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《二穗短柄草cbl和cipk基因家族的鑒定、進(jìn)化分析、表達(dá)譜分析及克隆》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號學(xué)號M201171512學(xué)校代碼10487密級碩士學(xué)位論文二穗短柄草CBL和CIPK基因家族的鑒定、進(jìn)化分析、表達(dá)譜分析及克隆學(xué)位申請人：張揚(yáng)學(xué)科專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：何光源教授答辯日期：2014年01月19日萬方數(shù)據(jù)AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceGenome-WideIdentification,Phylogenetic,ExpressionAnalysi
2、sandCloningofCBLandCIPKGeneFamiliesinBrachypodiumdistachyonCandidate:YangZhangMajor:GeneticsSupervisor:Prof.GuangyuanHeHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaJan.,2014萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)
3、容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，
4、在年解密后適用本授權(quán)書本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打√）學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日萬方數(shù)據(jù)華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要為了適應(yīng)各種環(huán)境，植物演化出了發(fā)達(dá)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，感應(yīng)及傳遞外界信號[1]2+并及時做出相應(yīng)的響應(yīng)。Ca是可以將感應(yīng)到的外界信號在體內(nèi)進(jìn)行傳導(dǎo)的第二信使，在真核生物的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中發(fā)揮重要的作用。CBL（CalcineurinB-Like,類鈣2+調(diào)磷酸酶B蛋白)作為植物特異的Ca傳感器，與CIPK（CBL-interactingprotei
5、nkinase,2+CBL互作蛋白激酶）二者都是植物在非生物逆境脅迫下Ca信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的重要組分。過去對CBL和CIPK基因家族的研究，主要集中在擬南芥、水稻等模式植物上。而在與小麥親緣關(guān)系較近的模式植物二穗短柄草中的系統(tǒng)研究，迄今還未見報道。本研究以二穗短柄草為材料，在鑒定CBL和CIPK基因家族成員的基礎(chǔ)上，采用半定量RT-PCR的方法，分析了在不同組織中和逆境脅迫及相關(guān)信號分子處理下CBLs和CIPKs的基因表達(dá)譜；并進(jìn)行了基因克隆，成功構(gòu)建了酵母表達(dá)載體。取得的主要研究結(jié)果如下：（1）以擬
6、南芥的CBL和CIPK序列為模板，在Phytozome數(shù)據(jù)庫中搜索二穗短柄草的CBL和CIPK序列，鑒定出11個CBLs和35個CIPKs，并對9個CBL基因和32個CIPK進(jìn)行了比較深入的生物信息學(xué)分析。（2）通過半定量RT-PCR技術(shù)，檢測了CBL和CIPK基因在滲透、低溫和高鹽非生物逆境脅迫及相關(guān)分子信號ABA、乙烯和雙氧水處理下的表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CBLs和CIPKs的基因表達(dá)對上述部分處理能夠發(fā)生響應(yīng)，但表達(dá)變化程度存在差異。（3）并以獲得的序列為基礎(chǔ)設(shè)計特異引物，克隆得到7個CBL
7、基因和8個CIPK基因的全長ORF序列。（4）構(gòu)建CBL和CIPK基因酵母表達(dá)載體pGBKT7-BdCIPKs，與pGADT7-BdCBLs，為下一步進(jìn)行酵母雙雜交做好準(zhǔn)備。本文研究結(jié)果為運(yùn)用酵母雙雜交等技術(shù)，深入研究二穗短柄草CBLs和CIPKs在響應(yīng)非生物逆境脅迫中的作用奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：二穗短柄草，CBL家族，CIPK家族，表達(dá)分析，基因克隆I萬方數(shù)據(jù)華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractLivingunderthecomplexandversatileconditions,plant
8、shaveevolvedtheiruniquewaystorespondtoenvironmentalstimuliandtosurvivefrombioticandabioticstresses,astheycan’tescapebymovingtoplaceswhicharemorefavorable.Duringevolution,plantshaveformedsophisticatedsystemstoperceive,transduce,andrespondtostressesat[
