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《豬繁殖與呼吸綜合征病毒不同毒株rt-pcr鑒別檢測方法的建立及初步應用》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號:S858.28單位代碼:10193密級:公開學號:20130692專業(yè)碩士學位論文豬繁殖與呼吸綜合征病毒不同毒株RT-PCR鑒別檢測方法的建立及初步應用EstablishmentandPremaryApplicationofRT-PCRforDistinguishingDifferentStrainsofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirus作者姓名:楊洺揚學位類別:獸醫(yī)碩士專業(yè)名稱:獸醫(yī)學研究方向:動物傳染病防治指導教師:胡桂學教授所在學院:動物科學技術(shù)學院2015年06月
2、獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學位論文是本人在導師指導下,獨立進行研究所取得的成果。盡我所知,除文中特別加以標注和致謝所列內(nèi)容外,論文中不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得吉林農(nóng)業(yè)大學或其它教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。本學位論文所有內(nèi)容若有不實之處,本人愿意承擔一切相關(guān)法律責任和后果。學位論文作者簽名:簽字日期:年月日關(guān)于學位論文使用授權(quán)的聲明1、本人完全了解吉林農(nóng)業(yè)大學有關(guān)保留和使用學位論文的規(guī)定,即:研究生在校攻讀學位
3、期間所完成的論文及相關(guān)成果的知識產(chǎn)權(quán)屬吉林農(nóng)業(yè)大學所有,并同意將本論文的版權(quán)授權(quán)給吉林農(nóng)業(yè)大學,學校有權(quán)保留送交論文的復印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。2、本人(同意/不同意,務必打印后填寫)吉林農(nóng)業(yè)大學將本論文版權(quán)授權(quán)給不同媒體進行電子出版、多媒體出版、網(wǎng)絡出版以及其他形式出版(涉密學位論文解密后應遵守此協(xié)議)。3、本人聲明畢業(yè)后若發(fā)表在攻讀研究生學位期間完成的論文及相關(guān)的學術(shù)成果,必須以吉林農(nóng)業(yè)大學作為第一署名單位。學位論文作者簽名:簽字日期:年月日指導教師簽名:簽字日期:年月
4、日摘要豬繁殖與呼吸綜合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的豬的急性或亞急性高度接觸性傳染病,主要侵害妊娠母豬和未斷奶仔豬,具有傳播速度快、死亡率高的特點,嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。PRRSV基因易發(fā)生變異,產(chǎn)生多種不同變異毒株,給疾病的防控帶來很大困難。2006年爆發(fā)的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征給我國養(yǎng)豬業(yè)造成巨大打擊。目前國內(nèi)流行的毒株均為美洲型,主要為經(jīng)典型毒株和毒力較強的高致病性毒株。由于PRRSV不同毒株感染動物后的臨床表
5、現(xiàn)、危害程度及其疫苗交叉保護力不盡相同,及時準確鑒定出當前流行毒株對防治豬繁殖與呼吸綜合征具有積極意義。豬繁殖與呼吸綜合征經(jīng)典毒株、高致病性毒株、基因缺失弱毒疫苗株(TJM-F92)的Nsp2基因存在部分差異。高致病性毒株和基因缺失疫苗株分別存在90個和450個不連續(xù)核苷酸缺失。本研究在其缺失位點兩端設計引物,根據(jù)擴增目的片段大小不同區(qū)分三種不同毒株,建立RT-PCR鑒別檢測方法。通過實驗證明,該方法具有較好的敏感性、特異性和重復性,對三種毒株的擴增產(chǎn)物大小分別為1332bp、1242bp和882bp。使用此RT-PCR檢測方法檢測吉林
6、、黑龍江等地區(qū)68份臨床疑似豬繁殖與呼吸綜合征病料,發(fā)現(xiàn)經(jīng)典毒株檢出率為13.23%,高致病性毒株檢出率為20.58%,基因缺失疫苗TJM-F92株檢出率為8.82%。本研究建立了PRRSV不同毒株RT-PCR鑒別檢測方法,能夠檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒并鑒別其毒株類型,從而區(qū)分疫苗免疫豬和野毒感染豬,以及患病豬所感染的毒株種類,為有效預防PRRS、評價疫苗免疫效果以及凈化該疫病奠定一定基礎。關(guān)鍵詞:豬繁殖與呼吸綜合征病毒,鑒別,RT-PCR,應用IAbstractPorcinereproductiveandrespiratorysyn
7、drome(PRRS)isanacuteorsub-acuteandhighlycontagiousdiseasecausedbyporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus(PRRSV).PRRSsignificantlyaffectspregnantsowsandbreedingpigs.Sincethevirusspreadsreadilywithhighmortality,PRRSbecomesthemostimportantswinedisease.Avarietyofstrai
8、nsresultingfromPRRSvirusvariationremainacontinuouschallengetocontrolofthedisease.Theoutbreakofhighlypat