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《對(duì)4039例婦女HPV感染情況的調(diào)查與分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、對(duì)4039例婦女HPV感染情況的調(diào)查與分析【摘要】目的 了解義烏地區(qū)婦女宮頸人乳頭瘤病毒（HPV）感染的分布情況，確定本地區(qū)的優(yōu)勢(shì)型別。方法 采用流式熒光雜交法對(duì)4039例婦女進(jìn)行26種HPV基因型檢測(cè)，分析宮頸病變中HPV亞型感染分布特點(diǎn)。結(jié)果 在被調(diào)查的4039例婦女中HPV感染總陽(yáng)性率為16.4%（661/4039），感染亞型從高到低依次為：16、52、58、33和18，感染率為：16亞型占18.9%；52亞型占16.8%；58亞型占12.5%；33亞型占7.8%；18亞型占6.7%。結(jié)論 本地區(qū)HPV亞型感染分布以16、
2、52、58、33型為主?！娟P(guān)鍵詞】 人乳頭瘤病毒 宮頸癌人乳頭瘤病毒（humanpapillomavrius,HPV）是一種具有種屬特異性的嗜上皮病毒，屬雙鏈閉環(huán)的小DNA病毒，大量流行病學(xué)研究已證實(shí)，HPV的感染與子宮頸癌的關(guān)聯(lián)最為密切，高危型HPV持續(xù)感染是發(fā)生子宮頸癌的重要原因。HPV感染檢測(cè)已成為篩查和預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵問題之一[1-3]。1 資料和方法1.1資料1.1.1病例來源：2011年1月至6月在我院婦科門診就診以及體檢中心進(jìn)行常規(guī)體檢的婦女4039例（年齡18-78歲）。對(duì)所研究病例以年齡段為分組依據(jù)，25歲及2
3、5歲以下為一組，61歲及61歲以上為一組，中間年齡每5年為一個(gè)年齡段既為一組，剔除二次復(fù)查數(shù)據(jù)。61.1.2標(biāo)本采集：采集生殖道拭子標(biāo)本，取樣時(shí)盡量避免取樣不全而造成漏檢，標(biāo)本采集后立即送檢。4℃保存不超過24h。1.1.3儀器與試劑：流式熒光雜交法HPV核酸檢測(cè)試劑盒(上海透景生命科技有限公司)，多功能流式分析儀Luminex100(美國(guó)Luminex公司)。HC-2試劑盒(美國(guó)Digene公司)?；螂s交信號(hào)放大系統(tǒng)DML2000(美國(guó)Digene公司)。1.2方法1.2.1抽提DNA：按試劑盒說明進(jìn)行。1.2.2PCR擴(kuò)增
4、：擴(kuò)增HPVDNA的引物是MY09／MYll的改進(jìn)型，引物為生物素標(biāo)記，擴(kuò)增靶區(qū)為HPVLI區(qū)，產(chǎn)物長(zhǎng)度約480bp。此外，還包括擴(kuò)增人B-珠蛋白編碼基因的引物，用于特異性擴(kuò)增人p-珠蛋白DNA片段。加抽提后的DNA50-100ng到主混合液(MasterMix，含dNTP、M92+、引物混合液、Taq酶、雙蒸水)。擴(kuò)增條件為95℃5min；以下為5個(gè)循環(huán)：95℃30s，58℃30s，72℃30s；再接35個(gè)循環(huán)：95℃30s，55℃30s，72℃30s；最后：72℃3min。1.2.3雜交檢測(cè)：將編碼微球與DNA探針混合(探針
5、濃度10umol／L，10ul微球原液)；向檢測(cè)板的每孔中加入微球-探針雜交液22ul、PCR產(chǎn)物3ul；PCR儀中99℃變性5min，48℃30min使探針-擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合；向每孔中加入75ul鏈霉親和素標(biāo)記的藻紅蛋白(SA-PE)，48℃孵育15min；Luminex多功能流式分析儀檢測(cè)。表14039例女性年齡分布與HPV感染檢出率的關(guān)系6注：各年齡組的陽(yáng)性檢出率用X2檢驗(yàn)，X2=80.87P<0.01,查差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義表2HPV高危亞型檢出例數(shù)分布情況2 結(jié)果2.1從表1中可知，本研究共檢測(cè)4039例樣本，其中陽(yáng)性病
6、例661例，陽(yáng)性檢出率為16.4%，41-45歲年齡段的陽(yáng)性百分比最高為16.3%，形成一個(gè)最高峰；而56-60歲陽(yáng)性檢出率最高，為36.8%,明顯超過平均檢出率，說明陽(yáng)性檢出率隨著研究病例年齡段的增長(zhǎng)，呈現(xiàn)出一種上升的趨勢(shì)。從表1可以看出各年齡段HPV感染檢出率差異有顯著性，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.2從表2中可知，本研究的4039例樣本中HPV感染的陽(yáng)性病例中，主要以16亞型為主，占18.9%，其次為52亞型，占16.8%，再次為58亞型，占12.5%3 討論宮頸癌是婦科常見惡性腫瘤之一，其發(fā)病率僅次于乳腺癌位居第二位[4]。HP
7、V是一種誘發(fā)女性宮頸癌及生殖器病變的主要病源體。在超過95%的早期浸潤(rùn)和浸潤(rùn)性宮頸癌中，至少發(fā)現(xiàn)20種致癌HPV亞型?，F(xiàn)已明確HPV感染是宮頸上皮瘤變和浸潤(rùn)性宮頸癌發(fā)生的重要原因。臨床HPV檢測(cè)對(duì)于發(fā)現(xiàn)宮頸癌高?；颊咴缙诜乐斡兄匾饬x。6流式熒光雜交法采用多重PCR技術(shù)對(duì)檢測(cè)樣品的核酸DNA進(jìn)行擴(kuò)增，并用包被有核酸探針的多種編碼微球和擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行雜交，結(jié)果用流式點(diǎn)陣儀檢測(cè)分析。多重PCR可有效擴(kuò)增WHO確認(rèn)的HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和66共13種高危亞型，此外還可以有效擴(kuò)增其
8、他6種高危亞型（HPV26、53、55、68、82、83）和7種低危亞型（HPV6、11、40、42、44、61、73）.本文利用流式熒光雜交法對(duì)本院就診的女性進(jìn)行HPV感染亞型篩查，從表2中可見16、52、58亞型明顯為較其它亞型檢出例數(shù)更高，該三種亞型檢出例
