神經(jīng)干細胞分離培養(yǎng)及其分化潛能研究

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1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文神經(jīng)干細胞分離培養(yǎng)及其分化潛能研究姓名：胡黎平申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師：李海標2003.6.2塑絲王墅墮坌塞墮茭墨基坌些堂堂墮壅一生蘭!墮神經(jīng)干細胞分離培養(yǎng)及其分化潛能研究博士研究生：胡黎平導(dǎo)師：李海標教授中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院組織胚胎學(xué)教研室，廣州510080摘要神經(jīng)干細胞具有潛在的分化能力，即能在一定的條件下定向分化，當成體神經(jīng)組織受損或神經(jīng)退行性變后，通過定向誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞向相應(yīng)的神經(jīng)組織或細胞分化，進而取代損傷組織或細胞成為可能。因此，神經(jīng)干細胞分化潛能及其

2、分子調(diào)控機制是神經(jīng)生物學(xué)的重要課題，希望通過對其深入研究，為神經(jīng)干細胞的替代治療打下基礎(chǔ)。廠f我們從成年鼠室管膜下區(qū)、紋狀體和脊髓分離的NSCs，在含bFGF與EGF＼的無血清培養(yǎng)液中，里懸浮集落生長，原代與子代細胞呈nestin陽性，室管膜下區(qū)集落形成率最高(O．礁，PO．05)。研究了不同細胞

3、外基質(zhì)、維甲酸A、dBcAMP和神經(jīng)生長因子對NSCs分化的影響，結(jié)果顯示層粘蛋白利于NSCs貼壁和突起的生長，明膠、鼠尾膠原和纖粘蛋白促NSCs向神經(jīng)元分化率低于對照組(P<0．01)；維甲酸A、dBcAMP和神經(jīng)生長因子促NSCs向Map2陽性細胞分化率較對照組高(P<0．01)，同時維甲酸A促NSCs向CNPase陽性細胞分化率升高，而dBcA／vIP使NSCs向CNPase陽性細胞分化率降低(P

4、胞的比率(P<0．01)，其促NSCs向神經(jīng)元分化不受膜特異受體阻制劑Luzindole的影響。用RT—PER技術(shù)檢測了不同時神經(jīng)干細胞分離培養(yǎng)及其分化潛能研究中文摘要間，褪黑素對NeuroD、p21和p75基因mRNA的表達的影響，發(fā)現(xiàn)NeuroD最先激活，隨后是p21和p75表達的上調(diào)。此外，我們的實驗還表明，將褪黑素誘導(dǎo)后的NSCs移植入PD鼠紋狀體內(nèi)，結(jié)果顯示NSCs可以存活8周以上，并能分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞，可部分改善PD鼠的行為。7。一一[關(guān)鍵詞]神經(jīng)干細胞；匿多細胞培養(yǎng)：帕金森氏病?IIS

5、tudyontheisolationandthepotentialdifferentiationofneuralstemcellsDoctoralpostgraduate：Supervisor：HuLipingProfessorLiHaibioDepartmentofHistologyandEmbryology,SunYat-senUniversityofmedicalcollege，SunYat．senUniversity,Guangzhou510080AbstractNeuralstemcellshave

6、theabilityofpotentialdifferentiation．suchasdifferentiationorientationundersomeconditions．WhentheadultnervetissueiSdestroyedordegenerate，itispossibletoreplacetheinjurednervetissueorcellswiththehomologousnervetissueorcellsproducedthroughtheorientationinduceme

7、ntofneuralstemcells．Therefore，studyofabilityforNSCspotentialdifferentiationistheimportanttaSkofneurobiology．Expectationbyresearchitmore，tofoundawaytocurethediseaSeswithNSCs．NSCsdissectedfromtheadultsubventricularzone．striatumandspinalcordrespectively,Canpro

8、liferateandformrteurospheresinthemediumthatcontainsbFGFandEGF．Primaryandgenerationcellsdisplaynestin-positiveproteins．ThepercentofneurosphcresofcellsfromSVZWaSthehigbestamongthethreenervezones(o．7％，P(O