犬副流感病毒分子克隆的構(gòu)建及微型基因組建模

犬副流感病毒分子克隆的構(gòu)建及微型基因組建模

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1、賺論文編號:中囯農(nóng)業(yè)科學院*:T./.學位論文犬副流感病毒分子克隆的構(gòu)建及微型基因組建橘ConstructionofMolecularCloneandtheMinigenomeofCanineParainfluenzaVirus碩士研宄生:齊賓賓指導(dǎo)教師:劉明研宄員申請學位類別:農(nóng)學碩士-'專4k:wmm研宄方;::向:培單位:哈爾濱啓醫(yī)研宄所研究生院201S年S月?W密級:論文編號:中國農(nóng)業(yè)科學院學位論文犬副流感病毒分子克隆的構(gòu)建及微型基因組建模ConstructionofMolecularCloneandtheMi

2、nigenomeofCanineParainfluenzaVirus碩士研究生:齊賓賓指導(dǎo)教師:劉明研究員申請學位類別:農(nóng)學碩士專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學研究方向:動物疫苗及分子免疫學培養(yǎng)單位:哈爾濱獸醫(yī)研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationConstructionofMolecularCloneandtheMinigenomeofCanineParainfluenzaVirusM.S.Candidate:QiBinbin

3、Supervisor:Prof.LiuMingMajor:PreventiveVeterinaryMedicineSpecialty:AnimalVaccineandMolecularImmunologyMay2015獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)麫指導(dǎo)y進行的研宄工怍及*鬌的齋充ii果.盡我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外?論文中不包含其飽人己經(jīng)研宂成果.£不&含為P3I中W衣艙科學院或其它教育機構(gòu)的學位或證書而使用鐵的材料?與我—同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示

4、了謝研究屮答名:時間:yii^HT^2.^關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學院有關(guān)保留、使弔學位論文的規(guī)定,即:中國農(nóng)業(yè)科學院有權(quán)保留送交論文的t印件和磁盤?允作論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)剌乎段保存、,匯編學位論文:卜1..5屮M農(nóng)業(yè)科學院可以用不間方式在不間

5、媒體m摶播嗲位論文的個部或部分內(nèi)研究生簽名:吋間:年s■月2客日11-]!'"]:?0/y-中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文評閱人、答辯委員會簽名表論文SR犬副流惑病緝計f-克降的構(gòu)違及微型1因組迂模1

6、論義作者齊賓賓預(yù)防⑴研究^向!動

7、物疫苘與分f免疫學^1!!下1指導(dǎo)教師劉明

8、培養(yǎng)中位(研宂所、屮心)哈爾濱粋醫(yī)研究所

9、姓名職稱碩(博)單位,t?業(yè)筏名碩導(dǎo)口pnf博猙□碩導(dǎo)口fiif符辯1席W導(dǎo)口?硬導(dǎo)口nn樂北農(nóng)業(yè)人學項防挎醫(yī)學博導(dǎo)E碩#□丨師缶//教授東北農(nóng)業(yè)九7顱防涔聯(lián)學博tE碩淥□A教授?北林收人學M防辮閣學(mm碩導(dǎo)口辯

10、劉_:研究員鈐憲研究所憤防阼K學’1碩導(dǎo)口香mm研究Q哈爾濱涔入研究所__.............Mr—碩導(dǎo)□員卜東農(nóng)研究員哈爾浪涔矢研究所購,學飛碩導(dǎo)□丨曲絲研究員哈爾濱研究所預(yù)防善1M學?導(dǎo)£1pfi^會i義(秘H)

11、絲存論文答辯時N地辦2015年S)]28丨丨哈爾濱搿醫(yī)研究所主樓317室摘要犬副流感病毒(canineparainfluenzavirus,CPIV)是引起犬的自限性氣管支氣管炎,犬窩咳的主要病因。臨床上,CPIV單獨感染不引起致死性疾病,只表現(xiàn)為溫和的呼吸道癥狀,而這種情況并不常見;常見的是CPIV與其他病原的混合感染,使病情加劇,大幅度提高死亡率。自1967年首次分離得到該病毒以來,世界各地陸續(xù)有相關(guān)報道,目前該病毒感染范圍已波及全世界,在我國亦出現(xiàn)了普遍流行趨勢。在各類病毒疫苗的開發(fā)研究中,最為重大的科學進展是反

12、向遺傳技術(shù)。目前,CPIV的基因工程疫苗尚未見報道,但對人副流感病毒(humanparainfluenzavirus,HPIV)和牛副流感病毒3型(Bovineparainfluenzavirustype3,BPIV3)已有較多的研究。隨著負鏈RNA病毒反向遺傳學技術(shù)的日趨成熟,副流感病毒(parainfluenzavirus,PIV)作為活病毒表達載體方面有廣闊的應(yīng)用前景,HPIV和BPIV3的現(xiàn)有研究成果對CPIV的研究有借鑒意義。本實驗室以構(gòu)建CPIV的感染性分子克隆為目的。根據(jù)GenBank(KC237064.

13、1)中PIV51168-1毒株序列設(shè)計引物,應(yīng)用RT-PCR法對購自ATCC的CPIVHRB-V病毒株分段擴增,克隆到pHW2000載體中并進行測序,經(jīng)序列拼接獲得全基因組序列。與GenBank登錄的PIV代表毒株進行對比分析。基因序列分析表明,HRB-V株基因組全長15246nt,含5'-末端、3'-末端和7個ORF,具有PIV

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