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《神經(jīng)干細胞定向分化為多巴胺能神經(jīng)元過程中Mash1及Hes1基因的表達.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、解剖學研究2015年第37卷第3期AnatRes，2015．V01．37．N0．3167·論著·神經(jīng)干細胞定向分化為多巴胺能神經(jīng)元過程中Mashl及Hesl基因的表達張君度，龍大宏，陳艷，劉菲菲，龍靜怡(廣州醫(yī)科大學人體解剖學教研室，廣東廣州510182)【摘要】目的建立神經(jīng)干細胞(NSCs)分化為多巴胺能神經(jīng)元的體外模型，并進一步研究此分化過程中Mashl及Hesl基因的表達變化。方法無菌條件下取孕14—16d胎鼠端腦進行NSCs體外培養(yǎng)。將NSCs進行Nestin免疫熒光檢測，對照組和實驗組(GDNF+IL．1et聯(lián)合組)誘導2周后進行B—tubulinⅢ和TH免疫熒
2、光染色，計算各組陽性細胞率，熒光定量PCR技術檢測P4代NSCs分化1周和2周時Mash1及Hesl基因的表達變化。結果免疫熒光檢測結果顯示，NSCs的Nestin陽性細胞率為(93．04+3．55)％，誘導分化2周后對照組、實驗組p．tubulin111陽性細胞率分別為(12．65+1．58)％和(33．95~2．97)％，兩組間比較差異存在統(tǒng)計學意義(P<0．05)。對照組、實驗組TH陽性細胞率分別為(1．46~0．41)％、(15．51~1．94)％，差異存在統(tǒng)計學意義(P<0．05)。熒光定量PCR結果顯示，NSCs誘導分化后，Mashl基因表達較未分化狀態(tài)時升高
3、，各組間比較差異存在統(tǒng)計學意義，實驗組高于對照組(P<0．05)，分化2周高于1周(P<0．01)；Hesl基因于分化后表達降低，對照組與對實驗組之間以及分化1周與2周之間比較差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0．05)。結論GDNF和IL．1聯(lián)合作用能夠誘導NSCs定向分化為多巴胺能神經(jīng)元；Mashl與Hes1基因可能參與NSCs分化為多巴胺能神經(jīng)元的過程。【關鍵詞】神經(jīng)干細胞；分化；多巴胺能神經(jīng)元；Mashl；HeslTheexpressionofMashlandHeslduringinduceneuralstemcellsdiferentiatingintodopaminer
4、gicneuronsZHANGJun—du，LONGDa-hong，CHENYon，LIUFei-fei．LONGJing-yi，DepartmentofAnatomyofGuangzhouMedwalUniversity，Guangzhou510182，ChinaCorrespondingauthor：LONGDa-hong，Email：2856478507@qq．com【Abstract】ObjectiveTobuildtheinvitromodeldofNSCsdiferentiateintodopaminegicneurons，andfurtherstudythe
5、expressionofMash1andHeslinthisprocess．MethodsSeparatedthetelencephalonofratembryosinsterileconditionandcul—turedinvitro，takeNSCsstainedbyNestinimmunofluorescenceassay，dividedintocon=groupandexp-group(GDNF+IL-let)andinducedintodopaminegicneurons，after2weeksstainedbyp-tubulinⅢandTH，andcount
6、edtherateofpositivecellsofeachgroup．q-PCRcheckedtheexpressionofMashlandHeslinNSCsandduringdiferentiatedintodopaminegicneurons．ResultsIFshowedthattherateofNestinpositivecellswas(93．04~3．55)％，Therewerenostatisticaldiferencebetweenthetwocomparison(P>0．05)．Afterdiferamiated2weeks，therateof13-
7、tubulinⅢpositivecellswere：I)4，con—group[(12．65~1．58)％]，exp—group[(33．95~2．97)％]，respectively，Therewerestatisticaldiferencebetweenthetwocomparison(P<0．05)；therateofTHpositivecellwere：P4,con—group[(10-41)％]，exp—group[(15．51~1．94)％]，Therewerestatisticaldiferencebetween
