黑麥染色體特異分子標(biāo)記開發(fā)

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1、萬方數(shù)據(jù)SichuanAgricultureUniversityPh．M．DissertationRyechromosomespecificmolecularmarkerdevelopmentByZhangHuai—liangDirectedbyProf．Tang-ZongxiangGenetics(Molecularcytogeneticsofwheat)Chengdu611100，Sichuan2014，6萬方數(shù)據(jù)論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知，除了

2、文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，學(xué)位論文中不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生虢強怖k加tit．-年易月億日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同

3、媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名：張撅釓銣簽名凈杯硼>F-'Z日了∽加／月f6多年昝形面彩萬方數(shù)據(jù)摘要小麥?zhǔn)鞘澜缱钪匾募Z食作物之一。黑麥?zhǔn)切←湼牧贾惺种匾慕壩锓N之一，黑麥中攜帶著很多有益的目的基因，將黑麥所攜帶的許多優(yōu)良基因?qū)胄←準(zhǔn)翘岣咝←溸z傳基礎(chǔ)十分有效的途徑。在利用黑麥改良小麥的過程中，對于導(dǎo)入小麥中的黑麥染色質(zhì)進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的鑒定是必需的。本研究對小麥品種綿陽1l與黑麥Kustro的雜交后代進(jìn)行了分子細(xì)胞學(xué)鑒定，利用已報道的小麥微衛(wèi)星引物、小麥miniatureinverted—rep

4、eattransposableelements(Mites)引物以及本實驗室設(shè)計的小麥Mite序列引物，對小麥一黑麥單體附加系進(jìn)行PCR擴增，以開發(fā)黑麥特異和黑麥染色體特異分子標(biāo)記。研究結(jié)果如下：(1)篩選出了一套新的小麥一黑麥單體附加系(1R-7R)、部分二體附加系和端體附加系。(2)根據(jù)在NCBI(美國國立生物信息技術(shù)中心)公布的小麥MITE序列，設(shè)計了50對PCRiJI物。(3)經(jīng)過擴增鑒定，篩選出黑麥特異引物：Oleu—FN30、Oleu—AY44、Thal—AK63、Eos—AY494、Eos—AY81、Tha

5、l—EU0l、FN564427—3、FN564436—5和mite3101—23．1，Xgwml53、Xgwm232、Xgwm260和Xgwm304。(4)發(fā)現(xiàn)黑麥染色體特異性標(biāo)記：Thal—EU82、FN564427—15和mite310]一34．1。其中ThaI-EU82為3R特異性標(biāo)記，F(xiàn)N564427—15、mite3101—34．1為4R特異性標(biāo)記。(5)擴增產(chǎn)物有變異的標(biāo)記有：Eos-564、Pan-D0871、DQ537335—7、mite2226—1。(6)將引物Oleu-FN30從黑麥Kustro中擴出

6、的特異條帶回收克隆并測序，在NCBI中經(jīng)blast比對，發(fā)現(xiàn)該序列的55bp一750bp與命名為AF245032。1的序列當(dāng)中1545bp一2219bp相似度達(dá)90％，而序歹UAF245032．1是一段逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子序列，這也就證明我們的測序序列為逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的一部分。研究結(jié)果為黑麥3R，4R染色體特異的鑒定提供了新的標(biāo)記。關(guān)鍵詞：小麥；黑麥；外源遺傳物質(zhì)檢測；分子標(biāo)記；?TE引物。l萬方數(shù)據(jù)abstractComparedwithothercrops，wheatisalmostthemostimportantcropon

7、theplanet．Thereisalargeamountofgeneticvariationintherelatedspeciesofwheat，whichcanbeusedtoenrichthewheatgenepoolandmakeitsgeneticresourcesdiversification．Amongsuchrelatives，ryeisoneofthemostimportantrelatedspeciesofwheat，whichownsusefulgeneticresourceandCanbeused

8、toimprovethequalityofwheat，forexample，diseaseresistanceandagronomictraits．Despiteitisclearintheorythattotransferthebettergenesintheryeintothewheatisoneeffectiv