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《番茄中BR相關基因的遺傳轉化研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、浙江大學碩士學位論文番茄中BR相關基因的遺傳轉化研究姓名：於維維申請學位級別：碩士專業(yè)：蔬菜學指導教師：汪俏梅20050501飛732948學校代碼：!Q蘭蘭量研究生學號：—2021—6052番茄中BR相關基因的遺傳轉化研究論文評閱人：型!塞蝗嬰童旦主國坐趲盟窺壓汪自強熬援逝塹盍堂壅堂隨麥盔煎數援逝、江太堂壅堂瞳答辯委員會主席：曾亡塞熬援逝江盔堂篁僉型堂堂醫(yī)答辯委員會委員：途巨民教援逝延太堂壅堂隧壅堂丕塹塹基副教握逝、江太堂壅堂瞳國苧丕湮值搓數援逝江太堂盔堂醫(yī)國苧丕：—～蘭塑里照墜堂垡蘭壅．墨墊!曼堅塑
2、苧墨里塑絲堡莖些墮莖．摘要油菜素甾酵類化合物(BRs)是在植物的生長發(fā)育中起重要作用的一類植物激素。BR的主要生理作用是促進植物的生長和提高植物對環(huán)境逆境的抗性。目前BR信號轉導途徑已基本清楚，BR信號轉導的主要組分包括膜受體BRII、與哺乳動物糖元合成酶澈酶3相似的BIN2激酶、核蛋白BZRl和BZR2／BESl等。最新研究表明BZRI在調節(jié)BR信號轉導、BR生物合成和生長響應中發(fā)揮關鍵性作用。本研究選用模式植物番茄作為遺傳轉化受體．引入BR信號轉導重要組分基因——口zR』基因．以期為迸一步分析BZR
3、l在誦節(jié)BP,的信號轉導途徑、BR水平和BR誘導基因的表述中的功能以及探討能否通過對BZRl的調控進行作物改良奠定基礎。因此，我們建立了番茄離體培養(yǎng)植株再生體系，構建了BZRl基因植物表達載體，并將目的基因導入根癌農桿菌LBA4404菌株中，進行了番茄的遺傳轉化研究，獲得了19株番茄KanR植株。主要研究結果如下：(1)通過不同的激素配比的篩選，提出了一個番茄離體培養(yǎng)再生頻率較高的培養(yǎng)基配方(MS培養(yǎng)基+3％蔗糖4-0．7％瓊]1％+2mg／L6-BA+0．2ragrLIAA)，子葉外植體的再生頻率達8
4、9％，下胚軸外植體的再生頻率達94％。(2)檢’鍘鑒定了已構建的含BZRI基因的植物表達載體質粒35S．BZRI．CFP和含bzrI基因的植物表達載體質粒35S．bzrl-CFP．分別將它們導入農桿菌LBA4404菌株中。(3)經過對番茄外植體Kan篩選濃度的確定、抑菌劑Amp的敏感性試驗、預培養(yǎng)和共培養(yǎng)時間的篩選，建立了一個番茄遺傳轉化體系。具體操作為：將番茄子葉外植體在預培養(yǎng)基上培養(yǎng)2，3d后，用含目的基因的農桿菌LBA4404菌液侵染15rain，在滅菌濾紙上吸干菌液，置于共培養(yǎng)基上培養(yǎng)3d，隨后
5、將外植體轉入含Kan20mg／L的選擇分化培養(yǎng)基上誘導不定芽，2-3周轉瓶一次，當抗性不定芽長至2-3cm時，在愈傷組織處切下幼苗，置于生根培養(yǎng)基上誘導不定根，20d左右后不定根長成，開瓶煉茁，然后移栽至營養(yǎng)±中，正常管理a(4)按已建立的番茄遺傳轉化體系．獲得了19抹卡那霉素抗性苗，對全部的Kan8轉基因番茄植株進行了PCR檢測，結果有16株含672bp標記基因(^儼r口基因)擴增產物·目前，番茄轉基因植株的進一步分子檢測和田間鑒定及遺傳特性等研究還在繼續(xù)中。關鍵詞：番茄；BR信號轉導；BZRl；遺傳
6、轉化——蘭鬯墨蘭塑生曼堡墼量莖!!璺塑羞莖墾墮墮堡蔓些堡塞AbstractBr∞sinosteroid(BRs)areaclassofsteroidhormonesthatplayimportantrolesinplantgrowthanddevelopment．BRCanpromoteplantgrowthandenhancetheresistanceofplantstoenvironmentalstresseS．ThepictureofBRsignallingisemerginginrecentye
7、ars．ThemaincomponentsofBRsignaltransductionincludethecell。sufacereceptorkinaseBRll，theglycogensynthasekinase一3一likekinaseBIN2，nuclearproteinsBZRlandBZR2／BESI．ArecentstudydefinesBZRl∞acentralregulatorfOrcoordinatingBRsignalling．BRbiosynthesis，andgrowthres
8、ponses．Inthisstudy,weconstructedallefficienttomatogenetictransformationsystem，andtransformedBRsignal缸茁ls出K主i_。ngene(_BZRIgene)i幽tomato，whichwehope乜makeastrongbasis董對furtherinvestS．gatingthefunctionofBZRIinregulatingBRsigna
