煙草黑脛病菌、青枯病菌拮抗放線菌的篩選及控病研究

煙草黑脛病菌、青枯病菌拮抗放線菌的篩選及控病研究

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時間:2019-05-16

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資源描述:

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1、西南大學碩士學位論文煙草黑脛病菌、青枯病菌拮抗放線菌的篩選及控病研究姓名:王巖申請學位級別:碩士專業(yè):植物病理學指導教師:肖崇剛;易龍20090501孺嬰煙草黑脛病菌、青枯病菌拮抗放線菌的篩選及控病研究植物病理學專業(yè)碩士研究生王巖指導教師肖崇剛教授易龍副教授摘要煙草是我國重要的經(jīng)濟作物之一,近幾年來,重慶煙區(qū)以煙草黑脛病、青枯病發(fā)病最為嚴重,造成大量經(jīng)濟損失。在煙草病害的多種防治方法中,生物防治對煙葉生產的可持續(xù)發(fā)展具有較好的應用前景。放線菌是生防微生物的重要來源,在植物病害的生物防治中占有重要地位。本試驗從采自我國幾大煙區(qū)的煙草根

2、圍土壤中分離篩選出對煙草黑脛病、青枯病病原菌有拮抗效果的放線菌,進行溫室控病研究及菌株的鑒定,并進一步探討其生防控病機理。具體結果如下:1、從重慶、貴州、云南、河南、陜西、山東這幾個我國主要的煙草生產地區(qū)共采集煙草根圍土壤樣品57份。在高氏一號培養(yǎng)基上采用平板稀釋法分離獲得415株放線菌。2、將分離獲得的415株放線菌分別采用平板對峙法和平板噴霧法對煙草黑脛病菌、煙草青枯病菌進行初篩,得到有拮抗活性的菌株178株,占分離總數(shù)的42.9%。其中對煙草黑脛病菌有拮抗活性的菌株134株,占分離總數(shù)的32.3%。對煙草青枯病菌有拮抗活性的菌

3、株77株,占分離總數(shù)的18.6%。而對兩種病害均有拮抗作用的活性菌株為33株,占分離總數(shù)的7.95%。3、對初篩拮抗半徑在10mm以上的煙草黑脛病菌拮抗菌以及初篩拮抗半徑在5mm以上的煙草青枯病菌拮抗放線菌菌株進行復篩,測定單個菌株的平板抑菌效果。對煙草黑脛病菌抑菌帶寬在15,-~35mm拮抗菌共有11株菌株,其中菌株HLL3.4、BX2-5.4抑菌帶寬平均值為33.3mm和32mm;對煙草青枯病菌的抑菌圈直徑在35"-'55mm的活性菌株有7株,菌株GAS1-9和YYD3.32抑菌圈直徑均在50mm以上。4、溫室盆栽試驗結果顯示,

4、參試拮抗菌株發(fā)酵原液對兩種病害均有良好的防治效果。對煙草黑脛病的防治效果在38.13%"-'-88.89%;相對防效50%以上的菌株8株,占總數(shù)的61.5%;防效在80%以上的菌株2株,菌株BX2.5.4的防治效果最好,西南大學碩十學位論文達88.89%;其次為BXl.1,防效為88.13%。拮抗菌對煙草青枯病的防治效果在37.89%'--'90.06%;防效在60%以上的菌株有6個,占總數(shù)的85.7%。相對防效最高的菌株為SXL1-7,防效90.06%;其次為菌株GASl.9,相對防效為85.72%。5、通過形態(tài)和培養(yǎng)特征的觀察、

5、生理生化的測定對平板抑菌和溫室控病篩選出的13株拮抗菌進行分類鑒定,初步認為13株拮抗菌均為放線菌,其中鏈霉菌屬(Streptromyces)6株,包括白孢類群、綠色類群、黃色類群和粉紅孢類群弗氏亞群;鏈輪絲菌屬(Streptroverticillium)3株;糖單孢菌屬(Saccharomonospora)1株;鞘孢囊菌屬(Elytrosporangium)1株;孢囊放線菌屬(Actinosporangium)1株。另外對5株溫室防效較好的菌株更深入的進行了16SrDNA序列及系統(tǒng)發(fā)育分析,結合其形態(tài)學及生理生化特性,確定菌株的分

6、類地位。結果表明:菌株GASl.9為婁徹氏鏈霉菌(Streptromycesrochei);BXl.1為變異鏈霉菌(Streptromycesvariabilis);BX2.5.4為吸水鏈霉菌(Streptromyceshygroscopicus);SYZ2.6為放線細菌(Actinomycetalesbacterium);SXLl.7與皺褶鏈霉菌(Streptromycesplicatus)最相近。6、對5株溫室防效較好的菌株進行拮抗代謝產物分析,結果表明,參試菌株都具有良好的生防潛力。其中SYZ2.6并IBXl.1均能產生幾丁質

7、酶、纖維素酶、蛋白酶以及嗜鐵素等生防活性物質。關鍵詞:放線菌煙草黑脛病菌煙草青枯病菌拮抗ⅡAbstractScreeningandbiocontroleffectofantagonisticactinomycetesagainstparasiticaandRalstoniasolannacearumCandidate:WangYanAdvisor:Prof.XiaoChong—gangAssco.Prof.YiLongTobaccoblackshankcausedbyPhytophthoraparasitica,tobaccobac

8、terialwiltcausedbyRalstoniasolannacearum,aretheimportantdiseaseswithseriouslossinthetobaccoareaofChongqing.Biocontrol

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