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1、技術(shù)非洲豬瘟病毒實(shí)驗室檢測方法研究進(jìn)展■文/山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院莊金秋梅建國謝金文李峰沈志強(qiáng)了間接ELISA方法檢測ASFV抗體，摘?要非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒引起的豬的一種急性、熱性、高度接具有較好的敏感性和特異性。Pastor觸性傳染病，其臨床癥狀與豬瘟極其相似。本病已在非洲、歐洲和美洲等幾[2]等(1990)分別以ASFV主要結(jié)構(gòu)蛋白十個國家暴發(fā)。雖然我國尚未發(fā)生，但防控其傳入的形勢也非常嚴(yán)峻。本文VP73和病毒感染的細(xì)胞培養(yǎng)物中高特綜述了非洲豬瘟病毒最新實(shí)驗室檢測方法研究進(jìn)展，以期為我國開展非洲豬異胞質(zhì)可溶性抗原(CS-P)建立了兩種瘟的監(jiān)測及綜合防
2、控提供技術(shù)參考。間接ELISA方法，兩種方法特異性均關(guān)鍵詞非洲豬瘟；非洲豬瘟病毒；檢測；研究進(jìn)展較高，但是CS-P抗原比VP73抗原至少能提前2d檢測出ASFV抗體。Vidal洲豬瘟(AfricanSwineFever，預(yù)防疫苗和治療藥物，防止疫情擴(kuò)大[3]非等(1997)用VP73單抗建立的固相ASF)是由非洲豬瘟病毒科非洲的唯一有效措施就是撲殺。因此事先ELISA，能夠檢測到濃度為0.5μg/mL豬瘟病毒(AfricanSwineFeverVirus，建立簡便、快速、準(zhǔn)確的ASFV檢測2的VP73抗原和2.3×10pfu/mL的全病ASFV)感染引起的家豬和
3、野豬的一種方法顯得十分必要。本文綜述了ASFV[4]毒顆粒。Hutchings等(2006)比較了用急性、熱性、高度接觸性傳染病。臨最新實(shí)驗室檢測方法研究進(jìn)展，以期全病毒多抗血清和針對VP73蛋白的單床癥狀與豬瘟極其相似，以高熱、皮為我國開展ASF的監(jiān)測提供技術(shù)參考。抗進(jìn)行間接夾心ELISA檢測ASFV，顯膚發(fā)紺、內(nèi)臟器官嚴(yán)重出血、呼吸障1?血清學(xué)檢測方法示多抗血清的敏感性高于單抗。Perez礙和神經(jīng)癥狀為主要特征。本病傳播[5]等(2006)以昆蟲細(xì)胞表達(dá)的P30重快、致死率高，對養(yǎng)豬業(yè)危害巨大，1.1酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)組蛋白為包被抗原，建立了檢測
4、ASFV是我國一類動物疫病和世界動物衛(wèi)ELISA應(yīng)用于血清抗體的檢測，抗體的間接ELISA方法，敏感性高，生組織(OIE)規(guī)定的必須報告的動物具有操作方便、特異性較好、靈敏可用于ASFV特異性抗體的早期檢疫病，受到世界各國的高度重視。本度高的特點(diǎn)，適用于大批量樣品的檢[6]測。Gallardo等(2009)利用重組蛋病是唯一以節(jié)肢動物作為傳播媒介的測，OIE將ELISA作為診斷ASF的首白pK205R、pB602L、p104R和P54DNA病毒。迄今為止，ASF已在非洲、選血清學(xué)方法。ASFV含有約150種建立的ELISA檢測方法具有較高的敏歐洲和美洲等幾十個國
5、家暴發(fā)。雖然蛋白，目前國內(nèi)外常用作檢測抗原的[7]感性和特異性。蔣正軍等(2000)以我國尚未發(fā)生，但防控ASF傳入的形蛋白有VP73、VP72、P54、P32、[1]桿狀病毒表達(dá)的ASFVVP72蛋白為抗勢非常嚴(yán)峻。目前，本病尚無有效的P30等。Wardly等(1979)首次建立原，研究和組裝了間接ELISA抗體檢基金項目：山東省重點(diǎn)研發(fā)計劃項目(2015GSF121027)；山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)測試劑盒，具有反應(yīng)體系小、快速、體系生豬產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊項目(SDAIT-08-17)。32規(guī)模養(yǎng)豬MODERNSWINEINDUSTRY特異等優(yōu)點(diǎn)，且比Dot-ELI
6、SA方法更1.2膠體金免疫層析(GICA)試紙條胞進(jìn)行檢測，3d后觀察到噬斑?？蓪8][18]加敏感。仇華磊(2006)采用大腸桿張鑫宇等(2014)用原核表達(dá)的ASFV進(jìn)行抗原定量分析。此方法快速、菌表達(dá)的GST-VP72融合蛋白為包被ASFVP54重組蛋白制備了ASFV抗體特異，不用借助其他儀器，肉眼便可[9][23]抗原，建立了間接ELISA。朱紅(2007)快速檢測膠體金試紙條，通過對ASFV觀察結(jié)果。Pastor等(1992)用細(xì)胞成功獲得5株分泌抗ASFVVP72蛋不同感染時期141份豬血清樣品進(jìn)行質(zhì)可溶性抗原CS-P，建立了斑點(diǎn)免疫白單克隆抗體的
7、細(xì)胞株，也建立了間比對檢測，顯示該試紙條在感染早期(DIA)檢測方法，敏感性與OIE推薦的[10][24]接ELISA方法。李秋霞(2010)以大的符合率高于OIE推薦的ELISA檢測ELISA方法相當(dāng)。Marco等(2007)[19]腸桿菌表達(dá)的ASFVpET32a-VP73L方法。劉波(2014)也運(yùn)用原核表達(dá)建立了免疫組化法，用來檢測急性感重組蛋白作為包被原，也建立了間接系統(tǒng)和膠體金免疫層析技術(shù)，對ASFV染ASFV豬的扁桃體組織病理學(xué)變化，[11]ELISA方法。曾少靈等(2013)利用快速檢測試紙條的技術(shù)進(jìn)行了研究。通過檢測發(fā)現(xiàn)，感染ASFV豬有出血、
8、[20]桿狀病毒表達(dá)載體
