《實(shí)驗(yàn)類脂粒染色》PPT課件.ppt

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1、類脂粒和易染顆粒染色法一、實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)菌株:從SBR(SequencingBarchReactorActivatedSludgeProcess)反應(yīng)器，經(jīng)過(guò)1個(gè)月的厭氧好氧交替馴化，形成除磷能力很強(qiáng)的聚磷菌群。類脂粒染色原理細(xì)胞內(nèi)含脂類儲(chǔ)藏物的細(xì)菌。PHA聚羥基脂肪酸酯，在C/N高的環(huán)境中更易形成，用革蘭氏染色不能使這類物質(zhì)著色，被誤認(rèn)為是空胞。若用脂溶性染料染色，可將其與細(xì)胞內(nèi)的空胞區(qū)別。類脂粒染色藥品1）類脂粒染色液：染色液：0.3%蘇丹黑染液0.3g蘇丹黑，溶于100ml的75%酒精;褪色劑:二甲苯;復(fù)染劑：0.5%番紅染液。操作步驟1.制片：

2、涂片---干燥---固定；2.初染：在制片上滴0.3%蘇丹黑染液，染10min，水洗，吸干；3.脫色：用二甲苯?jīng)_洗涂片至無(wú)黑色素洗脫；4.復(fù)染：用0.5%番紅復(fù)染1-2min，水洗，吸干。5.鏡檢：類脂類呈藍(lán)黑色，菌體其他部分呈紅色；易染顆粒染色易染顆粒是細(xì)菌儲(chǔ)藏的物質(zhì)；主要是多聚磷酸鹽，隨著菌齡的增加而變大，易被藍(lán)色燃料染色，而呈紅色或紫色不呈現(xiàn)藍(lán)色，故名易染顆粒，如用呂氏美蘭單染5min，易染顆粒呈深藍(lán)色，菌體呈淡藍(lán)色，也稱Albert易染顆粒染色法。易染顆粒染色藥品甲液：甲苯胺藍(lán)0.15g乙液：碘2.0g，孔雀綠0.2g，KI3.0g，冰醋酸1

3、ml溶于300ml，95%酒精。易染顆粒染色步驟1、滴甲液于涂片上染色5min，傾去；2、滴加乙液沖去甲液，再染1min，水洗。3、吸干、鏡檢。4、易染顆粒呈黑色，菌體呈綠色或淺綠色。類脂粒實(shí)驗(yàn)報(bào)告描述厭氧末期和好氧末期，2種方法獲得的染色結(jié)果。（兩種時(shí)期都顏色是什么？聚磷菌體多少？）