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《盅口屬和冠環(huán)屬線蟲的分類及親緣關(guān)系分析》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、單位代碼10476學(xué)號1204180356分類號Q959.17碩士學(xué)位論文盅口屬和冠環(huán)屬線蟲的分類及親緣關(guān)系分析學(xué)科、專業(yè):生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向:分子生物學(xué)申請學(xué)位類別:理學(xué)碩士申請人:王美心指導(dǎo)教師:卜艷珍副教授二〇一五年五月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,也不包含為獲得河南師范大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。與我一同工作的
2、同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。作者簽名:I%i
3、ALYSISOFCYATHOSTOMUMANDCORONOCYCLUSADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByWangMeixinSupervisor:Prof.BuYanzhenDateMay,20152摘要感染馬屬動(dòng)物的寄生線蟲不僅數(shù)量巨大,而且種類繁多。尤其是圓線亞科(Str
4、ongylinae)與盅口亞科(Cyathostominae)圓線蟲嚴(yán)重危害馬屬動(dòng)物的健康,給畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)帶來困擾和損失。雖然驅(qū)蟲藥能夠防治圓線蟲病,但這種手段已經(jīng)導(dǎo)致盅口亞科線蟲產(chǎn)生抗藥性,使患病率增加,改變了宿主體內(nèi)的寄生蟲種群結(jié)構(gòu)。所以,提出新型的綜合性控制方法顯得尤為重要。然而,關(guān)于馬屬動(dòng)物寄生線蟲的基礎(chǔ)生物學(xué)和系統(tǒng)發(fā)育學(xué)方面的知識十分有限,主要是因?yàn)橐罁?jù)形態(tài)學(xué)鑒定種類和診斷有一定的局限性。本研究采用經(jīng)典分類與分子分類相結(jié)合的方法對盅口亞科盅口屬(Cyathostomum)和冠環(huán)屬(Coro
5、nocyclus)線蟲的分類和系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系進(jìn)行分析,首次描述了3種冠環(huán)屬線蟲的掃描電鏡結(jié)構(gòu),然后測定和分析兩個(gè)屬的ITS序列和部分cox1(pcox1)序列,并探討和分析了他們的親緣關(guān)系和分類地位。通過對采自河南省驢腸道的3種冠環(huán)屬線蟲:冠狀冠環(huán)線蟲(Coronocycluscoronatus)、大唇片冠環(huán)線蟲(C.labiatus)、小唇片冠環(huán)線蟲(C.labratus)進(jìn)行掃描電鏡的觀察,結(jié)果表明3種冠環(huán)線蟲的體表形態(tài)特征差異明顯,主要表現(xiàn)在外葉冠數(shù)目、亞中乳突起始部位、雄蟲生殖錐背唇上附屬物、雌
6、蟲尾部等方面。研究結(jié)果與之前學(xué)者們在光鏡下觀察的結(jié)果基本一致,相比之下,掃描電鏡觀察到的外部形態(tài)更清楚、更準(zhǔn)確,提供了更多更具體的結(jié)構(gòu)特征。本研究將冠環(huán)屬線蟲與盅口屬的掃描電鏡結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行了比較,為兩個(gè)屬的分類提供更詳細(xì)的形態(tài)學(xué)資料。運(yùn)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)對3種盅口屬線蟲:四刺盅口線蟲(Cyathostomumtetracanthum)、蝶狀盅口線蟲(C.pateratum)、碗形盅口線蟲(C.catinatum)和3種冠環(huán)屬線蟲的rDNA-ITS序列進(jìn)行測定和比對分析。結(jié)果顯示:ITS(包
7、括5.8S)序列長748-843bp,其中冠狀冠環(huán)線蟲的ITS2序列比其它種缺失約90bp,6個(gè)種的5.8S序列完全一致。ITS1+ITS2總變異位點(diǎn)154個(gè)(包括gap),簡約信息位點(diǎn)64個(gè)。ITS1和ITS2的G+C含量分別為47.0%-48.6%和37.7%-41.1%。ITS2序列的差異性(0-31.9%)大于ITS1序列(0-4.9%),ITS1和ITS2序列種間差異(1.1%-4.9%,1.2%-31.9%)明顯大于種內(nèi)差異(0-1.9%,0-0.9%)。而且,四刺盅口線蟲與蝶狀盅口線蟲和
8、碗形盅口線蟲的差異性,大于四刺盅口線蟲與3種冠環(huán)線蟲之間的差異性。研究獲得的盅口屬和冠環(huán)屬I線蟲的部分cox1序列均為393bp,無插入和缺失,A+T含量(65.9%-68.9%)明顯高于G+C含量(31.1%-34.1%),顯示出AT堿基偏倚性。通過比對pcox1序列發(fā)現(xiàn),種間差異(6.6%-15.8%)大于種內(nèi)差異(0.5%-2.5%)。以長傘杯冠線蟲(Cylicostephanuslongiburs)為外群,基于ITS1+ITS2序列和pcox1序