一株單核玉米絲核菌的鑒定及致病力分析

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1、萬方數(shù)據(jù)Identificationandpathogenic1●●●^●一analysisolunmucleateRhizoctoniasp·ThesissubmittedtoQ薌ngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMaste．rofAgronomyLiuYing(DepartmentofAgronomy)Supenrisor：’iBaqclusor：LBaodnrVllZhouShanyueQingdao．ChinaJune，201

2、2萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：鈉裊時(shí)間：№I2年舌月彳日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解青島農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保

3、存、匯編學(xué)位論文。同意青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。時(shí)間：如Iz年舌月習(xí)日時(shí)間：勱12年6月砷日艷7，=：7嚴(yán)／D泗夕K●●名套塾生幣究孔修導(dǎo)萬方數(shù)據(jù)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文摘要近年來玉米紋枯痛為害迅速上升，已經(jīng)成為制約玉米持續(xù)增產(chǎn)的主要病害因素之一，因此對玉米紋枯病的研究倍受重視。截至目前對該病病原茵只有多核和雙核絲核菌的研究報(bào)道，尚未有單核絲核茵的研究報(bào)道。本研究中分離到了一株單核絲核菌菌株，對其進(jìn)行了形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)鑒定、生物學(xué)特·陛、致病力測定和其致病力的影響因素的研究。從山東濟(jì)寧地區(qū)采集

4、的玉米紋枯病標(biāo)本中分離得到一株類似絲核茵菌株，觀察其茵落形態(tài)和茵絲特征，符合絲核茵的典型特征。細(xì)胞核熒光染色結(jié)果表明該菌株每個(gè)細(xì)胞內(nèi)只有一個(gè)細(xì)胞核。PCR擴(kuò)增該菌株的rDNA-ITS、測序，并對序列進(jìn)行BLAST分析，發(fā)現(xiàn)與單核絲核茵與雙核絲核茵YR270(Ceratobasidiumsp．AG．B幻的序列一致性達(dá)到了99％?；贙imura2．Parameter距離模式計(jì)算遺傳距離，兩者的遺傳距離為0．002；采用最大簡約法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，發(fā)現(xiàn)兩者屬于同一分支，自展值支持率達(dá)到100％。結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)兩方面鑒定該菌株為單核絲核茵

5、。對單核絲核菌進(jìn)行生物學(xué)特性分析，明確了該菌株最適生長條件：生長最適溫度為28℃，最適pH值為7．O，最適碳、氮源為淀粉和酪氨酸。以不同抗性玉米品種為寄主進(jìn)行苗期接種測定病原茵的致病性，發(fā)現(xiàn)該菌株在抗病、中感品種上引起接種部位褪綠；高感品種接種部位形成典型病斑，說明該單核菌株具有弱致病力。采用高感品種川單418為寄主，對單核、雙核和多核絲核茵進(jìn)行致病力測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同菌株間致病力存在顯著差異。對致病力具有顯著差異的單核、雙核和多核絲核茵進(jìn)行生長速率測定并與致病力進(jìn)行相關(guān)性分析，其相關(guān)系數(shù)為0．5865，二者中等強(qiáng)度正相關(guān)。對上述供試茵株

6、進(jìn)行胞壁降解酶和毒素活性測定并分析其與致病力的相關(guān)性。結(jié)果顯示聚甲基多聚半乳糖醛酸酶(PMG)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)和纖維素酶(Cx)三種胞壁降解酶活性與致病力的相關(guān)系數(shù)分別為0．8210、0．7314和o．8497；種子萌發(fā)抑制率、胚根抑制率和粗毒素接種形成的病斑長度與致病力的相關(guān)系數(shù)分別為0．9257、0．9690和0．8426，說明胞壁降解酶和毒素均與致病力顯著正相關(guān)，表明胞壁降解酶和毒素在致病過程中起重要作用。由此推斷單核絲核茵致病力弱可能是胞壁降解酶、毒素等因素綜合作用的結(jié)果，單核紋枯茵菌株生長速率慢、胞壁降解酶和毒素的活性

7、低是導(dǎo)致其致病力弱的主要因素。關(guān)鍵字：單核絲核茵，鑒定，致病力，胞壁降解酶，毒素萬方數(shù)據(jù)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文AbstractInrecentyears，theharmofmaizesheathblightrisedrapidly．Maizesheathblighthasbeenoneofthemainfactorsforrestrictingmaizeyield．Sostudiespaidmoreattentiontomaizesheathblight．Uptonow,mostresearchsconcentratedonmultinuc

8、leateRhizoctoniaandbinucleateRhizoctonia，andtherewasnostudyaboutuninucleateRhizoctonia．Thisstudy