醛磷酸鹽緩沖液(0．1mol／L，PH7．2)固定，立刻取腦，后固定。將組織標本隨機分為兩組，選取含連合下器部分，一組進行脫水，透明，包埋，石蠟切片機冠狀面切片，厚度為59m。另一組進行15％蔗糖溶液脫水，30％蔗糖溶液脫水，恒溫冰凍切片機冠狀面切片，厚度為109rn。2染色(1)甲苯

7、胺藍染色：將上述標本取材中獲得的石蠟切片經(jīng)甲苯胺藍染色，中性樹膠封片后OlympusBX．UCB觀察照相。(2)免疫組織化學染色：將上述標本取材中獲得的石蠟切片分別經(jīng)Nestin免疫組織化學染色、Sox2免疫組織化學染色和BrdU免疫組織化學染色后，使用中性樹膠封片之后OlympusBX．UCB觀察照相。(3)免疫熒光組織化學雙標染色：將上述標本取材中獲得的冰凍切中文摘要片分別經(jīng)Nestin+Sox2免疫熒光組織化學雙標染色、BrdU+Sox2免疫熒光組織化學雙標染色后，使用抗熒光衰減封片劑封固

8、后，OlympusBX．UCB觀察照相。3統(tǒng)計學處理實驗結果中所示陽性細胞采用專業(yè)圖像分析軟件Image．ProPlus6．0測定平均光密度值和大小。經(jīng)SNK—q檢驗，以P