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《金黃色葡萄球菌α溶血素基因的克隆與表達(dá)》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、摘要*溶血素是金黃色葡萄球菌最重要的毒力因子，它可引起多種疾病，奶牛乳房炎的主要致病因子之一就是金黃色葡萄球菌分泌的*溶血素。奶牛乳房炎嚴(yán)重影響牛奶的品質(zhì)，患牛牛奶中體細(xì)胞數(shù)大幅增加，會降低乳蛋白、乳糖和乳脂肪的含量，使用抗生素治療，又會引起大量殘留，從而使鮮奶受到體細(xì)胞和抗生素的雙重污染，嚴(yán)重?fù)p害乳制品的質(zhì)量和風(fēng)殊。奶牛乳房炎嚴(yán)重阻礙了我國畜牧業(yè)的發(fā)展，每年均給奶牛業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。由于治療嚴(yán)重影響牛奶的品質(zhì)，而且金黃色葡萄球菌非常容易產(chǎn)生耐藥性，其引起的感染很難治愈，因此接種疫苗就成為最
2、理想的防制措施；但金黃色葡萄球菌常規(guī)疫苗效果不理想。故研常蛙因工程疫苗就成為解決問題的主要途徑。本實驗使用從奶牛乳房炎奶樣中分離到的一株金黃色葡萄球菌致病菌株，采用PCR法擴(kuò)增出編碼成熟蛋白渤素基因的全亭歹0，與pMDlS-T載體相連，構(gòu)建金黃色葡萄球菌*溶血素克隆質(zhì)粒，進(jìn)行測序。結(jié)果表明Ⅸ臨同源性在99．9％以上，編碼的蛋白質(zhì)氨基酸同源性在99．98％以上，說明金黃色葡萄球菌分泌的毒力因子“溶血素序列高度保守，同源性極高。再將導(dǎo)入克隆質(zhì)粒的外源片段構(gòu)建刪吲￡達(dá)載體質(zhì)粒，并對表達(dá)質(zhì)粒經(jīng)砷rG誘導(dǎo)
3、進(jìn)行表達(dá)，用sDs．PAGE電泳分析表達(dá)產(chǎn)物。表達(dá)產(chǎn)物金黃色葡萄球菌a一溶血素蛋白的分子量約33如‰與天然的金黃色葡萄球菌m溶血素蛋白分子量相近。金黃色葡萄球菌*溶血素蛋白的成功表達(dá)，為研制*溶血素的基因工程疫苗奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)。關(guān)睫詞：金黃色葡萄球菌，o一溶血素，奶牛乳房炎，克隆，表達(dá)Abst艘IctThegram—p0Sitiveo瑪aIlism口印咖，0c。cc淞口z朋淞isam面orbacte^alpamogen．ItisaSsociatedwitllt11eetiologicalofaV
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