甘草多糖提取過(guò)程中除蛋白方法研究文獻(xiàn)綜述

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1、文獻(xiàn)綜述甘草多糖提取過(guò)程中除蛋白方法研究1前言多糖是除核酸和蛋白質(zhì)之外的另一類重要的生命物質(zhì)，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物等有機(jī)體中，具有能量?jī)?chǔ)存、結(jié)構(gòu)支持、防御功能等多方面的生物功能：同時(shí)多糖聯(lián)系著細(xì)胞與細(xì)胞之間及細(xì)胞與外界的能量和物質(zhì)傳遞，決定著大分子與細(xì)胞及與其它分子之間的相互作用。近年來(lái)，植物、海洋生物及菌類等來(lái)源的多糖己作為有生物活性的天然產(chǎn)物中的一個(gè)重要類型出現(xiàn)，各種多糖所具有的抗腫瘤、免疫、抗凝血、降血糖和抗病毒活性已相繼被發(fā)現(xiàn)。據(jù)Franz等報(bào)道[1]，已有近百種植物的多糖被分離提取鑒定出來(lái)

2、，這類多糖來(lái)源廣泛且沒(méi)有細(xì)胞毒性，應(yīng)用于生物體毒副作用小，因此多糖生物資源的開(kāi)發(fā)利用和研究日益活躍，成為天然藥物、生物化學(xué)、生命科學(xué)的研究熱點(diǎn)，糖生物學(xué)也被稱為“生物化學(xué)最的巨大前沿之一”，成為繼基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)滯后的另一研究熱點(diǎn)。多糖結(jié)構(gòu)復(fù)雜，其生物活性與其純度和化學(xué)結(jié)構(gòu)有著重要的關(guān)系。因此，對(duì)多糖的研究開(kāi)發(fā)包含了多糖的提取，分離、純化。‘甘草屬(GlycyrrhizaL)植物為豆科蝶形花亞科多年生草本植物。該屬植物共有29種6變種，我國(guó)產(chǎn)18種3變種，其中烏拉爾甘草(GuralensisFisch．

3、)、脹果甘草(GlycyrrhizainflataBat．)和光果甘草(GlycyrrhizaglabraL．)被各版中國(guó)藥典收載，為傳統(tǒng)中藥甘草的來(lái)源。甘草作為我國(guó)最常用傳統(tǒng)中藥之一，素有“十方九草”之稱，具有補(bǔ)脾益氣，清熱解毒，祛痰止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥之功效，民間用于治療乳腺炎、胃及十二指腸潰瘍、脾胃虛弱、咳嗽、肝炎、咽喉腫痛、食物中毒等癥[2]。2甘草多糖2.1甘草多糖的化學(xué)組成前蘇聯(lián)學(xué)者曾對(duì)光果甘草(GlycyrrhizaglabraL．)和粗毛甘草(GlycyrrhizaasperaPall．

4、)的地上部分和根中的多糖進(jìn)行比較研究，結(jié)果表明兩者地上部分分別含水溶性多糖0．8％和4．0％，果膠含量均為5．87％，其多糖組分也相似，均由鼠李糖、萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，而光果甘草根中的水溶性多糖則為1．6％f[3]。趙秀英等進(jìn)一步證實(shí)烏拉爾甘草種子中的多糖為半乳甘露聚糖，其摩爾比為1：2．06。劉丙燦等從烏拉爾甘草根的稀堿提取液中分離得到一種分子量為4000Da、無(wú)分支的a-D-(1-4)葡聚糖。周蓉等對(duì)烏拉爾甘草多糖分離純化后，樣品經(jīng)高效毛細(xì)管電泳分析表明，該多糖組分由鼠李糖、葡萄

5、糖、阿拉伯糖和半乳糖組成，并以葡聚糖為主鏈[4]。2.2．甘草多糖藥理作用研究概況2．1免疫調(diào)節(jié)作用Tomada等研究從烏拉爾甘草根中分得的多糖UA、UB、UC及西北甘草匍匐莖中的多糖GA的活性，發(fā)現(xiàn)UA、UC和GA具有相當(dāng)強(qiáng)的抗補(bǔ)體活性和堿性磷酸酯酶誘發(fā)活性，UB的活性相對(duì)較弱[5]。Zhao，J．E等發(fā)現(xiàn)烏拉爾甘草根中的水溶性粗多糖GR具有抗補(bǔ)體，促有絲分裂和增強(qiáng)清除免疫復(fù)合物活性，經(jīng)溴化十六烷基三甲胺作用后產(chǎn)生的5個(gè)組分中，含60％半乳糖醛酸的GR-2免疫調(diào)節(jié)作用最強(qiáng)，抗補(bǔ)體活性和促有絲分裂活性可能是

6、由多糖復(fù)合物中的聚半乳糖醛酸部分引起[6]。Yamada等研究發(fā)現(xiàn)含烏拉爾甘草等10種草藥的日本復(fù)方藥Juzen-Taiho—To具有免疫調(diào)節(jié)活性，其中的甘草多糖活性最強(qiáng)，過(guò)碘酸氧化后活性則降低[7]。Kiyohara，H．進(jìn)一一步證實(shí)Juzen-Taiho．To的激活補(bǔ)體、促有絲分裂、增強(qiáng)IL-2產(chǎn)生能力等活性與其中來(lái)自烏拉爾甘草等草藥的多糖的精細(xì)結(jié)構(gòu)有關(guān)。果膠類、果膠阿拉伯半乳聚糖的中性l，6-半乳糖和雜多糖側(cè)鏈對(duì)其激活補(bǔ)體、促有絲分裂活性的影響較大，而聚鼠李半乳糖醛酸II型多糖經(jīng)硼酸鹽二酯作用產(chǎn)生的二

7、聚體與其IL-2產(chǎn)生能力的增強(qiáng)有關(guān)[8]。有實(shí)驗(yàn)對(duì)甘草多糖及高碘酸氧化還原產(chǎn)物，控制Smith降解產(chǎn)物的抗補(bǔ)體活性和堿性磷酸酯酶的誘發(fā)活性進(jìn)行了研究，結(jié)果控制Smith降解產(chǎn)物呈現(xiàn)明顯的活性[9]。還有實(shí)驗(yàn)表明，從甘草的酸性多糖組分中分離的3種酸性多糖(GR-2IIa，GR-2IIb，GR-2IIc、)，具有明顯的抗補(bǔ)體活性，且GR-2IIc具有促有絲分裂活性。GR-2IIc結(jié)構(gòu)中的鼠李半乳糖醛酸聚糖核心PG-1能夠激活內(nèi)毒素介導(dǎo)的凝結(jié)因子，鱟變形細(xì)胞溶解物試驗(yàn)(LAL)顯陽(yáng)性，與甘草多糖的抗補(bǔ)體、促有絲分

8、裂、調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞Fc受體興奮性等活性有關(guān)[10]。Hwang．Bng-Hyum等對(duì)烏拉爾甘草根中的粗多糖GU-37及其分離純化組分的活性研究表明，GU-3能促進(jìn)派爾斑介導(dǎo)的骨髓細(xì)胞增殖能力，增強(qiáng)NK-cell介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞毒性，這是由其中的果膠阿拉伯半乳糖醛酸和果膠類引起的[11]。鄭堯等人采用印度墨汁廓清實(shí)驗(yàn)法測(cè)定甘草多糖對(duì)小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)中的單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)功能的影響。結(jié)果表明GPS能提高小鼠RES