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《egfr突變型nsclc的egfr-tki耐藥機(jī)制體外研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中圖分類號密級EGFR突變型NSCLC的EGFR—TKI耐藥機(jī)制體外研究InvestigationontheEGFR—TKIresistancemechanismsofNSCLCwithEGFRmutations鋤vitro計(jì)：學(xué)位論文：87頁表格：6個插圖：22幅趙寶霞指導(dǎo)教師：呂申教授申請學(xué)位級別：博士學(xué)位學(xué)科(專業(yè))：病理學(xué)與病理生理學(xué)培養(yǎng)單位：大連醫(yī)科大學(xué)完成時間：二。一三年四月答辯委員會主席：獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人
2、已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得大連醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：絲室整簽字日期：絲年』月叢目關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于(請?jiān)谝韵孪鄳?yīng)方框內(nèi)打“
3、√”)：作者簽名：導(dǎo)師簽名：1．保密口，在年解密后適用本授權(quán)書。2．不保密彩彩萄住l舛日期：≯口13年廠月，占日日期：徹侈年j廠月／占目目錄一、摘要?????????????????????????1(一)中文摘要?????????????????????1(二)英文摘要?????????????????????7二、正文?????????????????????????15(一)前言???????????????????????1515(一)日IJ萄???????????????????????第一部分EGFR第19外顯子缺失突變NSCLC細(xì)胞株
4、NCI．H1650在TKI作用下的生物學(xué)變化及耐藥產(chǎn)生機(jī)制(一)前言???????????????????????17(二)材料和方法????????????????????181．材料?????????????????????181．1細(xì)胞系???????????????????181．2藥品????????????????????181．3主要實(shí)驗(yàn)器材?????????????????181．4主要試劑??????????????????182．方法?????????????????????192．1Gefitinib耐藥細(xì)胞株NCI—H165
5、0／GR的建立???192．2耐藥細(xì)胞株NCI．H1650／GR的生物學(xué)特征????222．3耐藥細(xì)胞株NCI—H1650／GR的EGFR信號通路部分節(jié)點(diǎn)蛋白的檢測?????????????????232．4耐藥細(xì)胞株NCI．H1650／GR的EMT相關(guān)蛋白檢測??262．5耐藥細(xì)胞株NCI—H1650／GR的EGFR和KRAS基因突變檢測???????????????????262．6免疫細(xì)胞化學(xué)的判斷標(biāo)準(zhǔn)???????????262．7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法?????????????????26(三)結(jié)果???????????????????????271
6、．Gefitinib耐藥細(xì)胞株NCI．H1650／GR的建立????271．1NCI．H1650細(xì)胞EGFR和KRAS基因突變?????271．2MTT法檢測細(xì)胞抑制率和耐藥指數(shù)???????271．3耐藥細(xì)胞株NCI。H1650／GR的gefitinib作用生長抑制曲線?????????????????????282．耐藥細(xì)胞株NCI．H1650／GR的生物學(xué)特征?????282．1耐藥細(xì)胞株NCI．H1650／GR細(xì)胞形態(tài)學(xué)?????282．2耐藥細(xì)胞株NCI．H1650／GR生長曲線和群體倍增時間?????????????????????29
7、2．3耐藥細(xì)胞株NCI—H1650／GR細(xì)胞周期分布????292．4耐藥細(xì)胞株NCI—H1650／GR細(xì)胞凋亡??????303．耐藥細(xì)胞株NCI．H1650／GR的EGFR信號通路部分節(jié)點(diǎn)蛋白表達(dá)????????????????????303．1免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測EGFR、pYl068一EGFR、KRAS和BRAF蛋白表達(dá)???????????????303．2Westem—Blotting法檢測EGFR、pY1068一EGFR、KRAS和BRAF蛋白表達(dá)???????????????314．耐藥細(xì)胞株NCI—H1650／GR的EMT?????
8、??314．1E。cadherin蛋白表達(dá)?????????????314．2vimentin蛋白表達(dá)??????????
