二穗短柄草三個(gè)nac基因的克隆與表達(dá)分析

二穗短柄草三個(gè)nac基因的克隆與表達(dá)分析

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1、分類號(hào)學(xué)號(hào)M201171531學(xué)校代碼10487密級(jí)碩士學(xué)位論文二穗短柄草三個(gè)NAC基因的克隆與表達(dá)分析學(xué)位申請人:馮佳璐學(xué)科專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:楊廣笑教授答辯日期:2014年1月19日萬方數(shù)據(jù)AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceCloningandExpressionAnalysisofThreeBdNACGenesinBrachypodiumdistac

2、hyonCandidate:FengJialuMajor:BiochemistryandMolecularBiologySupervisor:Prof.YangGuangxiaoHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaJan,2014萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對

3、本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到,本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:日期:年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□,在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。(請?jiān)谝陨戏娇?/p>

4、內(nèi)打“√”)學(xué)位論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:日期:年月日日期:年月日萬方數(shù)據(jù)華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要干旱、極端溫度和高鹽等各種非生物逆境嚴(yán)重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì),植物抗逆性的分子機(jī)理及抗逆作物新品種培育一直是植物科學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。近年來,已鑒定出大量的與植物抗逆有關(guān)的基因。NAC轉(zhuǎn)錄因子是近年來研究的比較多的一類植物中特異的轉(zhuǎn)錄因子家族,擬南芥和水稻基因組中NAC編碼基因的數(shù)量均超過100個(gè)。NAC參與植物多種生長發(fā)育過程以及植物對生物和非生物逆境的反應(yīng)。研究表明,逆境誘導(dǎo)性NAC在植物抗逆

5、性反應(yīng)中起重要作用,而有關(guān)新型單子葉模式生物二穗短柄草中NAC基因功能的研究報(bào)道很少。本研究從二穗短柄草中克隆得到了3個(gè)NAC編碼蛋白,根據(jù)其與擬南芥和水稻同源NAC同源關(guān)系,分別命名為BdNAC3、BdNAC4和BdNAC19,并對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了預(yù)測,在此基礎(chǔ)上對其自激活功能、亞細(xì)胞定位以及在各種逆境下的表達(dá)變化進(jìn)行了分析,取得的主要研究結(jié)果如下:(1)利用生物信息學(xué)的方法分析了3個(gè)NAC編碼蛋白的二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)以及亞細(xì)胞定位預(yù)測,并進(jìn)行了多序列比對,構(gòu)建了二穗短柄草整個(gè)NAC家族的基因進(jìn)化樹。(2

6、)運(yùn)用酵母單雜交的方法驗(yàn)證了3個(gè)NAC編碼蛋白的自激活功能,發(fā)現(xiàn)BdNAC3和BdNAC19兩個(gè)基因編碼蛋白的自激活活性很強(qiáng),而BdNAC4的自激活活性相對較弱。(3)利用各種不同逆境條件和信號(hào)分子處理二穗短柄草幼苗,并運(yùn)用熒光定量PCR的方法檢測了3個(gè)NAC基因在不同處理?xiàng)l件下的表達(dá)變化。結(jié)果表明,NaCl處理可顯著上調(diào)BdNAC3和BdNAC19的表達(dá),而PEG處理能強(qiáng)烈誘導(dǎo)BdNAC4的表達(dá),這一結(jié)果表明,不同的NAC基因?qū)Ω鞣N逆境脅迫的響應(yīng)存在差異。(4)BdNAC3-GFP融合蛋白分析結(jié)果

7、表明,BdNAC3定位于細(xì)胞核中。本論文的研究結(jié)果為進(jìn)一步深入探討NAC基因在非生物逆境反應(yīng)中的作用奠定了基礎(chǔ)。I萬方數(shù)據(jù)華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文關(guān)鍵詞:二穗短柄草,BdNAC,基因克隆,基因表達(dá),亞細(xì)胞定位,非生物逆境II萬方數(shù)據(jù)華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractAbioticstressessuchasdrought,extremetemperaturesandsaltadverselyinfluencetheyieldandqualityofcrops.Themolecularmecha

8、nismsunderlyingplanttolerancetothesestressesandbreedingresistantcropvarietieshavebeenahotresearchinplantscience.Inrecentyears,alargenumberofgenesassociatedwithresistanceinplantshavebeenidentified.NACsareaclassofplant-specifictranscripti

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