AYL-S7-304 放線桿菌屬、艾肯菌屬、金氏桿菌屬、心桿菌屬和色桿菌屬常規(guī)鑒定3.0

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1、安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院檢驗科作業(yè)指導書文件編號:AYL-S7-304版本:3.0頁碼:第6頁共6頁編寫者：沈繼錄審核者：批準人：生效日期：2012.1.1文件發(fā)放范圍：微生物組文件年度審核審核者：審核者：審核者：審核者：日期：日期：日期：日期：放線桿菌屬、艾肯菌屬、金氏桿菌屬、心桿菌屬和色桿菌屬常規(guī)鑒定1．概述　　放線桿菌屬、艾肯菌屬、金氏桿菌屬、心桿菌屬和色桿菌屬均為兼性厭氧革蘭陰性桿菌，除色桿菌屬外，營養(yǎng)要求較高，在含血液瓊脂平板或巧克力平板上才能生長，需5%~10%CO2,在腸道培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基或克氏雙糖鐵（KIA）中皆

2、不生長，無鞭毛，革蘭染色著色不均勻。a)放線桿菌屬呈球形（0.3~0.5μm×0.6~1.4μm）或短桿狀；孵育24h后，形成光滑、圓形、凸起、淡藍色、直徑2mm菌落，或粗糙型菌落。牢固黏附于瓊脂上不易刮脫。伴放線桿菌菌落隨培養(yǎng)時間延長，呈星狀發(fā)射樣皺紋；在液體培養(yǎng)基中，菌落形成顆粒黏附管壁。該屬菌株發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，多數(shù)菌種氧化酶、觸酶、脲酶陽性。b)艾肯菌屬大多呈細長、筆直、兩端圓、長1.5~4μm革蘭陰性桿菌，在血瓊脂平板培養(yǎng)48h后形成直徑1~2mm的菌落，中心向瓊脂深層凹陷，邊緣侵蝕狀生長，有次氯酸氣味，數(shù)天后變淡黃色

3、。生化反應不活潑，不分解糖類，氧化酶陽性，硝酸鹽還原試驗陽性，觸酶、脲酶、吲哚陰性。c)金氏桿菌屬為革蘭陰性（0.4μm×2~3μm）短小桿菌，成對或短鏈狀排列。在血瓊脂平板上培養(yǎng)48h形成1~2mm兩種不同類型菌落；一種瓊脂蝕痕凹陷，菌落邊緣呈蔓延狀生長；另一種中間凸起，無凹陷和蔓延狀。金氏桿菌有狹小的β-溶血環(huán)；氧化酶陽性，觸酶、脲酶、苯丙氨酸脫氫酶、吲哚、枸櫞酸鹽、明膠及DNA酶均陰性。發(fā)酵葡萄糖須在培養(yǎng)基中補充營養(yǎng)物質(zhì)。d)人類心桿菌革蘭陰性（0.5~0.75μm×1~3μm）桿菌，染色不規(guī)則，具有多染性，單個或成對、有時呈

4、短鏈或葡萄狀排列，培養(yǎng)環(huán)境需保持一定的濕度，在血瓊脂平板上孵育48h后，菌落呈圓形、凸起、直徑1mm，凹陷嵌入瓊脂。發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，氧化酶、吲哚陽性，觸酶、脲酶陰性。e)紫色色桿菌革蘭陰性（0.8~1.2μm×2.5~6.1μm）桿菌，端極鞭毛1~4根或側(cè)生鞭毛，有動力。營養(yǎng)要求不高，在普通瓊脂培養(yǎng)基上30~35℃，培養(yǎng)24h，菌落1~2mm，圓形、光滑、濕潤，呈鮮艷紫羅蘭色，可有β-溶血環(huán)。某些菌株不產(chǎn)色，發(fā)酵葡萄糖、果糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖、木糖、甘露醇，硝酸鹽還原、枸櫞酸鹽利用、液化明膠試驗均陽性，多數(shù)菌株氧化酶陽性，

5、觸酶陽性。2．常規(guī)鑒定安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院檢驗科作業(yè)指導書文件編號:AYL-S7-304版本:3.0頁碼:第6頁共6頁a)放線桿菌屬菌種氧化酶陽性、發(fā)酵葡萄糖，動力陰性，易與嗜血桿菌、巴斯德菌屬混淆，鑒定特點為血瓊脂上發(fā)育緩慢，菌落具有發(fā)射狀皺紋，粘稠不易刮取。其生化特性見表1。b)嚙蝕艾肯菌鑒別要點是不分解糖類，鳥氨酸脫羧酶陽性，硝酸鹽還原試驗陽性，其生化特性及相關(guān)菌種鑒別見表2。c)金氏桿菌屬與其他正常菌群混合檢出較困難，可用含克林霉素或萬古霉素的選擇性培養(yǎng)基，血培養(yǎng)儀能培養(yǎng)出體液中的金氏桿菌。鑒定時應注意與奈瑟菌某些菌種區(qū)

6、別，見表3。d)人類心桿菌鑒定依據(jù)為革蘭陰性桿菌，多形性，氧化酶陽性，發(fā)酵葡萄糖，吲哚陽性（反應較弱，應選擇色氨酸豐富的培養(yǎng)基延長孵育時間（>2天），并用二甲苯濃縮靛基質(zhì)）。生化特性及鑒別見表2。e)紫色桿菌因產(chǎn)紫色桿菌素很容易與其他細菌鑒別，但不產(chǎn)色素菌株需與氣單胞菌屬細菌鑒別：本菌賴氨酸脫羧酶陰性，不分解麥芽糖、甘露醇，可與之區(qū)別。3．抗菌藥物敏感試驗和抗菌藥物敏感性　　上述各菌屬菌種當前尚無抗菌藥物敏感試驗標準操作方法和解釋標準?！　∮袌蟾娣啪€桿菌屬對青霉素、頭孢菌素、四環(huán)素、氟奎諾酮類敏感，但也有部分產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌株。金氏

7、桿菌對β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯類、復方新諾明和奎諾酮類抗菌藥物敏感，產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌株對含克拉維酸復合制劑抗菌藥物敏感。人類心桿菌對克林霉素耐藥，對其他抗菌藥物敏感，已有報道部分菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶。紫色色桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥，氨基糖苷類敏感性不定，環(huán)丙沙星、復方新諾明、四環(huán)素、亞胺培南敏感。4．結(jié)果報告和解釋　　嗜血桿菌屬、放線桿菌屬、心桿菌屬、艾肯菌屬、金氏桿菌屬細菌統(tǒng)稱為HACEK群細菌，均為人類口腔正常菌群，主要引起心內(nèi)膜炎。該類菌種引起心內(nèi)膜炎，病程較長（2周~6個月），贅生物大，易形成栓賽；血液培養(yǎng)生長慢（約

8、6天），瓣膜受損害嚴重。紫色色桿菌主要寄生在水、土壤及腐敗有機物，人類通過水和土壤等感染傷口和創(chuàng)面，亦有經(jīng)食物進入人體，引起腹瀉、泌尿道感染、敗血癥、腦膜炎等，以兒童多見。表1放線桿菌屬與嗜沫嗜血桿菌的生化特性試驗伴放線放線桿菌馬駒放