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《利用啤酒酵母提取rna的氨法工藝研究 畢業(yè)論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、目錄0.題目…………………………………………………………………………………2一.前言………………………………………………………………………………2二.正文………………………………………………………………………………21.材料…………………………………………………………………………………22.方法…………………………………………………………………………………32.1啤酒酵母RNA含量的測定………………………………………………………32.2氨法破壁工藝……………………………………………………………………32.3沉淀提取RNA……………………………………
2、………………………………42.4核酸純度測定……………………………………………………………………43.結(jié)果…………………………………………………………………………………43.1啤酒酵母泥的核酸含量測定……………………………………………………43.2不同酵母濃度對RNA提取率的影響……………………………………………43.3不同氨濃度對酵母RNA提取率的影響…………………………………………53.4 分步沉淀法去除蛋白質(zhì)試驗…………………………………………………54.結(jié)論…………………………………………………………………………………6三.致謝………………
3、………………………………………………………………7四.參考文獻(xiàn)…………………………………………………………………………8利用啤酒酵母提取RNA的氨法工藝研究摘 要：采用氨法破壁提取RNA，當(dāng)酵母質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%，氨為1.0%時，采用分步沉淀法，調(diào)蛋白質(zhì)的等電點后，再加入復(fù)合蛋白質(zhì)沉淀劑去除蛋白質(zhì)，可獲得純度在83%的優(yōu)質(zhì)酵母RNA，核酸的提取率是干酵母的2%以上。關(guān)鍵詞：啤酒酵母；RNA；氨法工藝StudyonBeerYeastRNAExtractionwithAmmoniaMethodAbstract:Thecellwallofbeeryeast
4、wasbrokenwithammoniamethod.Thebestyeastandammoniaconcentrationforbreakingcellwas10%and1.0%respectively.Theproteinwasremovedbyregulatingtheisoelectricpointandchemicalagents.ThenthehighqualityyeastRNAwiththepurityof83%wasobtained.KeyWords:Beeryeast,RNA,Ammonia,Process 一、前言酵母含有的
5、較高的核酸（RNA），在醫(yī)藥、食品、化妝品以及農(nóng)業(yè)等行業(yè)都有重要的用途。隨著我國啤酒業(yè)的日益發(fā)展，啤酒廠淘汰的廢棄啤酒酵母泥不斷增多。綜合利用大量的廢棄啤酒酵母泥提取核酸，不僅可以增加經(jīng)濟(jì)效益，還能解決飼料酵母存在高核的問題。RNA的提取方法多有報導(dǎo)［1～3］，但國內(nèi)用氨法破壁提取核酸的方法較為罕見。目前工業(yè)上常用的方法是：食鹽法、混合鹽法以及氫氧化鈉破壁法［4］。由于被淘汰的啤酒酵母菌齡較老，蛋白含量較高而核酸含量較低，因此采用工業(yè)上常用的一次沉淀提取工藝［4］，難以獲得高純度的優(yōu)質(zhì)核酸（RNA企業(yè)質(zhì)量：經(jīng)定磷法測定RNA含量≥80%，水分≤8%
6、為優(yōu)質(zhì)品，RNA含量≥70%，水分≤8%為一級品）［1］。我們就淘汰的啤酒酵母進(jìn)行氨法提取工藝研究，旨在為大工業(yè)化生產(chǎn)提取核酸，提供切實可行的工藝。二、正文1 材 料啤酒酵母泥：在徐州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物化工實驗中心培養(yǎng)，酵母培養(yǎng)基的配制為10克葡萄糖+300ml水+30克干酵母，用葡萄液培養(yǎng),在1000ml的地?zé)锛?0克葡萄糖和100ml蒸餾水中，加熱置煮沸，取出冷卻置25℃以下，才可以將30克干酵母倒入葡萄糖液培養(yǎng)基中，用玻璃棒稍加攪拌均勻后，然后把燒瓶放在25～30℃的恒溫恒濕箱培養(yǎng)，然后經(jīng)離心，酵母含水量為75%～78%左右?！ ?biāo)準(zhǔn)啤
7、酒酵母RNA：生化試劑，上海生化試劑廠。 氨水：化學(xué)純（含量25%～28%，），福建三明化工廠產(chǎn)品?！ ∪纫宜幔夯瘜W(xué)純，北京化工廠?！ ∪然F：化學(xué)純，北京化工廠。2 方 法2．1 啤酒酵母RNA含量的測定 高氯酸法：稱取一定量的酵母泥，用5%高氯酸在100℃條件下水解破壁15min，3600r/min離心15min，取其上清液，用752-G紫外分光光度計測定，波長260nm、280nm，石英比色皿，光程1cm?！ ⊙心テ扑榉ǎ悍Q取一定量的酵母泥，加入適量石英砂置于研缽中，研磨數(shù)十分鐘，3600r/min離心15min，取其上清液，用752
8、-G紫外分光光度計測定，波長260nm、280nm，石英比色皿，光程1cm。2．2 氨法破壁工藝 稱取一定量的酵母泥，加
