egcg調控tgf-β1誘導頭勁鱗癌細胞上皮-間質轉化實驗的研究

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時間:2019-02-15

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1、碩士學位論文中文摘要EGCG調控TGF.pl誘導的頭頸鱗癌細胞上皮.間質轉化的實驗研究摘要目的:頭頸鱗癌是世界第六大常見惡性腫瘤,其患者的五年生存率近年來沒有得到明顯改善,主要在于腫瘤的早期轉移,而TGF—p通路介導的上皮一間質轉化(Epithelialmesenchymaltransition,EMT)在其間發(fā)揮了重要作用。表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocaechin.3一gallate,EGCG)是綠茶中茶多酚類的主要成分,其抗腫瘤作用涵蓋腫瘤的生長、發(fā)展、侵襲、遷移等多個方面。研究表明,EGCG一方面能逆轉腫瘤細胞EMT的發(fā)生,另一方面能通過Smad7調

2、控TGF.13通路。目前,關于EGCG對頭頸鱗癌EMT影響的報道甚少。因此,本研究擬在頭頸鱗癌體外實驗中闡明EGCG能逆轉TGF.p1刺激誘導的EMT,并初步探討該過程中Smad7的變化。方法:(1)以5ng/mlTGF-pl刺激Tu686細胞,構建EMT模型:(2)在此模型中,用不同濃度(0、10、20、309M)的EG-CG刺激細胞24小時后,用RT-PCR和Western.Blot檢測上皮細胞標志物E.cadherin和間質細胞標志物Vimentin的表達,同時檢測TGF.D通路中Smad7的表達;(3)用濃度為209M的EGCG刺激細胞后,于不同的時間點(6、12

3、、24小時)收集細胞,檢測E—cadherin及Vlmentin的表達;(4)用5ng/ml的TGF-131刺激Tu686細胞24小時后,再加入濃度為209M的EGCG處理24小時,觀察這一過程中細胞形態(tài)及細胞間連接的變化。碩士學位論文中文摘要結果:(1)TGF一131刺激Tu686細胞后,EMT標志物E—cadherin的表達下調,而Vimentin的表達則增強,并且細胞形態(tài)發(fā)生相應改變,TGF-p1介導的Tu686細胞EMT模型構建成功;(2)在EMT模型中,EGCG能有效的抑制EMT的發(fā)生,且E.cadherin的表達上調及Vimentin的表達下降;(3)EGCG

4、能上調EMT模型中Smad7的mRNA及蛋白的水平。結論:(1)EGCG能抑制TGF一131介導的頭頸鱗癌細胞株Tu686EMT的發(fā)生;(2)該抑制作用可能與TGF—p通路中抑制性因子Smad7的上調有關。關鍵詞頭頸鱗癌、轉化生長因子一pl、上皮.間質轉化、EGCG、Smad7ⅡEGCGregulatesTGF-pl—InducedEpithelialtoMesenchymalTransitioninSquamousCellCarcinomaoftheHeadandNeckABSTRACTObjective:Squamouscellcarcinomaofheadandne

5、ck(SCCHN)isthesixthmostcommoncancerintheworld,anditsfive.yearsurvivalrateforpatientsarenotimproving,mainlyduetotheearlyoccurrenceofcancermetastasis.Epithelial—mesenchymaltransition(EMT)isconsideredtobecloselyralatedtometastasisofSCCHN,andTGF.ppathwayplaysanimportantroleinthisprocess.EGCGa

6、majorcomponentofpolyphenolsingreentea,itsantitumoractivityinvolvesmanyaspects,includingtheinhibitionoftumorgrowth,progression,migration,invasion,andmetas.tasis,etc.Resultsshowthat,EGCGcallreversetheoccurrenceofEMTintumorcells,andregulateTGF一13mediatedpathwaythroughcontrollingwithSmad7.Cur

7、rently,therearefewreportsabouttheimpactiononhowregulatesEMTinSCCHN.Therefore,ourstudywillillustratethatCaninhibittheoccurrenceofEMTinSCCHN,andexplorethechangesofSmad7inthisprocess.Methods:(1)InordertodevelopEMTmodel,Tu686cellsweretreatedwith5ng/mlTGF-131;(2)Followin

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