《發(fā)酵染菌及防治》PPT課件

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1、第七章發(fā)酵染菌及防治第一節(jié)發(fā)酵異?，F(xiàn)象及染菌分析第二節(jié)染菌對(duì)發(fā)酵的影響第三節(jié)染菌污染后的挽救和處理第四節(jié)染菌的預(yù)防措施第五節(jié)噬菌體染菌及防治目的要求：了解染菌對(duì)發(fā)酵工業(yè)的危害掌握染菌的檢查方法熟悉染菌的途徑掌握染菌的防治方法掌握噬菌體污染的防治方法幾個(gè)問(wèn)題：1、染菌2、染菌途徑3、染菌檢查的方法4、染菌防治的方法發(fā)酵染菌防治的意義：現(xiàn)代發(fā)酵利用的是微生物的純培養(yǎng)技術(shù)。要嚴(yán)格無(wú)菌操作技術(shù)。防止發(fā)酵過(guò)程中的染菌有著重要的意義：保證產(chǎn)品的質(zhì)量、收率的穩(wěn)定。保證發(fā)酵生產(chǎn)的有序進(jìn)行。有利于節(jié)約型社會(huì)的建立。第一節(jié)發(fā)酵異?，F(xiàn)象及染

2、菌分析一、發(fā)酵的異?，F(xiàn)象二、染菌檢查三、染菌的原因及分析四、染菌隱患的處理一、發(fā)酵的異?，F(xiàn)象（一）種子培養(yǎng)的異常現(xiàn)象（二）發(fā)酵的異?，F(xiàn)象（一）種子培養(yǎng)的異?，F(xiàn)象1、菌體生長(zhǎng)緩慢原因：種子質(zhì)量差、培養(yǎng)基成分不穩(wěn)定、培養(yǎng)條件沒(méi)有控制到位。2、菌絲結(jié)團(tuán)原因：種子、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基。3、代謝不正常原因：培養(yǎng)基不合適、培養(yǎng)環(huán)境不良、接種量少、污染雜菌。（二）發(fā)酵的異?，F(xiàn)象（p184-185）1、消耗緩慢（菌體生長(zhǎng)差）（1）原因：產(chǎn)生菌孢子和種子質(zhì)量不好、發(fā)酵條件差、培養(yǎng)基質(zhì)量差（滅菌不當(dāng)）等。（2）措施：補(bǔ)充合適的氮源，或磷酸鹽

3、，提高發(fā)酵溫度。2、pH異常發(fā)酵過(guò)程中一般pH是有一定規(guī)律的。如不符合規(guī)律則是發(fā)酵異常。（1）原因：培養(yǎng)基原料差、滅菌不徹底、加糖過(guò)于集中等。（2）措施：可通過(guò)加酸或堿調(diào)節(jié)。最好加入一些生理酸性或堿性鹽或緩沖液來(lái)調(diào)節(jié)。3、溶氧水平異常（p164）正常發(fā)酵過(guò)程的溶氧水平是由一定規(guī)律的。如果溶氧水平與一般規(guī)律不一致即發(fā)生了異常變化。（1）原因：染菌。染菌的種類(lèi)：好氧菌、厭氧菌。菌體代謝異常、某些設(shè)備或工藝發(fā)生故障或變化。（2）措施：檢查無(wú)菌空氣、管道是否滲漏。攪拌設(shè)備是否正常運(yùn)行等。4、泡沫過(guò)多發(fā)酵過(guò)程中泡沫的消長(zhǎng)是有一定

4、規(guī)律的。（1）原因：種子過(guò)嫩或過(guò)老，致使菌體生長(zhǎng)差、代謝速度慢，蛋白質(zhì)膠體物質(zhì)多。培養(yǎng)基滅菌溫度過(guò)高或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，培養(yǎng)基成分受到破壞。（2）措施：接種優(yōu)質(zhì)種子、對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行合理滅菌。5、菌體濃度過(guò)高或過(guò)低由于溫度、氧氣、培養(yǎng)基、種子質(zhì)量、菌體自溶等影響微生物的生長(zhǎng)，或感染噬菌體等，導(dǎo)致發(fā)酵液中微生物的濃度過(guò)高或過(guò)低。微生物的濃度過(guò)低，發(fā)酵液轉(zhuǎn)?。褐赴l(fā)酵尚未進(jìn)入放罐階段，發(fā)酵液就變稀。（1）原因：感染噬菌體、培養(yǎng)條件不合適。（2）措施：防噬菌體、控制合適培養(yǎng)條件。未知的其它原因：可補(bǔ)充氮源促菌絲生長(zhǎng)，或補(bǔ)充碳源也可。微生物

