氨海水和5-羥色胺對(duì)海灣扇貝(argopecten irradians lamarck)解剖卵的體外促熟研究

氨海水和5-羥色胺對(duì)海灣扇貝(argopecten irradians lamarck)解剖卵的體外促熟研究

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1、中國(guó)海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文氨海水和5--羥色胺對(duì)海灣扇貝(ArgopectenirradiansLamarck)解剖卵的體外促熟研究姓名:劉曉赫申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師:王昭萍201206氨海水和5一羥色胺對(duì)海灣扇貝∞留opec招,1f刑d砌,1sLamarc;()解剖卵的體外促熟研究摘要本文以海灣扇貝(爿譜o!pec芒舢jm講a力s£a凇rc∞為研究對(duì)象,使用氨海水和5.羥色胺對(duì)其解剖卵進(jìn)行體外處理,使卵母細(xì)胞成熟受精和發(fā)育。研究中探索了氨海水與5.羥色胺的最佳促熟條件,對(duì)體外促熟的受精卵進(jìn)行了培育和觀察,并通過熒光顯微技術(shù)觀察

2、了受精卵發(fā)育的整個(gè)過程的,希望可以為貝類的遺傳育種,多倍體誘導(dǎo)等研究提供技術(shù)支持。以成熟的海灣扇貝解剖卵為原材料,在不同濃度的氨海水和5.羥色胺溶液浸泡情況下,采取二者單獨(dú)或聯(lián)合處理扇貝解剖卵不同時(shí)間,研究其體外促熟作用。統(tǒng)計(jì)了卵母細(xì)胞生發(fā)泡破裂率及其體外受精率,以獲得最優(yōu)的體外促熟方法。結(jié)果表明:O.005%一0.30%的氨海水均能誘導(dǎo)卵母細(xì)胞生發(fā)泡破裂(85%左右),經(jīng)氨海水處理的卵母細(xì)胞可以完成受精,但受精率較低,0.005%濃度的氨海水處理45min的受精率最高,僅為(17.28士O.43)%;經(jīng)5.羥色胺(5.HT)處理的卵母細(xì)胞生發(fā)

3、泡破裂率相對(duì)較低,但受精率得到顯著提高,5.HT濃度為8×10jM、處理30—60min時(shí),受精率達(dá)到(26.73士0.95)%;聯(lián)合處理時(shí)先用氨海水處理卵母細(xì)胞,然后用5.羥色胺處理成熟卵可以獲得最佳效果,受精率達(dá)(36.47土0.87)%。對(duì)促熟卵的細(xì)胞學(xué)研究表明:體外促熟處理的受精卵受精率(37.3±1.46)%低于自然排放受精卵的受精率(87.2土1.12)%;同時(shí)促熟卵受精后的發(fā)育速度明顯滯后于自然排卵受精的發(fā)育速度。對(duì)促熟卵的熒光顯微鏡研究表明:自然排放的卵母細(xì)胞和解剖獲得卵母細(xì)胞處于第一次減數(shù)分裂的不同時(shí)期,通過促熟,可以促進(jìn)解剖

4、獲得卵母細(xì)胞的成熟。,熒光染色觀察揭示促熟受精卵的整個(gè)發(fā)育過程與自然排放受精卵相同,并記錄了海灣扇貝促熟卵受精后的整個(gè)發(fā)育過程,同時(shí)證明了這種促熟方式的可行性。關(guān)鍵詞:海灣扇貝;氨海水;5.羥色胺;熒光顯微鏡ImprOVingMaturationofOocyteStrippedfromSaUop,A,可Dpec拋nfr,??谏娇谀_i上,口m口九★byAmmoniaSeawaterandSerotoninCreatinineSulfateComplex(5一HT)AbstractEfrectsofinductionwerestudiedtoide

5、nti匆thefhctionof砌moniaseawaterand5一HTinimproVingmaturaIionofoocytestripped矗.omscallop,么曙印ec胞,zfrmd如凇三口聊口圯也Tllesuitableinductionp聰lIneterswerestlldied.Theegginducedwerefcnilizedandcul矗Vated.Theallf.enilizationproccSswerestlldiedtliroughnuorescencemicroscopy.Oocyteswercstrippe

6、dandtreatedby鋤moniaseawaterand5一HTinvi仃o,andtllenf.crtilized枷矗cially.Resultsshowedthat鋤moniaseawatercaninduceGenninalvesicleBreal【down(GVBD)ofscallopoocytesr鋤破ably,butthefenilizingratewaslow.5一HTc鋤otinduceGVBDofoocytes,butcaIlinducethematurationoftheoocytesalreadyGVBD.Ooc礦es

7、firstinducedby鋤moniaseawatertlleninducedby5一HTshowedthebeste虢cts,andthefenilizingratewaS(36.47士0.87)%.ThercsearchcaIlpr0VidesupportforthegeneticbreedingaIldpolyploidybreedillgofshellfish.CytologicalstudiesontIleinducedeggshowedmatmef.enilizingrateofinducedegg(37.3±1.46)%waSm

8、uch10werthanmatofnomalegg.Thedevelopingspeedoff.盯Cilizedinducedeggwasalso10

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