鵝oaz基因克隆、表達(dá)及其在卵泡顆粒細(xì)胞中的作用研究

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1、分類號(hào)；Ｓ８３５．乂學(xué)號(hào)：Ｓ２０１２３１０９、－ｙ、四川農(nóng)化大學(xué)ｔ碩±學(xué)位論義＾觀（ＭＺ基因克隆、表達(dá)及其在卵泡顆粒細(xì)胞中的作用研究．Ｖ．—＿何巧＇＇－＇ｎ，■？－：指導(dǎo)教師康波劃教授學(xué)科專業(yè)動(dòng)物遺傳育種與巧殖．．．ｙ。；■．、－？氣、？心、、研巧方向分子遺傳與氷舍育種Ａ，Ｖ＇－＾ｆ’乂巧？．、？—＇＼，心咕—．？識(shí)、：‘＇．ｖ＇主１？ｔ？－：２０１５年０６月．

2、Ｉ－＇？Ｖ、－？—４心‘＂ＳｉｃｈｕａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇＭｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｅｘｒｅｓｓｉｏｎｐｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆａｎｄｉｔｓｆｕｎｃｔｉｏｎｓｉｎｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｇｒａｎｕｌｏｓｅｃｅｌｌｓｏｆＳｉｃｈｕａｎｗｈｉｔｅｏｏｓｅｇｔＢＨｕｉＨｅｙＡｎｉｍａｌＧｅｎｅｔｉｃｓ，ＢｒｅｅｄｉｎｇａｎｄＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉ

3、ｏｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＷａｔｅｒｆｏｗｌＢｒｅｅｄｉｎｇ’ＹａａｎＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅＣｈｉｎａ，，Ｊｕｎｅ，２０１５論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研巧王作所取得的成果。盡我所知，除了文中特別加Ｗ標(biāo)注和致謝的地方外，學(xué)位論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研巧成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)所使用過(guò)的材料一。與我同工作的同志對(duì)本研巧所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝

4、意。研巧生簽名；＞狂年＜月片日關(guān)于論文使用授奴的聲明、；本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閩，可Ｗ采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學(xué)可Ｗ用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。□本論文不保密。□本論文保密，在解密后適用本授權(quán)。＿＿年＂＂（請(qǐng)?jiān)冢咨稀鮾?nèi)劃Ｖ）巧巧旺研究生簽名：；＾年＾月（互曰広《導(dǎo)師簽名：戶年月侶日摘要鳥(niǎo)氨酸脫簇酶抗酶

5、（ｏｒｎｉｔｈｉｎｅｄｅｃａｒｂｏｘｌａｓｅａｎｔｉｚｍｅｓＯＡＺｓ）是多胺代謝過(guò)程ｙｙ，中的關(guān)鍵調(diào)控酶，能抑制多胺的生成，維持多胺的穩(wěn)態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)多胺合成受到抑制時(shí)小鼠卵巢出現(xiàn)萎縮，卵泡生長(zhǎng)停滯甚至閉鎖。０４封在產(chǎn)蛋期巧黯卵巢組織中，提示可能通過(guò)調(diào)控卵巢組織中多胺濃度的表達(dá)量顯著高于產(chǎn)蛋前期，進(jìn)而參與調(diào)控好魏的繁殖。然而，關(guān)于ＯＡＺｓ在卵泡發(fā)育過(guò)程中的作用研究還未見(jiàn)報(bào)道，其機(jī)制尚不清楚（Ｚｉ４Ｚ２，。因此，本研究克隆了化和（Ｘ的全長(zhǎng)編碼區(qū)序列定量檢測(cè)了０４ＺＪ和在四川白蠟組織及不同等級(jí)卵泡組織中的表達(dá)

6、量，并通過(guò)定點(diǎn)突變技術(shù)缺失了基因的＋１移碼位點(diǎn)Ｔ堿基，構(gòu)建突變型６１４Ｚ７基因的表達(dá)載體ｐＥ?。校危颍颍恚簦幔簦椋铮钪猎囵B(yǎng)的四川白蠟顆粒細(xì)胞中ｌＯＡＺｌ，轉(zhuǎn)染，研究過(guò)表達(dá)０４Ｚ／對(duì)鷄卵泡顆粒細(xì)胞的影響。（ＺＪ（Ｚ２６５２結(jié)果表明：四川白籍化和化的全長(zhǎng)編碼區(qū)長(zhǎng)度分別為ｂｐ和５７４ｂｐ，其＋１移碼位點(diǎn)分別位于第１７５位和第９７位Ｔ堿基。和（０４Ｚ２基因的表達(dá)具有姐織特異性，（ＭＺｉ和（２４。在下丘腦、垂體和卵巢中的表達(dá)趨勢(shì)相同，都在垂體，在卵巢中的表達(dá)量最低中的表達(dá)量最高，除胸肌和腿肌外其余各組

7、織中表４幻Ｆ５１達(dá)均占優(yōu)勢(shì)。卵泡組織中，０表達(dá)量在級(jí)卵泡中表達(dá)量最低，在Ｆ和ＰＯＦ＾＜卵泡中表達(dá)量最高（ｉ０．０５），在等級(jí)前卵泡和等級(jí)卵泡中的表達(dá)量均呈遞增趨勢(shì)。０４Ｚ２在ＳＷＦ和Ｆ２級(jí)卵泡中的表達(dá)量顯著嵩于卵巢基質(zhì)，其余各組織中忍＞Ｐ－－的表達(dá)量均無(wú)顯著差異（巧０．０５）。將轉(zhuǎn)染ｐＥＧＦ／ＮｌＯＡＺｌｍ山ａｔｉｏｎ至鶴卵泡顆粒細(xì)胞４８ｈ后，０４Ｚ；表達(dá)量顯著升高，是對(duì)照組（轉(zhuǎn)染陽(yáng)ＧＦＰ／Ｎ１組）的２．６０倍（ｆＯ．Ｏｌ）。隨著（２４２／基因表達(dá)量的上調(diào)，多胺代謝基因＾＾說(shuō)、仿＾口、０ＯＣ、及５７１似的

8、表達(dá)量顯著升高（Ｐ＜０．０５），分別是對(duì)照組的１．６２倍、１．４７－倍、１８．５１．６０Ｘ、２、．％倍、１．５倍、１０倍和倍細(xì)胞增殖、調(diào)亡關(guān)鍵調(diào)控基因公Ｏ化／；－＜Ｃ／扣公７和的表達(dá)量顯著升高（Ｐ０．０５）１．Ｑ