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《二穗短柄草bdgf14-c基因的克隆與表達(dá)分析》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號學(xué)號M201171500學(xué)校代碼10487密級碩士學(xué)位論文二穗短柄草BdGF14-c基因的克隆與表達(dá)分析學(xué)位申請人：王敏學(xué)科專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：楊廣笑教授答辯日期：2014年1月19日萬方數(shù)據(jù)AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceCloningandExpressionAnalysisofBdGF14-cinBrachypodiumDistachyonCandidate：WangminMajor：GeneticsSupervisor：Prof
2、.YangGuangxiaoHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaJan.,2014萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留
3、并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日萬方數(shù)據(jù)華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要自然界中植物的生長發(fā)育經(jīng)常受到干旱、高鹽、低溫和重金屬污染等非生物逆境以及各種病原微生物、蟲害等生物逆境的影響。各種逆境脅迫嚴(yán)重影響植物生長發(fā)育，并造成作物的品質(zhì)和產(chǎn)量下降。植物在長期的進(jìn)化過程中已經(jīng)形成了一
4、系列的生化和分子機(jī)制，通過這些機(jī)制調(diào)節(jié)自身的代謝和生長方式以適應(yīng)逆境環(huán)境。研究植物對逆境脅迫的感應(yīng)和耐受機(jī)制，對于作物抗性新品種培育具重要意義。14-3-3蛋白是一類由多基因家族編碼的蛋白質(zhì)，它通過與具有磷酸化的絲氨酸和蘇氨酸殘基的靶蛋白互作，調(diào)節(jié)多種生理過程中多種酶的活性，進(jìn)而參與植物的代謝調(diào)控、生長發(fā)育和逆境反應(yīng)等生命活動。目前有關(guān)新型單子葉模式生物二穗短柄草中14-3-3蛋白功能的研究鮮有報道。本研究從二穗短柄草中克隆到了一個14-3-3蛋白基因，并命名為BdGF14-c，對該基因表達(dá)特性與功能進(jìn)行了初步分析,主要研究結(jié)果如下：（1）BdGF14-c基因的ORF長為7
5、71bp，定位于3號染色體上，含有5個編碼的外顯子；多序列比對發(fā)現(xiàn)該基因編碼一個高度保守的14-3-3蛋白，證實(shí)BdGF14-c屬于14-3-3超家族；通過進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn)該基因與水稻14-3-3蛋白的同源關(guān)系最近。（2）通過利用RT-PCR技術(shù)分析表明，BdGF14-c基因在二穗短柄草的根、莖、葉和穎果中均有較高水平的表達(dá)。（3）在各種逆境脅迫如低溫、PEG、NaCl和信號分子如ABA、H2O2、MeJA處理下的二穗短柄草幼苗BdGF14-c基因的表達(dá)，分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，低溫和MeJA處理下BdGF14-c基因的表達(dá)量下調(diào)，在MeJA處理下尤其顯著。（4）構(gòu)建BdGF14-c-G
6、FP融合蛋白表達(dá)載體，通過煙草表皮細(xì)胞瞬時表達(dá)分析，結(jié)果表明BdGF14-c在細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中均有表達(dá)。上述研究結(jié)果為進(jìn)一步深入研究BdGF14-c的功能奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：二穗短柄草；逆境；14-3-3；BdGF14-c；基因表達(dá)分析；亞細(xì)胞定位I萬方數(shù)據(jù)華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractPlantsarefrequentlychallengedbyvariousbio-andabioticstressessuchasdrought,highsalt,lowtemperatureandheavymetalcontaminationaswellaspathog
7、enicmicroorganismsandpestsattacks.Stressesseriouslyaffectplantgrowthanddevelopmentandoftenresultindeclineinthecrops’qualityandyield.Plants,duringthelongprocessofevolution,haveformedaseriesofbiochemicalandmolecularmechanismstoregulatetheirmetabolismandgrowthpat
