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《豬ATF4基因真核超表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、豬ATF4基因真核超表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定陳超吳望軍熊遠(yuǎn)著華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部豬遺傳育種重點開放實驗室，武漢430070摘要：克隆豬ATF4基因CDS，構(gòu)建pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表達(dá)載體，為下一步在細(xì)胞水平和個體水平研究該基因功能奠定基礎(chǔ)。提取RNA,運用RT-PCR和巢式PCR技術(shù)擴(kuò)增豬ATF4全部編碼序列，克隆轉(zhuǎn)化到pMD18-T載體中，測序驗證后，酶切連接到pcDNA3.1(+)載體中，構(gòu)建成pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表達(dá)栽體，對其進(jìn)行酶切和測序鑒定并在細(xì)胞水平上進(jìn)行表達(dá)
2、量的鑒定。實驗結(jié)果表明，在轉(zhuǎn)染了pcDNA3.1(+)-ATF4載體的細(xì)胞中，ATF4mRNA表達(dá)水平明顯增加，成功構(gòu)建了pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表達(dá)載體，為進(jìn)一步研究該基因的功能奠定了基礎(chǔ)。豬；ATF4;栽體構(gòu)建；瞬時轉(zhuǎn)染S813.1AConstructionandIdentificationofpcDNA3.1(+)-ATF4ofPigChenChaoWuWangjunXiongYuanzhu國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃(973計劃)項目“品質(zhì)性狀形成的分子基礎(chǔ)”(2006CB10210
3、2)。第一作者簡介：陳超，男，1984年出生，山東滕州人，碩士，研究方向：分子生物學(xué)與分子育種。通信地址：430070湖北省武漢市洪山區(qū)獅子山街1號、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，Tel:027-87283700，E-mail：chencha08341@webmail.hzau.edu.cn。通訊作者：熊遠(yuǎn)著，男，1930年出生，湖北省竹山人，中國工程院院士，教授，研究方向：動物遺傳育種，創(chuàng)建了中國第一個種豬測定中心，先后主持了國家及省部級重大科研項目30余項，獲國家科技進(jìn)步獎5項，省部級科技進(jìn)步獎10余
4、項。發(fā)表學(xué)術(shù)論文100多篇，主編專著4部。通信地址：430070湖北省武漢市洪山區(qū)獅子山街1號、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，Tel：027-87284286，E-mail：xiongyzh@mail.hzau.edu.cn。2011-01-212011-03-31·7.·8··9·@@[1]SiuF,BainPJ,LeBlanc-ChaffinR,etal.ATF4isamediatorofthenutrient-sensingresponsepathwaythatactivatesthehumanas
5、paraginesynthetasegene[J],JBiolChem,2002.277(27):24120-24127.@@[2]MielnickiLM,PruittSC,IsolationandnucleotidesequenceofamurinecDNAhomologoustohumanactivatingtranscriptionfactor4[J].NucleicAcidsRes,1991.19(22):6332.@@[3]TsujimotoA,NyunoyaH,MoritaT,etal.I
6、solationofcDNAsfor2565-73.DNA-bindingproteinswhichspecificallybindtoatax-responsive@@[9]YoshizawaT,HinoiE,JungDY,etal.ThetranscriptionfactorenhancerelementinthelongterminalrepeatofhumanT-cellATF4regulatesglucosemetabolisminmicethroughitsexpressionleukem
7、iavirustypeI[J].Jvirol,1991,65(3):1420-1426.inosteoblasts[J].JClinInvest,2009,119(9):2807-2817.@@[4]YeJC.Koumenis,ATF4,anERstressandhypoxia-inducible@@[10]AdamsCM.RoleofthetranscriptionfactorATF4intheanabolictranscriptionfactoranditspotentialroleinhypox
8、iatoleranceandactionsofinsulinandtheanti-anabolicactionsofglucocorticoidstumorigenesis[J].CurrMolMed,2009,9(4):411-416.[J].JBiolChem,2007,282(23):16744-16753.@@[5]WangW,LianN,Li,etal.Atf4regulateschondrocyteproliferation@@[11]Wan
