實(shí)驗(yàn)二類脂粒染色

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1、類脂粒和易染顆粒染色法一、實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)菌株:從SBR(SequencingBarchReactorActivatedSludgeProcess)反應(yīng)器,經(jīng)過1個(gè)月的厭氧好氧交替馴化,形成除磷能力很強(qiáng)的聚磷菌群。類脂粒染色原理細(xì)胞內(nèi)含脂類儲(chǔ)藏物的細(xì)菌。PHA聚羥基脂肪酸酯,在C/N高的環(huán)境中更易形成,用革蘭氏染色不能使這類物質(zhì)著色,被誤認(rèn)為是空胞。若用脂溶性染料染色,可將其與細(xì)胞內(nèi)的空胞區(qū)別。類脂粒染色藥品1)類脂粒染色液:染色液:0.3%蘇丹黑染液0.3g蘇丹黑,溶于100ml的75%酒精;褪色劑:二甲苯;復(fù)染劑:0.5%番紅染液。操作步驟1.制片:涂片---

2、干燥---固定;2.初染:在制片上滴0.3%蘇丹黑染液,染10min,水洗,吸干;3.脫色:用二甲苯?jīng)_洗涂片至無黑色素洗脫;4.復(fù)染:用0.5%番紅復(fù)染1-2min,水洗,吸干。5.鏡檢:類脂類呈藍(lán)黑色,菌體其他部分呈紅色;易染顆粒染色易染顆粒是細(xì)菌儲(chǔ)藏的物質(zhì);主要是多聚磷酸鹽,隨著菌齡的增加而變大,易被藍(lán)色燃料染色,而呈紅色或紫色不呈現(xiàn)藍(lán)色,故名易染顆粒,如用呂氏美蘭單染5min,易染顆粒呈深藍(lán)色,菌體呈淡藍(lán)色,也稱Albert易染顆粒染色法。易染顆粒染色藥品甲液:甲苯胺藍(lán)0.15g乙液:碘2.0g,孔雀綠0.2g,KI3.0g,冰醋酸1ml溶于300ml,

3、95%酒精。易染顆粒染色步驟1、滴甲液于涂片上染色5min,傾去;2、滴加乙液沖去甲液,再染1min,水洗。3、吸干、鏡檢。4、易染顆粒呈黑色,菌體呈綠色或淺綠色。類脂粒實(shí)驗(yàn)報(bào)告描述厭氧末期和好氧末期,2種方法獲得的染色結(jié)果。(兩種時(shí)期都顏色是什么?聚磷菌體多少?)

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