微生物油脂發(fā)酵工藝的研究

微生物油脂發(fā)酵工藝的研究

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1、南京工業(yè)大學碩士學位論文微生物油脂發(fā)酵工藝的研究姓名:劉全振申請學位級別:碩士專業(yè):微生物學指導教師:熊曉輝200806摘要本文利用高產油脂的菌株3.3410和M80搖瓶發(fā)酵生產微生物油脂,以提高油脂產量為目的,研究了發(fā)酵培養(yǎng)基組成和發(fā)酵條件對兩菌株產油的影響,對搖瓶發(fā)酵得到的微生物油脂成分進行了檢測,同時對微生物油脂發(fā)酵生產生物柴油的綜合利用進行了分析。論文的主要工作及結論有:1.通過產油發(fā)酵能力的初篩,在六種產油微生物菌株中,以3.3410和M80的油脂產量為最高。2.發(fā)酵條件的優(yōu)化(1)本論文采用單因素的實驗方法確定發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源、氮源分別

2、為葡萄糖和由酵母膏、蛋白胨、硫酸銨組成的復合氮源。(2)3.3410和M80的發(fā)酵條件一致,最佳發(fā)酵條件組合為裝液量100mU500mL、搖床轉速180r/mill、初始pH5.8.6.O、培養(yǎng)溫度28℃,培養(yǎng)時間96小時。(3)對兩菌株產油發(fā)酵有顯著影響的因素有碳源濃度、氮源濃度和NaAc濃度,采用中心復合設計實驗對培養(yǎng)基中的這三種成分進行了響應面分析,結果表明,對于3.3410最佳培養(yǎng)基配方為葡萄糖88g/L,酵母膏2.Og/L,蛋白胨1.Og/L,硫酸銨1.Og/L,NaAc6.0g/L,KH2P041.Og/L,MgS04·7H200.3g

3、/L。預測總油脂產量為8.8嘰,驗證實驗中實際搖瓶油脂產量為8.5g/L;對于M80最優(yōu)培養(yǎng)基組成為:葡萄糖80g/L,酵母膏2.Og/L,蛋白胨1.0g/L,硫酸銨1.0g/L,NaAc6.0g/L,KH2P041.0g/L,MgS04·7H200.3g/L。預測總油脂產量為12.8g廠L,驗證實驗中實際搖瓶產量為11.7g/L。3.油脂成分測定通過GC.MS對3.3410和M80兩菌株油脂成分的分析表明,兩菌種的油脂主要是16和18個碳原子的脂肪酸,和植物油鏈長相似,接近石化柴油15個碳原子的鏈長。兩菌株油脂中不飽和脂肪酸含量較高。3.3410

4、和M80油脂中不飽和脂肪酸的含量分別占各自油脂總量的62.7%和67.9%。4.菌體殘渣粗蛋白的測定通過凱氏定氮法對提取油脂后的菌體殘渣進行了粗蛋白的測定,結果表明,3.3410和M80粗蛋白的含量分別占菌體殘渣總量的33.3%和26.9%。5.微生物油脂生產綜合利用的分析表明,微生物油脂發(fā)酵具備綜合利用的潛力,具有重要的經濟和社會價值。關鍵詞。微生物油脂培養(yǎng)基優(yōu)化綜合利用IIABSTRACTThethesisisaboutfl弱k.shal(erfIe肌entationofmicrobiallipidproductionusing3.34lO鋤d

5、M80.Studiesonthenutritional鋤denvir0唧emalrequirementsforoilproductionwerecarriedout.mou曲GC.MSdetectedmein留edientofthelipidTheanalysistothemicrobiallipidfe徹entation’scomprehensiveutilizationw弱studiedalso.Themainworksandconclusions齜.easfollowed:1.nehighestmicrobiallipid0utputills

6、i)(s仃ainsis3.341O鋤dM802.Fe九nentationconditionoptimized:(1)Thecarbonsollrce跚dnitrogensourceareiInponanttooilfement.(2)Througllsinglefactormethod,glucoseandCompoundni們gensourceareconfi肌ed弱carbonsource鋤dni艄ogensourcerespectiVely.(3)nencen仃alcomplexdesi印metllodw勰印pliedfortheopt婦iz

7、ationofcul咖lmedi哪.nw弱showedmatmeprimefe咖entationmediumcontaillto3.34lO:glucose88g/L,ye弱tex仃act2.0g,L,peptone1.O∥L,(NH4)S041.0∥L,NaAc6.0g,L,KH2P041.Og/L,MgS04‘7H200.3g/L。AccordiIlgtot11eopthizedmedium,也eyieldincre弱edt08.5g,L.TheDrimefe玎nentationmediumcontaillt0M80:glucose80g/L,

8、ye弱tex們ct2.0g,L,peptone1.Og/L,(N心)S041.0g/L,NaAc6.Og/L,KH2P04

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