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《鴨甲肝病毒1和3型一步法雙重rt-pcr檢測方法的建立及應用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
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2、－．、’－，？＇、■’Ｌ、、＇：＊、巧＇？‘．安、．：．．今指導教師汪銘書教授＊々Ｗ．．程安春教授一ｖ’、＇ｙ？Ａ?。?，ｆ、學科專業(yè)預防獸醫(yī)學：＇＇、乂廣、、＞’’‘－研巧方向含病學？八分‘．．ｆ．？－，．？，，、？‘．‘．７＊；，＼、二４．？＇：；．考．々－Ｘ、．＞，－義，、飛－＾：＼／心■．，＼－■－，．、ｒ．．、４，、＼
3、、■＇—打ＶＡ＼？Ｖ．一ｉ＊、－？ｆ？＇■＊＇‘，．一ｔＩ＊、聽一＂２０１５年５月：＇＇：．？．、＇■、ｒ－．＇．，、＇Ｖ．、ｒ．＇－、呆、Ｖ？；４ｔ？，—－、、、－＞Ｖ、論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知，除了文中特別加Ｗ標注和致謝的地方外，學位論文中不包含其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學或其
4、它教育機構(gòu)的學位或證書所使用過的材料一。與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。＇研究生簽名：心合年＾月／巧關(guān)于論文使用授巧的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，目Ｐ：學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部口或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可レッ采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學可Ｗ用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內(nèi)容。Ｉ／本論文不保密。□本論文俱密，在年解密后適用本Ｉ＿
5、＿授權(quán)。＂＂（請在上□內(nèi)劃Ｖ）研巧；生簽名：廣年月／Ｔ曰Ｊ導師簽名：Ｉｔ而ｔｅ（巧６月（ｒ日ｃＰｏ四川農(nóng)業(yè)大學碩±學位論文中文摘要一鴨病毒性肝炎（ＤＶＨ）是錐鴨的種急性傳染性病，主要侵害４周齡Ｗ內(nèi)的維鴨。該病由至少Ｈ種不同的病原引起，包括鴨甲肝病毒（ＤＨＡＶ）、１型鴨星狀病毒－－２（ＤａｓｔＶ１）和２型鴨星狀病毒（ＤａｓｔＶ）。分布范圍最廣的ＤＨＡＶ屬于小ＲＮＡ病毒－科禽肝病毒屬?；谥泻驮囼灪拖到y(tǒng)發(fā)育分析，ＤＨＡＶ已被分為Ｈ種基因型（ＤＨＡＶ１、－－－－２和ＤＨＡＶ３）ＤＨＡＶＤＨＡＶ。其中
6、，１分布范圍最廣泛，ＤＨＡＶ２僅在臺灣發(fā)現(xiàn)報道，ＨＡＶ－３已Ｖ－而近幾年Ｄ經(jīng)給我國大陸地區(qū)和韓國的養(yǎng)鴨業(yè)造成嚴重危害。ＤＨＡ１與－－－ＤＨＡＶ３之間交叉保護作用不明顯ＤＨＡＶ２之間無交叉中和反應，ＤＨＡＶ１和。通過對錐鴨的臨床癥狀和剖檢病變可１＾＾刀步對ＤＶＨ進行診斷，但是該方法不能夠區(qū)分－－ＤＨＡＶ３ＤＨＡＶ１和。目前血清學診斷技術(shù)和分子生物學診斷技術(shù)已經(jīng)用ＤＨＡＶ的檢測和診斷，血清學診斷技術(shù)主要包括中和試驗、間接血凝試驗、瓊脂擴散試驗和免疫巧光抗體技術(shù)等，但是由于其繁瑣耗時和成本高，不能用于快速診斷。分子生物學
7、診－－ＰＣＲ和ＲＴＬＡＭＰ方法等斷技術(shù)包括ＲＴ，能夠快速特異地對ＤＨＡＶ分離株和臨床樣一一ＡＶ－ＡＶ－品進行診斷，因此建立種能夠快速鑒別診斷ＤＨ１和ＤＨ３的步法雙重ＲＴ－ＰＣＲ方法對ＤＶＨ的防治我國有積極的作用。一ＲＴ－－－１．建立步法雙重ＰＣＲ方法用于檢測ＤＨＡＶ１和ＤＨＡＶ３－－ＤＨＡＶ－ｅｎ為了能夠快速鑒別診斷１和ＤＨＡＶ３，本研究根據(jù)ＧＢａｎｋ中ＤＨＡＶ１－－ＡＶ３ＡＶ－ＡＶ２和ＤＨ的全基因組序列，在ＤＨ１和ＤＨ３的基因保守區(qū)域分別設計了一－－Ｖ－對特異性引物ＰＣＲ方法鑒別診斷ＤＨＡＶ１３。，并成
8、功建立步法雙重ＲＴ和ＤＨＡ一－－－ＰＣ民方法能夠分別針對ＤＨＡＶＤＨＡＶ３９９２ｂ該步法雙重ＲＴ１和特異性地擴增出ｐ和１５３３ｂｐ的目的片段，而對健康維鴨肝臟組織、番鴨細小病毒、鴨癌病毒、
