川芎嗪聯(lián)合順鉑對小細胞肺癌細胞影響研究

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1、川葦嗪聯(lián)合順鉗對小細胞肺癌細胞影響研究【摘要】目的：進一步研究順鉗、川穹嗪對于小細胞肺癌細胞的治療作用以及影響分析。方法：在含小牛血清10%的培養(yǎng)液RPMI1640,進行細胞株NCI-H446的培養(yǎng)。結果：相比于對照組，順鉗組、川穹嗪組、順鉗川穹嗪組的P16表達水平升高，順鉗川穹嗪組的P16表達水平又高于順鉗組、川穹嗪組。順鉗組、川穹嗪組、順鈾川穹嗪組的CyclinD1表達水平下降。順鈾川穹嗪組的CyclinD1表達水平又高于順鉗組、川穹嗪組。結論：順鉗、川穹嗪都可以對NCL-H446細胞增殖起到抑制作用，兩種藥物的聯(lián)

2、合使用效果更加明顯。與此同時，還可以降低小細胞肺癌的CyclinD1水平，提高P16表達水平?！娟P鍵詞】川葦嗪；順舘；小細胞肺癌細胞小細胞肺癌比較容易出現(xiàn)血行和淋巴轉移，這是研究和治療的一個難點，也是重點問題。通過大量的研究資料證明，川穹嗪對于肺癌細胞有抑制生長的作用，順苗則是一種比較常用的"化療”藥物，對于小細胞肺癌的治療有著一定的療效和作用，但是，在后期則比較容易出現(xiàn)抗藥性。還有的研究表明，川穹嗪與化療藥物一起使用，可以有效地提高對于部分惡性腫瘤的療效［1］。為了進一步研究順鉗聯(lián)合川穹嗪對于小細胞肺癌的治療和作用，

3、筆者進行了詳細研究。1材料與方法1.1主要試劑及細胞株人小細胞肺癌NCI-H446細胞株，順鉗、川穹嗪注射液、小牛血清、培養(yǎng)液RPMI1640,CyclinD1蛋白。1.2方法在含小牛血清10%的培養(yǎng)液RPMI1640,進行細胞株NCI-H446的培養(yǎng)。漿細胞進行胰酶消化，成為單細胞的懸液,將細胞密度設成1X105/ml,分成空白對照組（常規(guī)培養(yǎng)），順鈾組（加入順鉗培養(yǎng)液2ug/ml）,川穹嗪組（加入川穹嗪培養(yǎng)液100ug/ml）和順鉗聯(lián)合川穹嗪組（加入順鉗培養(yǎng)液2ug/ml+加入川穹嗪培養(yǎng)液100ug/ml）,進行培

4、養(yǎng)。在一定的時間廢培養(yǎng)液、終止培養(yǎng)。每孔加入lOulMTT,培養(yǎng)四小時,去掉上清，在加入lOOulDMSO震蕩10分鐘，然后檢測0D值。2結果細胞集落形成率分析：順鎧組是15.7%±3,6%，川穹嗪組是17.8%±3.8%,順鉗聯(lián)合川穹嗪組是11.3%±2.8%,對照組是23.9±4.1,相比較P小于0.05?順鉗聯(lián)合川穹嗪組與順鉗組、川穹嗪組相比較，P小于0.05.3討論對于小細胞肺癌患者主要是以化療和放療為主，此病患者的存活率僅為5%。最主要的原因就是：大部分患者在治療過程中會產(chǎn)生耐藥性［2］。隨著醫(yī)學的不斷發(fā)展，

5、人們對于川穹嗪治療腫瘤的療效作用日益關注。根據(jù)本文的研究顯示：在24.48.72小時時，光密度值，順鈾組為0.317±0.043,0.803±0.038,0.987±0.027,川穹嗪組為0.389±0.045,0.816±0.062,1.032±0.033,順鈾聯(lián)合川穹嗪組為0.318±0.039,0.781±0.035,0.854±0.036,空白組的為0.428±0.043,0.831±0.058,1.005±0.068,相比較P小于0.05.細胞集落形成率分析:順鉗組是15.7%±3.6%，川穹嗪組是17.8%

6、±3?8%,順鉗聯(lián)合川穹嗪組是11.3%土2.8%,對照組是23.9±4.1,相比較P小于0.05?順鈾聯(lián)合川穹嗪組與順鈾組、川穹嗪組相比較，P小于0.05.在用藥72小時之后，相比于對照組，順鉗組、川穹嗪組、順鈾川穹嗪組的P16表達水平升高，順鉗川穹嗪組的P16表達水平又髙于順鉗組、川穹嗪組。順鉗組、川穹嗪組、順鉗川穹嗪組的CyclinD1表達水平下降。順鉗川穹嗪組的CyclinD1表達水平又高于順鉗組、川穹嗪組。此結果充分說明，順鉗、川穹嗪都可以在一定程度上起到對小細胞肺癌的抑制作用，兩種藥物的聯(lián)合使用，對于小細胞

7、肺癌的抑制作用更加增強，主要原因在于川穹嗪種新的血管生長抑制劑，能夠抑制腫瘤新生血管的形成，對惡性腫瘤細胞與內皮細胞之間的黏附有明顯的抑制作用，降低內皮細胞的通透性，保護內皮細胞的完整，阻斷惡性腫瘤細胞與組織基質的黏附，降低小細胞肺癌的CyclinDI水平，提高P16蛋白表達水平，從而減少惡性腫瘤細胞的轉移，且川葦嗪可通過其抗凝作用起到抗腫瘤轉移；另外，川穹嗪是活血化瘀抗腫瘤中藥川葦?shù)闹饕煞?，具有放射增敏及放射保護、化療增效與減毒以及免疫調節(jié)的作用，臨床應用的安全性較高［3］。綜上所述，順鉗、川穹嗪都可以對NCL-H

8、446細胞增殖起到抑制作用，兩種藥物的聯(lián)合使用效果更加明顯。與此同時，還可以降低小細胞肺癌的CyclinD1水平，提高P16蛋白表達水平。參考文獻［1］吉濤，劉永，王偉等.肺癌端粒酶活性、P53突變蛋白及細胞增殖DNA合成期比例相關研究［J］.徐州醫(yī)學院學報，2008,22(1)：30-33［2］徐曉玉，嚴鵬科，陳剛等.川葦嗪對小