新型at1受體拮抗劑降壓活性探究

《新型at1受體拮抗劑降壓活性探究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、新型ATI受體拮抗劑降壓活性探究【摘要】目的研究新型ATI受體拮抗劑的降壓活性。方法利用放射性受體結(jié)合實驗和降壓實驗評價化合物對ATI受體親和力大小以及體內(nèi)降壓活性。結(jié)果與陽性對照氯沙坦相比，1號化合物有更好的ATI受體親和力。結(jié)論1號化合物具有較好的降壓效果?！娟P(guān)鍵詞】高血壓；細胞；新型ATI高血壓是一種常見的心血管疾病，在人群中有相當(dāng)高的致病率和死亡率。我國當(dāng)前有1.6億高血壓患者，而且每年還以300萬人新發(fā)病遞增，每年因心腦血管合并癥而死亡的有260萬人，嚴重影響了人民的生命和健康。自從第一個血管緊張素II受體拮抗劑一氯沙坦在瑞典問世以來，人們對

2、沙坦類藥物的作用機制、藥理作用、臨床效果的認識不斷更新，在心腦血管疾病的防治中應(yīng)用越來越廣泛，而且越來越受到臨床上的重視。最新研究報告顯示，長期服用沙坦類藥物的高血壓患者，患癌癥的幾率遠低于不服用沙坦類藥物的人群，從而揭開了沙坦類藥物具有抗腫瘤作用的新篇章。世界衛(wèi)生組織(WHO)建議的血壓測量標準是：正常成人收縮壓應(yīng)小于或等于140mmHg(18.6kPa),舒張壓小于或等于90mmHg(12kPa)o如果成人收縮壓大于或等于160mmHg(21.3kPa),舒張壓大于或等于95mmHg(12.6kPa)則為高血壓；血壓值在上述兩者之間，為臨界高血壓。

3、全球高血壓的患病人數(shù)逐年增加，調(diào)查表明高血壓的發(fā)病年齡逐漸趨于年輕化。據(jù)2009年國際高血壓學(xué)會第21屆年會報道，目前全球大約有9.72億人患高血壓或血壓偏高，相當(dāng)于成年人口的26.4%,發(fā)達國家高血壓患者有3.33億人，發(fā)展中國家有6.39億人。預(yù)計到2025年，這一數(shù)字將增加到15.6億。目前龐大的市場被國外產(chǎn)品壟斷，國內(nèi)沙坦類降壓新藥的研發(fā)還需突破和發(fā)展。血管緊張素II受體拮抗劑（沙坦類藥物）是一類特異性高、耐受性好、而且副作用小、安全可靠的新型抗高血壓藥物。本文以BMS-180560為先導(dǎo)化合物，通過構(gòu)效分析、生物電子等排和結(jié)構(gòu)拼合等藥物設(shè)計基

4、本方法，設(shè)計合成了化合物1,并進行了活性評價。關(guān)鍵詞：血管緊張素II受體1,拮抗劑，高血壓，1實驗動物雌性SHR（中國科學(xué)院斯萊科上海實驗動物中心）。2材料2.1材料與儀器新型化合物：東華大學(xué)生物醫(yī)藥研究組；EP214C型電子分析天平：SW-CJ-1FD型超凈工作臺：蘇州凈化；SN-682型Y計數(shù)器：上海日環(huán)廠；上海一恒科學(xué)儀器有限公司；ZH-HX-Z無創(chuàng)尾動脈血壓測量分析系統(tǒng)：淮北正和生物公司;二氧化碳細胞培養(yǎng)箱:ThermoScientifico3實驗方法251-AngII溶液配制:取0.012g（12mg）1251-AngII,加lmlPBS溶解

5、，得到濃度10-2Mo細胞鋪板：取血管平滑肌細胞3-7代鋪于24孔板中（IX107/孔），貼壁后用于試驗。3.1結(jié)合反應(yīng)：每個濃度采用3個復(fù)孔。細胞板每孔依次加入濃度逐漸增加的1251-AngII溶液，使其終濃度分別為OnM；0.02nM；0.04nM；0.08nM；0.16nM；0.32nM；0.64nM；1.5nM,為了扣除非特異性結(jié)合，每個濃度的第三個平行復(fù)孔加入未標記的AngII（終濃度為1X10-6M）和濃度遞增的1251-AngII溶液，每孔的最終體積為1000uL（其中500uL為細胞培養(yǎng)液），4*反應(yīng)150min,反應(yīng)結(jié)束后去除多余的反

6、應(yīng)液，用PBS洗滌3次，加入0.lmol/LNaOH溶液消化細胞lOmin,將細胞消化液移入塑料管，用V計數(shù)器測量每管內(nèi)溶液的Y計數(shù)。經(jīng)GraphPadPrism4飽和曲線擬合程序處理得到1251-AngII受體結(jié)合飽和曲線。3.1競爭性實驗：藥物溶液：取一定量的化合物溶于1niL的DMSO溶液，濃度為10-2M,再10倍稀釋成不同濃度的溶液（1X10-10M?1X10-4M）o細胞鋪板（IX107/孔）后，每孔加入0.1nM1251-AngII以及不同濃度的新化合物（終濃度1X10-6?1X10-12mol/L），總體積為1000uL,4工反應(yīng)150

7、min,反應(yīng)結(jié)束后去除游離的1251-AngII,用PBS洗滌3次，加入0.1mol/LNaOH溶液消化10min,將細胞液移入塑料管，用Y計數(shù)器測量每管內(nèi)溶液的Y計數(shù)。經(jīng)GraphPadPrism4競爭結(jié)合曲線擬合程序處理即可得出新型化合物抑制與膜蛋白結(jié)合的半抑制常數(shù)和IC50值。3.2體內(nèi)降壓實驗低劑量組（10mg/kg）、高劑量組（15mg/kg、陽性對照組（洛沙坦lOmg/血）、陰性對照組。方法：（1）大鼠加溫和固定：采用全身加溫加溫。固定采用有機玻璃固定器。2）確定起始脈搏水平：將鼠尾依次穿過尾套和脈搏換能器，調(diào)整尾巴位置和儀器增益，使尾動脈

8、脈搏信號足夠大。（3）測定血壓：用橡皮球充氣加壓，使尾套內(nèi)壓力升高至脈搏完全消失，再加壓20-