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1、第26卷第1期海洋水產(chǎn)研究Vol.26,No.12005年2月MARINEFISHERIESRESEARCHFeb.,2005·綜述·AFLP分子標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展及其在海洋生物中的應(yīng)用1211王偉繼岳志芹孔杰王清印(1中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所,青島266071)(2中國海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院,青島266003)摘要AFLP分子標(biāo)記技術(shù)是一種建立在PCR技術(shù)和RFLP標(biāo)記基礎(chǔ)上的新的DNA指紋技術(shù),具有多態(tài)性豐富、結(jié)果穩(wěn)定可靠、重復(fù)性好、所需DNA量少,且可以在不需預(yù)先知道基因序列的情況下進(jìn)行研究等特點(diǎn),現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于遺傳圖譜構(gòu)建、遺傳多樣
2、性分析、系統(tǒng)進(jìn)化及分類學(xué)、遺傳育種和種質(zhì)鑒定以及基因定位等方面。本文簡(jiǎn)要介紹AFLP分子標(biāo)記技術(shù)的原理、特點(diǎn)、發(fā)展及其在海洋生物中的應(yīng)用現(xiàn)狀及前景展望。關(guān)鍵詞AFLP分子標(biāo)記海洋生物中圖分類號(hào)Q7文獻(xiàn)識(shí)別碼A文章編號(hào)100027075(2005)0120080206DevelopmentofAFLPanditsapplicationinmarineorganism1211WANGWei2jiYUEZhi2qinKONGJieWANGQing2yin(1YellowSeaFisheriesResearchInstitute,ChineseAcad
3、emyFisherySciences,Qingdao266071)(2OceanUniversityofChina,MarineLifeCollege,Qingdao266003)ABSTRACTAFLP(AmplifiedFragmentLengthPolymorphism)isoneofthenewlydevel2opedDNAfingerprinttechniquesbasedonPCRandtheRFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism)techniques.Highpolymorphisms
4、,goodreproducibility,lowusageofDNAtemplateamountandnorequirementofpriorknowledgeofgenomesequencesareadvantagesofAFLP.AFLPhasbeenappliedwidelyinconstructionofgeneticlinkagemap,assessmentofge2neticpolymorphism,pedigreeanalysis,breedingpracticeandgenepositioning.Inthispaper,the
5、principle,characteristicsofAFLPanditsapplicationsinmarinebiologywereintroducedanddiscussed.KEYWORDSAFLPMolecularmarkerMarineorganismAFLP(AmplifiedFragmentLengthPolymorphism)———擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù),又稱為SRFA(Se2lectiveRestrictionFragmentAmplification),是由荷蘭Keygene公司科學(xué)家ZebeauMarc和VosPiete
6、r等發(fā)展起來的一種檢測(cè)DNA多態(tài)性的新方法,于1993年獲得歐洲專利局專利。AFLP結(jié)合了RFLP的穩(wěn)定性和PCR技術(shù)的高效性,同時(shí)又避免了RFLP受探針限制的因素,因而可產(chǎn)生豐富而穩(wěn)定的遺傳標(biāo)記,被認(rèn)為是一國家863青年項(xiàng)目(2002AA628070)和國家863項(xiàng)目(G2003AA603021)共同資助收稿日期:2003210213;接受日期:2004203203作者簡(jiǎn)介:王偉繼(19722),男,助理研究員,主要從事海洋生物遺傳育種學(xué)和分子生物學(xué)研究.E2mail:wangwj@ysfri.ac.cn,Tel:(0532)5823291?
7、1994-2009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net第1期王偉繼等:AFLP分子標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展及其在海洋生物中的應(yīng)用81種理想有效的分子標(biāo)記技術(shù),現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于遺傳圖譜構(gòu)建、遺傳多樣性分析、系統(tǒng)進(jìn)化及分類學(xué)、遺傳育種和種質(zhì)鑒定以及基因定位等方面。1AFLP分子標(biāo)記的原理和特點(diǎn)AFLP(Vosetal.1995)是建立在RFLP基礎(chǔ)上的選擇性PCR,其原理是將DNA進(jìn)行限制性酶切,再將特定的接頭連接在酶切片段的兩端
8、,形成一個(gè)帶接頭的特異性片段,以此為模板,以接頭序列和限制性內(nèi)切酶的切點(diǎn)序列為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增。關(guān)于AFLP分子標(biāo)記原理詳盡的介紹的綜述較
