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《蘭州百合基因槍轉(zhuǎn)化方法的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、西北植物學(xué)報，2010，30(4)：0677—0682ActaBot．Borea1．-Occident．Sin．文章編號：1000—4025(2010)040677—06州百合基因槍轉(zhuǎn)化方法的研究師守國，梁東，王順才，馬鋒旺(西北農(nóng)林科技大學(xué)園藝學(xué)院，農(nóng)業(yè)部IN：lk園藝植物種質(zhì)資源利用重點開放實驗室，陜西楊陵712100)摘要：以蘭州百合試管苗鱗片葉為受體，通過基因槍轉(zhuǎn)化法將脫氫抗壞血酸還原酶基因(DHAR)轉(zhuǎn)人蘭州百合，并用GUS染色、PCR擴增和Southern雜交等技術(shù)進行轉(zhuǎn)基因株系的檢測。結(jié)果表明：以蘭州百合鱗片葉為受體材料，在轟擊壓力1100ps
2、i、轟擊距離6cm時，抗性率高達14，轉(zhuǎn)化率為1．5；10mg／L的潮霉素對鱗片葉具有很好篩選作用。GUS分析發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)化株系葉片為藍色；PCR檢測和Southern雜交進一步證實抗性株系為轉(zhuǎn)基因植株，且為單拷貝。關(guān)鍵詞：蘭州百合；遺傳轉(zhuǎn)化；脫氫抗壞血酸還原酶中圖分類號：Q789文獻標識碼：AGeneticTransformationofLanzhouLilyUsingtheBiolisticMethodSHIShou—guo，LIANGDong，WANGShun—cai，MAFeng—wang(CollegeofHorticulture，Keylaborat
3、oryofHorticulturalPlantGermplasmResourceUtilization，NorthwestA＆FUniversity．Yangling，Shaanxi712100，China)Abstract：Fortheestablishmentofasimplemulti—channeltransgenictechnologyofLiliumdavidiivar．uni—colorSalisb．，abiolisticprotocolforthestablegenetictransformationofL．davidiivar．unicol
4、orSalisb．wasdeveloped．ScaleleavesofLanzhoulilywereusedasexplantsandtransformedthedehvdroascorbateredue—tase(DHAR)geneintotheLanzhoulily．TheresistantlineswereanalyzedbyGUSstaining，PCRandSouthernblot．Theresultsshowedthattheresistanceratewas14whenscaleleavesofLanzhoulilywereusedasexpl
5、antsandtransformedbygenegunundertheconditionsof6emshootdistance，1100psiheliumpressure．Thebetterselectiveefficiencywasgottenwhentheconcentrationofhygromycinwas10mg／L．TheresultsofPeRandSouthernblotprovedtheresistantlinesweretransgenicplants，andthetransgenenumberswassinglecopy．Keyword
6、s：Lanzhoulily；transgenic；dehydroascorbatereductase蘭州百合(Liliumdavidiivar．unicolorSal—和生長發(fā)育過程中具有重要功能。在氧化條件下，isb．)是百合科(Liliaceae)百合屬(Lilium))lJ百合的AsA被氧化成脫氫抗壞血酸，脫氫抗壞血酸可被脫一個變種，其鱗莖含糖量高，粗纖維少，味醇香甜，營氫抗壞血酸還原酶(dehydroascorbatereductase，養(yǎng)豐富，具有很高的營養(yǎng)和藥用價值，是食用百合中DHAR)還原為抗壞血酸，DHAR是維持植物細胞的名品，享譽國內(nèi)外，
7、深受人們的歡迎。抗壞血酸正常水平的一個關(guān)鍵酶，也是抗壞血酸一谷抗壞血酸(L—ascorbicacid，AsA)在植物抗氧化胱甘肽循環(huán)途徑中的一個重要酶¨1]。Ushimaru收稿日期：2009—11-02；修改稿收到日期：2O1O—O3—24基金項目：國家自然科學(xué)基金(30871700)；西北農(nóng)林科技大學(xué)拔尖人才支持計劃作者簡介：師守國(1973一)，男(漢族)，在讀博士研究生，主要從事園林植物抗性生理與生物技術(shù)改良研究。E—mail：shishouguo@yahoo．com．en*通訊作者：馬鋒旺，博士，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事園藝植物抗性生理與生物技術(shù)
8、改良研究。Email：fwm64@sina．corn