5、的濃度過(guò)高，發(fā)酵液過(guò)濃：（1）原因：氮源過(guò)多，菌絲生長(zhǎng)快、濃度大，從而降低發(fā)酵液中溶解氧的濃度，影響發(fā)酵正常進(jìn)行。（2）措施：補(bǔ)入大量的水。二、染菌檢查（p185-186）在發(fā)酵過(guò)種中，對(duì)雜菌污染的及早發(fā)現(xiàn)、及時(shí)處理，是免除染菌造成嚴(yán)重?fù)p失的重要手段。因此，要求有確切、迅速的方法來(lái)檢測(cè)出污染的雜菌。目前常用的方法：（一）顯微鏡檢查（二）肉湯培養(yǎng)檢查法（三）平板劃線培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)檢查法（四）發(fā)酵過(guò)程的異?，F(xiàn)象觀察法（一）顯微鏡檢查1、細(xì)菌用革蘭氏染色，必要時(shí)進(jìn)行芽孢染色和鞭毛染色，霉菌、酵母菌可直接觀察。（二）肉湯培養(yǎng)檢

6、查法1、方法液體培養(yǎng)基的檢查:將需要檢查的樣品接入經(jīng)滅菌，并經(jīng)過(guò)檢查無(wú)菌的肉湯培養(yǎng)基中，放置37℃和27℃分別培養(yǎng)24h，進(jìn)行觀察，觀察肉湯是否渾濁。并取樣鏡檢。無(wú)菌空氣的檢查:將葡萄糖酚紅肉湯培養(yǎng)基裝在吸氣瓶中，滅菌后，37℃培養(yǎng)24h，若培養(yǎng)液未變渾濁，表明吸氣瓶中的培養(yǎng)液是無(wú)菌的，把過(guò)濾后的空氣引入吸氣瓶中，培養(yǎng)后，若培養(yǎng)液變混或變黃色，表明空氣中仍有雜菌，說(shuō)明過(guò)濾系統(tǒng)有問(wèn)題。2、應(yīng)用（1）空氣過(guò)濾系統(tǒng)。（2）液體培養(yǎng)基。（3）噬菌體檢查，此時(shí)使用生產(chǎn)菌作為指示菌。（二）平板劃線培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)檢查法１、平板劃線培

7、養(yǎng)固體平板置培養(yǎng)箱中37℃，保溫24h，檢查無(wú)菌即可使用。將需要檢查的樣品在無(wú)菌的平板上劃線，分別置37℃、27℃培養(yǎng)，以適應(yīng)嗜中溫和低溫菌的生長(zhǎng)，一般在8h后即可觀察。培養(yǎng)后，若出現(xiàn)與生產(chǎn)菌株形態(tài)不一的菌落，表明可能被雜菌污染。２、噬菌體檢查——雙層平板培養(yǎng)法：底層同為肉汁瓊脂培養(yǎng)基，上層減少瓊脂用量，先將滅菌的底層培養(yǎng)基溶后倒平板，凝固后，將上層培養(yǎng)基溶解并保持40℃，加生長(zhǎng)菌作為指示菌和待測(cè)樣品混合后迅速倒在底層平板上，置培養(yǎng)箱保溫經(jīng)12～20h觀察有無(wú)噬菌斑。（四）發(fā)酵過(guò)程的異?，F(xiàn)象觀察法（p186）如可從溶解

8、氧、pH值、排氣中CO2含量、菌體酶活力等變化來(lái)判斷。1、溶解氧水平異常變化顯示染菌。2、pH異常變化顯示染菌。3、排氣中CO2異常變化顯示染菌。谷氨酸正常發(fā)酵和異常發(fā)酵溶氧水平曲線：三、發(fā)酵染菌的原因（一）發(fā)酵染菌率是指一年內(nèi)發(fā)酵染菌的批數(shù)與總投料發(fā)酵批數(shù)之比。發(fā)酵染菌批數(shù)總?cè)揪?——————100％總投料批數(shù)發(fā)酵染菌率是指在