資源描述：
《具有微納交替結(jié)構(gòu)的多層支架對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、國內(nèi)圖書分類號：R318．08國際圖書分類號：620西南交通大學研究生學位論文密級。：公開縣查邀納窒鲞結(jié)構(gòu)的墨星童翌型量髓閶壅匱王細胞盛量僉絲的墅喧年級．．2Q!．!級姓名工珊申請學位級別堡堂亟±專業(yè)生塑絲堂皇筮王生塑堂指導老師周紹基數(shù)援二零一四年五月ClassifiedIndex：R318．08U．D．C：620SouthwestJiaotongUniversityMasterDegreeThesisAMICRO-NANOAIJERNp汀INGMUIJILAYERSCAFFOLDFOROSTEO(狃NESISOFBONEMARROWMESENC
2、HYMALSTEMCELLSGfade：2011Candidate：ShanOingAcademicDegreeAppliedfor：MasterofScienceSpeciality：BiochemistryandMolecularBiologySupervisor：Prof．ShaobingZhouMay,2014西南交通大學學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)西南交通大學可以將本論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)
3、庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復印手段保存和匯編本學位論文。本學位論文屬于1．保密口，在年解密后適用本授權(quán)書；2．不保密函，使用本授權(quán)書。(請在以上方框內(nèi)打‘‘√”)學位論文作者簽名：了聊吁日期：如J啦5．q?虢月巍殳隰例啦歲西南交通大學碩士學位論文主要工作(貢獻)聲明本學位論文中主要工作(貢獻)如下：(1)將靜電紡絲技術(shù)和微流控技術(shù)相結(jié)合，制備了一種新型PCL電紡納米纖維和海藻酸鈣水凝膠微球交替的多層微納結(jié)構(gòu)支架。通過掃描電子顯微鏡(sEM)、體視顯微鏡、流變儀以及激光共聚焦顯微鏡(CLsM)對其進行了表征；(2)將骨髓間充質(zhì)干細胞包裹
4、進微納結(jié)構(gòu)中，考察該結(jié)構(gòu)對干細胞活性、增殖、分化的影響：(3)通過進行大鼠皮下移植實驗，研究該微納結(jié)構(gòu)支架的異位成骨作用。本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是在導師指導下獨立進行研究工作所得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中作了明確說明。本人完全了解違反上述聲明所引起的一切法律責任將由本人承擔。學位論文作者簽名：丁硼日期：2,0tq-．5．瑪本論文得到以下項目資助國家重大科學研究計劃(2012CB933602)“多級微納結(jié)構(gòu)生物活性材料促進骨組織
5、快速修復的研究”國家自然科學基金(51373138)“具有三重形狀記憶功能的高分子表面微圖案及其與細胞作用機制"西南交通大學碩士研究生學位論文第1頁摘要雖然用于骨組織工程的支架繁多，但其各自均有不足之處，很難滿足目前對骨組織修復，替代，重建的要求。因此，制備生物相容性好，能夠模仿細胞外基質(zhì)，力學強度適宜，而且具有良好成骨作用的新型骨組織工程支架或者改性支架成為關(guān)鍵。在本論文中，基于目前骨組織工程存在的問題，制備了一種新型具有微納交替結(jié)構(gòu)的多層支架，通過向其中載入大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(fBMSCs)和骨形態(tài)發(fā)生蛋白一2(BMP一2)，研究了該材料的
6、成骨分化功能。首先，我們利用靜電紡絲技術(shù)制備了PCL納米纖維膜，并通過掃描電子顯微鏡(SEM)對其表面形貌和直徑大小進行了表征。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，纖維較光滑，呈無規(guī)分布，表面形貌良好，平均直徑為282lllIl。接著，我們自行設(shè)計、裝配了微流控裝置，并利用微流控技術(shù)制各了海藻酸鈣水凝膠微球，通過體視顯微鏡，流變儀等對微球的表面形貌和流變性能進行了考察。結(jié)果表明，微球呈球形，大小均一，而且分散均勻。同時，確定了其粘彈性，也證明了該水凝膠的三維交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。之后，將靜電紡絲制備的納米纖維膜和微流控制備的微球通過層層不斷疊加，最終得到一層纖維膜，一層微球的多層
7、微納結(jié)構(gòu)支架。其次，我們從大鼠脛腓骨中提取了原代的骨髓問充質(zhì)干細胞(rBMSCs)，將其包裹進海藻酸鈣微球中，利用活死細胞染色和Ahmarbk法考察了微球包裹細胞的生存狀態(tài)和增殖情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)微球中的細胞大部分處于存活狀態(tài)，存活率較高(大于85％)。包裹的細胞與空白對照組相比，有較緩慢的增殖。接著，將干細胞和骨形態(tài)發(fā)生蛋白一2(BⅧ．2)共同載入微球和微納結(jié)構(gòu)中，檢測其堿性磷酸酶(√岫)的表達量，發(fā)現(xiàn)含有BMP一2的微納結(jié)構(gòu)支架組在14和21天時，均具有最高的ALP表達量。通過茜素紅S(AlizariIlRedS)染色定性和定量地考察了體外培養(yǎng)2
8、l天時鈣鹽的沉積。結(jié)果與21天時的ALP結(jié)果類似。最后，我們進行了體內(nèi)動物實驗，將微納結(jié)構(gòu)支架植入到SD大鼠皮下，考察其異位成骨作用。在
