參歸仁合劑對產(chǎn)后抑郁模型大鼠ERα、ERβ、RSK1影響的研究.pdf

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1、ChengduUniversityofTradionalChineseMedicine(臨床醫(yī)學(xué)院)二〇一八屆碩士研究生學(xué)位論文參歸仁合劑對產(chǎn)后抑郁模型大鼠ERα、ERβ、RSK1影響的研究EffectofShenguiRenmixtureonexpressionofERα,ERβandRSK1inPostpartumDepressionModelRats研究生姓名:李春雨指導(dǎo)老師:謝萍教授學(xué)科專業(yè):中醫(yī)婦科學(xué)二〇一八年五月學(xué)位論文參歸仁合劑對產(chǎn)后抑郁模型大鼠ERα、ERβ、RSK1影響的研究EffectofShenguiRenmixt

2、ureonexpressionofERα,ERβandRSK1inPostpartumDepressionModelRats李春雨指導(dǎo)教師姓名:謝萍教授申請學(xué)位級別:碩士專業(yè)名稱:中醫(yī)婦科學(xué)論文提交時間:2018年5月論文答辯時間:2018年5月成都中醫(yī)藥大學(xué)二〇一八屆碩士研究生學(xué)位論文中文摘要目的:本研究以產(chǎn)后抑郁(postpartumdepression,PPD)模型大鼠為對象,采用具有補(bǔ)虛化瘀作用的參歸仁合劑進(jìn)行干預(yù)。通過觀察PPD模型大鼠行為學(xué),血清雌二醇(E2)水平,以及檢測下丘腦雌激素受體(ERα、ERβ)mRNA,下丘腦、

3、海馬、額葉p90核糖體S6激酶(RSK1)蛋白的表達(dá),探討ERα、ERβ、RSK1與PPD的相關(guān)性,進(jìn)而闡釋參歸仁合劑治療PPD的作用機(jī)理。方法:1.將SD大鼠進(jìn)行曠場實(shí)驗(yàn)(Openfieldtest,OFT)篩選合格動物,隨機(jī)分為2組:對照組(Ctl組)和模型組(PPD組)。其中Ctl組不予任何處理,PPD組經(jīng)卵巢切除手術(shù)(OVX)后連續(xù)激素注射模擬大鼠“妊娠”,23d后突然撤退激素制備PPD模型大鼠。2.造模后,Ctl組和PPD組皆進(jìn)行糖水偏好測試(SPT)、OFT和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(FST),進(jìn)行模型評價。并根據(jù)OFT總得分將PPD組

4、隨機(jī)分為6組:模型組(Mdl組)、參歸仁合劑高劑量組(S-H組)、參歸仁合劑中劑量組(S-M組)、參歸仁合劑低劑量組(S-L組)、苯甲酸雌二醇組(EB組)、鹽酸舍曲林組(Ser組)。3.藥物干預(yù)4周,并在給藥2周后與給藥4周后再次進(jìn)行行為學(xué)測試:SPT、OFT和FST。4.藥物干預(yù)4周的動物行為學(xué)測試結(jié)束后,檢測相關(guān)指標(biāo):①采用放射免疫法檢測血清E2;②采用實(shí)時熒光定量PCR法(QuantitativeReal-TimePCR,RT-RCR)檢測下丘腦ERα、ERβmRNA的表達(dá),計算ERα/ERβmRNA比值;③采用蛋白印跡法(Wes

5、ternblotting,WB)測定下丘腦、海馬、額葉中RSK1蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1成都中醫(yī)藥大學(xué)二〇一八屆碩士研究生學(xué)位論文1.造模后行為學(xué)觀察:與Ctl組相比,PPD組蔗糖水消耗量明顯減少(P<0.01),OFT水平得分和垂直得分均明顯減少(P<0.01),F(xiàn)ST不動時間明顯增多(P<0.01)。2.藥物干預(yù)后行為學(xué)觀察:2w時點(diǎn)和4w時點(diǎn),Mdl組蔗糖水消耗量、OFT水平得分較Ctl組明顯降低(P<0.01);FST不動時間較Ctl組明顯升高(P<0.01)。S-H組、S-M組、S-L組、EB組蔗糖水消耗量、OFT水平得分均較Md

6、l組明顯增加(P<0.01,P<0.05);S-M組、S-L組、Ser組、EB組的FST不動時間均減少(P<0.01,P<0.05)。3.血清E2結(jié)果:與Mdl組相比,S-L組血清E2水平升高(P<0.05);S-M組、EB組血清E2水平明顯升高(P<0.01)。Mdl組較Ctl組血清E2水平雖降低,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。4.ER表達(dá)變化:Mdl組大鼠下丘腦ERα、ERβmRNA表達(dá)較Ctl組均明顯下調(diào)(P<0.05)。與Mdl組相比,EB組大鼠下丘腦ERαmRNA表達(dá)上調(diào)(P<0.05);其余藥物干預(yù)組大鼠下丘腦ERαm

7、RNA表達(dá)較Mdl組上調(diào),但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。S-M組、EB組大鼠下丘腦ERβmRNA表達(dá)明顯上調(diào)(P<0.05,P<0.01)。5.ERα/ERβ比值結(jié)果:Mdl組大鼠下丘腦ERα/ERβmRNA比值較Ctl組上調(diào)(P<0.05)。與Mdl組相比,除EB組外,各處理組大鼠下丘腦ERα/ERβmRNA比值下調(diào)(P<0.05,P<0.01)。6.RSK1表達(dá)結(jié)果:Mdl組下丘腦、海馬、額葉RSK1蛋白表達(dá)較Ctl組明顯下調(diào)(P<0.05,P<0.01)。與Mdl組相比,各處理組下丘腦、海馬RSK1蛋白表達(dá)均有不同程度上調(diào)(

8、P<0.05,P<0.01);額葉中除S-M組,各處理組RSK1蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.01)。結(jié)論:1.對大鼠進(jìn)行HSP后激素撤退并進(jìn)行行為學(xué)測試,PPD大鼠表現(xiàn)出明顯的抑郁狀態(tài),PPD模型大鼠復(fù)制成功。2

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