組織界面剛度變化對骨髓間充質(zhì)干細胞生長及成骨分化的影響

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1、學(xué)術(shù)學(xué)位碩±學(xué)位論文單位代巧10678分:R314:類號學(xué)號;2012213密級;尾略庭種A常碩i學(xué)位論文組織界面剛度變化對晉髓間充質(zhì)干細胞生長及成骨分化的影響院一(系)、所昆明醫(yī)科大學(xué)第臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名許明卿學(xué)科(骨外科)、專業(yè)外科學(xué)學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位指導(dǎo)教師何飛主任醫(yī)師二〇—五年五月尾略g種太凈碩:t學(xué)位論文組織界面剛度變化對骨髓間充質(zhì)干細胞生長及成骨分化的影響研究生姓名許明卿學(xué)科、專業(yè)外科學(xué)(骨外科)申請學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位指導(dǎo)教師何飛主任醫(yī)師指導(dǎo)小組教師趙學(xué)凌

2、主任醫(yī)師張春強副主任醫(yī)師完成日期二〇—五年五月尾略S種A常研究生學(xué)位論文研究撰寫聲明本人鄭重聲明:本學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下,獨立進行學(xué)位課題研究所取得的研究成果。論文中除特別加W標注和致謝的地方外,不包含他人或其他機構(gòu)己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本研究和論文做過貢獻的同道我均在論文中作了明確的說明并表明謝意。該學(xué)位論文資料若有不實之處,本人愿一切相關(guān)責(zé)任承擔(dān)。論文作者(簽名):町W《年*^月^日2尾晦6種常研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解昆明醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留

3、并向國家有關(guān)部口或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。學(xué)??晒颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容(確屬保密內(nèi)容已注明,并在解密后遵守此規(guī)定);學(xué)??刹捎糜坝 ⒖s印或其他手段保存本學(xué)位論文。學(xué)位論文作者(簽名):指導(dǎo)教師(簽名):‘以|>年t月n日的3年r月n日^本人及導(dǎo)師同意將學(xué)位論文提交至清華大學(xué)"中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社"進行電子和網(wǎng)絡(luò)出版,并編入CNKI系列數(shù)據(jù)庫,傳播本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,同意按《中國優(yōu)秀博碩±學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程》規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。學(xué)位論文作者(簽名)碼作指導(dǎo)教師(簽名^5年>

4、1月n日月^曼/目錄中英文縮略詞1中文摘要2Abstract6一第章緒論101.科學(xué)問題及研究意義102.國內(nèi)外研究現(xiàn)狀1321骨髓間充質(zhì)干細胞的研究現(xiàn)況.132.2組織工程新材料的研究現(xiàn)況163.本文的研究目的和內(nèi)容183.1研究目的183.2研究肉容18第二章大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)、鑒定及不同剛度水凝膠界面的制備處理...201.引胃202.實驗材料212.1主要實驗儀器及耗材212.2主要試劑及化學(xué)試劑配制222.3實驗動物233.實驗方法233.1大鼠

5、骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定233.2不同剛度聚兩煉醜胺水凝膠的制備及表面修飾處理%3.3不同界面剛度接種BMSCs的形態(tài)觀察28-3.4經(jīng)表面處理后PA膠培養(yǎng)體系的CCK8毒理性測試283.5凝膠界面上典型的BMSCs免疫焚光觀察294.實驗結(jié)果304.1SD大鼠BMSCs不同培養(yǎng)時期的形態(tài)觀察304.2體外培養(yǎng)BMSCs的鑒定324.3普通培養(yǎng)條件下BMSCs的生長特點和自我更新能力334.4不同剛度凝膠界面上細胞形態(tài)的觀察335.龍40643.小結(jié)44第蘭章不同剛度水凝膠界面對BMSCs生

6、長及成骨轉(zhuǎn)化的影響1.引胃442.實驗材料452;1主要實驗儀器及耗材4542.2主要試劑53.實驗方法463.1BMSCs的成骨分化后茜素紅染色檢測巧沉積46463.2ALP堿性憐酸酶濃度3PICP-.3BGP(骨巧素)、C端1型前膠原)指標的ELISA檢測47(3-nx2amRNA.4PCRFPCR測BGP、Ru、Colll的水平49巧光定量(Q)檢3ttF-E-n.4Wesernblo檢測actin和cadheri蛋白表達水平524.實驗結(jié)果544.1茜素紅染色BMS

7、Cs分化成骨細胞巧結(jié)節(jié)形成情況544.2BMSCs成骨分化因子的變化巧4.3BMSCs成骨分化因子的mRNA水平變化564.4BMSCs成骨分化因子的蛋白水平變化585.職606.小S61第四章全文總結(jié)及展望63參考文獻65攻讀學(xué)位期嶋本情%71攻讀學(xué)位期嶋來障況71攻讀學(xué)位期間發(fā)表、署名的論文711攻讀學(xué)位期間參與的科研項目7致72it昆明醫(yī)科大學(xué)碩±研究性畢業(yè)學(xué)位論文中英文縮略詞英文縮寫英文

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