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《神經(jīng)干細(xì)胞的單層培養(yǎng)及分化過程中HES1和MASH1的表達(dá)變化》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、CMYK第35卷第1期中山大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)科學(xué)版）Vol．35No．12014年1月JOURNALOFSUNYAT-SENUNIVERSITY（MEDICALSCIENCES）Jan．2014神經(jīng)干細(xì)胞的單層培養(yǎng)及分化過程中HES1和MASH1的表達(dá)變化劉菲菲111*112，徐麗萍，龍大宏，陳艷，張君度，龍靜怡（1．廣州醫(yī)科大學(xué)人體解剖教研室，廣東廣州510182；2．南方醫(yī)科大學(xué)2011級臨床醫(yī)學(xué)本科班，廣東廣州510515）摘要：【目的】建立神經(jīng)干細(xì)胞（NSC）體外培養(yǎng)方案，使NSC的體外可以得到增殖和分化，并檢測NSC分化過程中H
2、ES1和MASH1的表達(dá)變化?！痉椒ā繜o菌條件下取SD大鼠胚胎端腦，無血清懸浮培養(yǎng)，形成P2代神經(jīng)球后，將神經(jīng)球消化成單細(xì)胞，分為神經(jīng)球懸浮培養(yǎng)和單層貼壁培養(yǎng)，并對兩種不同培養(yǎng)方式下的NSC進(jìn)行干性鑒定和分化能力鑒定。用不同濃度（20、40、80μg／L）的腦源性神經(jīng)生長因子（BDNF）誘導(dǎo)NSC分化，選出最合適的濃度。用BDNF最佳誘導(dǎo)濃度誘導(dǎo)NSC分化，Q－PCR檢測分化過程中HES1和MASH1的表達(dá)變化?！窘Y(jié)果】神經(jīng)球懸浮培養(yǎng)和單層貼壁培養(yǎng)均可得到的NSC；分化3d后，在不加入任何誘導(dǎo)因素的情況下，單層貼壁培養(yǎng)的NSC能更高比
3、例［（19．55±1．09）％］地分化為β－tubulinⅢ陽性細(xì)胞；BDNF40μg／L能誘導(dǎo)出更多的β－tubulinⅢ陽性細(xì)胞［（34．17±0．60）％］；在分化1、3和7d時，Q－OCR結(jié)果表明MASH1在BDNF誘導(dǎo)下組較NSC和對照組表達(dá)水平明顯上升?！窘Y(jié)論】單層貼壁培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞更利于分化為神經(jīng)元，BDNF為40μg／L時能誘導(dǎo)出更高比例的神經(jīng)元，BDNF可以誘導(dǎo)MASH1在NSC分化過程中表達(dá)明顯上升。關(guān)鍵詞：神經(jīng)干細(xì)胞；神經(jīng)球；單層貼壁培養(yǎng)；分化；腦源性神經(jīng)生長因子中圖分類號：R322．8文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：
4、1672－3554（2014）01－0018－07CulturDOI:10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2014.0004eofNeuralStemCellinVitroandtheExpressionChangesofHES1andMASH1duringDifferentiation111*112LIUFei-fei，XULi-ping，LONGDa-hong，CHENYan，ZHANGJun-du，LONGJing-yi（1．DepartmentofHumanAnatomy，G
5、uangzhouMedicalUniversity，Guangzhou510182，China；2．DepartmentofClinicMedicine，Grade2011，NanfangMedicalUniversity510515，Guangzhou）Abstract：【Objective】CulturingofNSCinvitrowereinvestigated，inwhichNSCcouldproliferateanddifferentiate．TheexpressionchangesofHES1andMASH1weredet
6、ectedduringthedifferentiationofNSC．【Methods】Thecerebrumsofratembryoswereseparatedinsterileworkingconditionandculturedinserum-freemedium．Whenthesecondaryneurosphereswereformed，Accutasedigestedthemintosinglecells．Thentheyweredividedintotwoparts，onewasculturedwithsuspensio
7、nneurospheres，theotherwasplatedtoadherentmonolayer．Andtheabilitiesof“stem”and“differentiation”intwomethodswereexamined．NSCwereinducedwithdifferentconcentrations（20，40，80μg／L）ofbrain-derivedneurotrophicfactor（BDNF）todifferentiation，thebestonewasdetermined．Afterinduceddif
8、ferentiationofNSCinthepresenceofBDNF，theexpressionchangesofHES1andMASH1weredetected．【Results】NSCwereobtaininbo
