資源描述：
《食品中沙門菌檢測方法進(jìn)展》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2006年2月第16卷第2期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Feb2006;Vol16No2251綜述食品中沙門菌檢測方法進(jìn)展李毅(浙江省溫州市疾病預(yù)防控制中心,浙江溫州32500)[關(guān)鍵詞]沙門菌;食品;PCR;引物設(shè)計(jì);抗體+[中圖分類號]R37822[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A[文章編號]1004-8685(2006)02-0251-03沙門菌(Salmonella)是一類廣泛分布于自然界,對人類和微生物生長。雖然緩沖蛋白胨水被建議常規(guī)使用(由于其可動(dòng)物具有極大危害的革蘭陰性
2、腸道致病菌。目前全世界已分保持溶液pH值穩(wěn)定),但對培養(yǎng)基的選擇仍存有爭論。第二,[1]離出2000多個(gè)血清型,我國已發(fā)現(xiàn)216個(gè)。蛋、家禽和肉是選擇性增菌步驟,它使沙門菌生長而使肉湯中同時(shí)存在的類產(chǎn)品是沙門菌病的主要傳播媒介,感染主要取決于沙門菌微生物數(shù)量減少,與預(yù)增菌培養(yǎng)基相似,對選擇性培養(yǎng)基的選的血清型和食用者的身體狀況,受威脅最大的是小孩、老年人擇,也存在許多不同的觀點(diǎn)。目前應(yīng)用的主要有如下3種類及免疫缺陷個(gè)體。根據(jù)國際慣例,要求對易受沙門菌污染的型:四硫酸鈉煌綠(TTB)增菌液、亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液食品進(jìn)行分類管理,以使大多數(shù)食物不含沙門菌,從而有效預(yù)和氯化鎂
3、孔雀綠(MM)增菌液。由于沒有任何一種培養(yǎng)基可防控制沙門菌病。自19世紀(jì)后期,沙門菌首次被鑒定為人類以全面地保持所有食品基質(zhì)中各種沙門菌血清型,所以,較適的一種病原菌以來,檢測方法學(xué)都是建立在采取感染病人的當(dāng)?shù)淖龇ň褪鞘褂脙煞N培養(yǎng)基平行地進(jìn)行試驗(yàn)。第三步是分糞便或血液作為臨床病料的基礎(chǔ)上。此后的60年間,用于從離步驟,即選擇性培養(yǎng)物在含一種或多種抑制非沙門菌生長食品中分離沙門菌的方法實(shí)質(zhì)上與那些用于臨床病料的方法制劑的瓊脂平板上劃線培養(yǎng),然后對平板上肉眼可見的特征是相同的。但至少有3個(gè)因素限制了用于臨床病料的方法應(yīng)性菌落進(jìn)行確認(rèn),并對該菌落分離物進(jìn)行一系列生化和血清用在食品分析
4、上。第一,通常,沙門菌的含量水平在污染食品學(xué)檢測,以作出鑒定。傳統(tǒng)沙門菌檢測法全過程需時(shí)至少4~中比有感染病人的病料中要低很多;第二,食品本身的性質(zhì)會(huì)7d,才能得出明確的診斷結(jié)果。食品中沙門菌污染量小,常受干擾病原的檢測,例如,某些食品中固有菌群可能處在一個(gè)很應(yīng)激損傷,不易恢復(fù),現(xiàn)用檢測方法得到陰性報(bào)告最少需4d,高的水平,從而影響特定細(xì)菌的選擇性分離和鑒定;第三,與陽性報(bào)告還要延遲2~3d。臨床病料不同的是,經(jīng)過加工的食品,由于加熱、干燥、高含鹽量、酸和冷凍等因素的作用,其中的沙門菌受到了尚不致命的2以抗體為基礎(chǔ)的檢測方法損傷或稱!致傷?。這就形成了一個(gè)具有不同生長特性的細(xì)
5、菌利用抗原-抗體反應(yīng)的特異性,來進(jìn)行細(xì)菌的鑒別和血群。這種現(xiàn)象對那些希望從食物樣品中分離出沙門菌的食品清學(xué)定型,已有半個(gè)多世紀(jì)的歷史。細(xì)菌菌體或鞭毛抗原的分析家來說有很大影響,因?yàn)樵谶x擇培養(yǎng)基上直接培養(yǎng)!致特異性抗體的存在,使得人們可以建立一些快速方法來檢測傷?的沙門菌通常是以細(xì)菌死亡和試驗(yàn)失敗而告終。為克服以食品為載體的病原。已經(jīng)建立的沙門菌免疫學(xué)檢測方法有這些困難,人們建立了一種簡單的微生物增殖步驟,專門針對許多種,大致可分為以酶標(biāo)抗體(ELISA),熒光抗體染色(免疫以食品為傳播載體的病原。雖然這些方法本身證明是可靠熒光法),同位素標(biāo)記抗體(放射免疫試驗(yàn))為基礎(chǔ)的方法及其
6、的,但卻很費(fèi)力、耗時(shí),需要4~7d才能完成。因此,在需要及它多種以抗體為基礎(chǔ),利用乳膠凝集、免疫傳感器、免疫擴(kuò)散時(shí)、快速評價(jià)食品中微生物的安全性時(shí),通常不被采用。隨著及免疫色譜技術(shù)的方法。但常規(guī)中最廣泛采用的是以雙位點(diǎn)DNA和抗體技術(shù)的發(fā)展,特別是PCR技術(shù)以其敏感性強(qiáng)、特ELISA技術(shù)即夾心ELISA為基礎(chǔ)的方法。異性高、簡便、快速等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于沙門菌檢測,近10~15最近黎兆滾等人[3]首次在國內(nèi)口岸系統(tǒng)應(yīng)用微量板年間發(fā)展了許多改進(jìn)的方法,其中有些可以在48h內(nèi)檢出沙ELISA法對進(jìn)出口動(dòng)物產(chǎn)品(魚粉、肉骨粉等)進(jìn)行沙門菌檢門菌。長期以來,人們在探索沙門菌檢測方法的過程
7、中,作出測。該法采用預(yù)先包被了沙門菌(A-E群)單克隆抗體的微了不懈的努力,現(xiàn)將有關(guān)檢測進(jìn)展總結(jié)如下。量板,加入經(jīng)增菌處理的樣品,反應(yīng)后再加入一定的指示劑,作用畢后用酶標(biāo)儀測定OD值來判定結(jié)果。食物樣品經(jīng)適當(dāng)[2]1傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法的增菌處理,也可用此法進(jìn)行沙門菌檢測。ELISA法檢出沙門用于沙門菌分析的傳統(tǒng)方法是食物樣品分步增菌,以增56菌的極限范圍在10~10cfu/m,l因此,要得出可靠的結(jié)果,加病原菌的可檢出率,這種培養(yǎng)方法總體可分4個(gè)不同階段食物樣品首先必需進(jìn)行預(yù)增菌、選擇性增菌,
