蘇云金芽孢桿菌b-pr-88菌株中cry2ab4基因的表達(dá)和殺蟲(chóng)活性研究

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1、!"卷#期生物工程學(xué)報(bào)&’()!"*’)#!$$%年%月!"#$%&%’()*$+,(-.#(/%0"$(,(12+,(-!$$%!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!蘇云金芽孢桿菌!"#$"%%菌株中!"#3$%4基因的表達(dá)和殺蟲(chóng)活性研究&’($)**+,-.-/0-*)12+1+/.3412+5+26,7.8,5)39)-)!"#3$%47$,:&’!())*+,-*"(./(0.+(+;2$.+-!O#$ONN<，!<<

2、，!，WX8*Y+1/<，F(xiàn)Z*YK,OH1DC<，X8*TBDOTBD<，TUY,’O[,D!""TUJ>BDCOV’,BD3X8*Y;BOKBDC<中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲(chóng)害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京<$$$P#!萊陽(yáng)農(nóng)學(xué)院植保學(xué)院，青島!77<$P"中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所，北京<$$$N<<5/+/%6%27+8(*+/(*2-(*.#(,(12(-9,+$/:#&%+&%&+$;<$&%0/9%&/&，<$&/#/)/%(-9,+$/9*(/%0/#($，!"#$%&%=0+;%>2(-=1*#0),/)*+,50#%$0%&，.%#?#

3、$1<$$$P#，!"#$+!7+#2+$1=1*#0),/)*+,!(,,%1%，@#$1;+(!77<$P，!"#$+".#(/%0"$(,(12A%&%+*0"<$&/#/)/%，!"#$%&%=0+;%>2(-=1*#0),/)*+,50#%$0%&，.%#?#$1<$$$N<，!"#$+摘要以我室自行分離的對(duì)鱗翅目夜蛾科害蟲(chóng)具有高毒力的G:菌株GOH6ONN為材料，用HJ.O.KTH方法從其質(zhì)粒;*8文庫(kù)中篩選到含0*23=8基因的一個(gè)陽(yáng)性克隆9WKNLN，序列測(cè)定發(fā)現(xiàn)，該片段含有0*23=8全長(zhǎng)基因，開(kāi)放讀碼框?yàn)?P$!59?，編碼由7""個(gè)氨基酸組成的

4、%$]%A;蛋白，氨基酸同源性與已公布的0*23=8基因同源性均為PP]N^，經(jīng)G:基因國(guó)際命名委員會(huì)正式命名為0*23=84。根據(jù)0*23=84基因開(kāi)放閱讀框架（Z.K）兩端序列，設(shè)計(jì)合成一對(duì)特異引物T!B5L和T!B5"，HJ.擴(kuò)增獲得0*23=84完整Z.K，與大腸桿菌表達(dá)載體9R=O!<5連接，構(gòu)建了重組表達(dá)質(zhì)粒9R=O!85#，質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌GT!<（;R"），UH=Y誘導(dǎo)后，F(xiàn);FOH8YR電泳證實(shí)該基因表達(dá)了7$A;的蛋白，生物測(cè)定表明，J6-!85#對(duì)棉鈴蟲(chóng)和大豆食心蟲(chóng)具有高毒力，同時(shí)對(duì)小菜蛾和二化螟有一定的殺蟲(chóng)活性，而對(duì)亞洲玉米螟和甜菜夜蛾沒(méi)有殺

5、蟲(chóng)活性。關(guān)鍵詞蘇云金芽孢桿菌，0*23=84基因，基因克隆，蛋白表達(dá)，殺蟲(chóng)活性中圖分類號(hào)_%N文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼8文章編號(hào)<$$$O"$7（/E,(((/DC:>0*23=8C/D/@B?0(’D/35-HJ.O.KTH4/:>’3E6’4G:?:6B1DGOH6ONN，@>10>@B?1?’(B:/31DJ>1DB@1:>>1C>:’Q101:-:’:>/T/913’9:/6BD1D?/0:9/?:?)*,0(/10B013?/‘,/D0/BDB(-?1??>’@/3:>B::>1?C/D/@B?

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