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1、分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：406520412361南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文EGFR在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及RNAi靶向作用的研究EGFRexpressioninovarianepithelialtumorsandRNAitargetedactionresearch孫俊青培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：于曉紅主任醫(yī)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué)論文答辯日期：2015年答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：2015年5月30日學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明一、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)
2、下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：簽字日期：年月日二、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可
3、以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)北京萬(wàn)方數(shù)據(jù)股份有限公司和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》中全文發(fā)表，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)，同意按“章程”規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：導(dǎo)師簽名（手寫）：簽字日期：年月日簽字日期：年月日論文題目論文博士□碩士姓名學(xué)號(hào)級(jí)別□院/系/所專業(yè)E_mail備注：□公開□保密（向校學(xué)位辦申請(qǐng)獲批準(zhǔn)為“保密”，年月后公開）I摘要摘要目的：1.研究表皮生長(zhǎng)因子受體（Epidermalgrowth
4、factorreceptor，EGFR)在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)。2.探討RNA干擾EGFR基因的表達(dá)情況及對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖情況的影響。方法：1.選擇卵巢良性腫瘤20例（良性組），卵巢交界性腫瘤40例（交界組），卵巢上皮性癌40例（惡性組）。使用免疫組化檢測(cè)EGFR蛋白的表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析各組EGFR基因的表達(dá)。2.構(gòu)建靶向EGFR基因干擾siRNA表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染入SKOV3細(xì)胞中。實(shí)驗(yàn)分為三組：對(duì)照組，空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組，特異性轉(zhuǎn)染組。RT-PCR檢測(cè)EGFR的基因表達(dá)情況。MTT法分析細(xì)胞的增殖情況。平板集落實(shí)驗(yàn)計(jì)算抑制率。結(jié)果：1.卵巢良性腫
5、瘤，卵巢交界性腫瘤，卵巢上皮性癌中EGFR陽(yáng)性表達(dá)率分別為20.0％，47.5％，85.0％，惡性組陽(yáng)性表達(dá)率要高過(guò)另外兩組（P<0.05），良性組與交界組對(duì)比不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。EGFR的陽(yáng)性表達(dá)率與臨床分期，病理分級(jí)及腫瘤的大小有關(guān)（P<0.05），與患者的年齡無(wú)關(guān)（P>0.05）。2.成功構(gòu)建靶向EGFR基因干擾siRNA表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞，RT-PCR分析表明特異性轉(zhuǎn)染組和空白質(zhì)粒組的細(xì)胞EGFRmRNA表達(dá)明顯受到抑制。將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的不同組的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，繪制MTT細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，發(fā)現(xiàn)不同組細(xì)胞增殖情況存在差異，特異
6、性轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞生長(zhǎng)明顯低于空白質(zhì)粒組和對(duì)照組，細(xì)胞抑制率為61.8%。平板集落實(shí)驗(yàn)中，特異轉(zhuǎn)染組中細(xì)胞集落形成抑制率為59.9％。結(jié)論：1.EGFR蛋白在卵巢交界性腫瘤和卵巢上皮性癌都有表達(dá)，表達(dá)逐步升高。提示EGFR基因可能是卵巢上皮性腫瘤形成發(fā)展的重要影響因素。2.靶向EGFR的基因的RNA干擾能降低SKOV3細(xì)胞EGFR的表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，降低細(xì)胞的增殖。所以將靶向EGFRRNA干擾技術(shù)用于卵巢上皮性腫瘤的靶基因治療研究具有一定的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)·。關(guān)鍵詞：EGFR；卵巢上皮性腫瘤；RNA干擾；基因突變；SKOV3細(xì)胞株IIAbstractABS
7、TRACTObjective:1.TheEpidermalgrowthfactorreceptor(Epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)expressioninovarianepithelialtumors.2.ExploretheexpressionofEGFRgeneandRNAinterferenceontheimpactoftumorcellproliferation.Methods:1.Select20casesofovarianbenigntumor(benigngroup),40cases(borde
8、r)borderoariantumors,ovarianepithelialcarcinoma40cases(malign
